| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
W146 is a selective antagonist of the Sphingosine 1-Phosphate Receptor Subtype 1 (S1P1). It is the (R)-enantiomer of 3-amino-4-(3-hexylphenylamino)-4-oxobutyl phosphonic acid, while its inactive enantiomer is W140 [2,3].
S1PR1 (EC50 = 398 nM)[1]. W146 TFA targets sphingosine-1-phosphate receptor 1 (S1PR1), a G protein-coupled receptor. It is a selective antagonist of S1PR1 with a Ki of approximately 70-80 nM and an EC50 of 398 nM. The compound blocks S1PR1-mediated signaling pathways. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
W146 是 S1PR1 的拮抗剂，其 Ki 值约为 70–80 nM[1]。W146 预处理显著提高了活化裂解型 caspase-3 的含量。W146 治疗后，S1P 诱导的 EPC 细胞凋亡减少现象完全消失[2]。在大鼠骨髓来源的内皮祖细胞 (EPC) 中，用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟可显著抑制 S1P 诱导的细胞增殖（MTS 法检测）。此外，W146 还阻断了 S1P 诱导的 Akt 磷酸化（Western blot 检测）以及 S1P 诱导的 VEGF 分泌和表达。此外，W146 (10 μM) 预处理显著逆转了 S1P 对 H₂O₂ 诱导细胞凋亡的保护作用，表现为 TUNEL 标记指数和 cleaved caspase-3 水平升高 [3]。W146 是一种 S1PR1 拮抗剂，其 Ki 值约为 70-80 nM，EC50 值为 398 nM。它是一种高选择性的鞘氨醇-1-磷酸受体亚型 1 (S1P1) 拮抗剂。该化合物常用于研究 S1PR1 在各种生物过程中的作用。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在给予 AMD3100 之前预先腹腔注射 W146（5 mg/kg）可使 KSL-HSPC 动员增加约 8 倍，与单独使用 AMD3100 处理的小鼠相比，CFU-G/M 集落形成实验证实了这一点 [3]。W146 对 KSL-HSPC 动员的增强作用是特异性的，因为预先注射 W140 并不影响 AMD3100 刺激的 KSL-HSPC 的活化。注射 W146、W140、JTE013 或 Cay10444 后，小鼠的基础白细胞计数保持不变 [3]。在C57BL/6小鼠中，预先腹腔注射W146（5 mg/kg体重）1小时，再皮下注射AMD3100（5 mg/kg体重），可显著增强AMD3100刺激的Kit+/Sca-1+/Lin- (KSL)造血干细胞（HSPC）向外周血的动员。通过CFU-G/M集落形成实验测得，W146介导的增强作用约为8倍。单独使用W146对KSL-HSPC的动员没有影响[2]。W146 TFA的体内活性数据有限。作为一种S1PR1拮抗剂，它可能对免疫细胞迁移和炎症反应产生影响。需要进一步的体内研究来全面阐明其药理作用。
|
| 酶活实验 |
体外受体结合实验测定W146与S1PR1的亲和力。Ki和EC50值通过竞争性结合实验和功能性实验确定。选择性通过与其他鞘氨醇-1-磷酸受体的测试来验证。
|
| 细胞实验 |
细胞凋亡分析[2]
细胞类型： 内皮祖细胞 (EPCs)。 测试浓度： 10 μM。 孵育时间： 加入 S1P 前 30 分钟。 实验结果： 增加活化裂解型 caspase-3 水平。 内皮祖细胞 (EPC) 增殖实验 (MTS)：将大鼠骨髓来源的 EPC 以 1×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，并在无血清培养基中培养 12 小时。细胞用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟，然后用 S1P (800 nM) 刺激。 8 小时后，加入 MTS 试剂（20 μL/孔），继续孵育 8 小时。使用酶标仪测量 490 nm 波长处的吸光度值 [3]。 EPC 细胞凋亡检测 (TUNEL)：EPC 细胞先用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟，再用 S1P (800 nM) 处理 30 分钟，最后用 H₂O₂ (600 μM) 处理 6 小时。根据试剂盒说明书，使用 TUNEL 试剂盒固定并染色细胞。使用 DAPI 进行核染色。在共聚焦显微镜下计数 TUNEL 阳性细胞，并将阳性细胞数与总细胞数的比值计算为标记指数 [3]。 蛋白质印迹分析：将内皮祖细胞 (EPC) 培养于 6 孔板中，待细胞汇合度达到 80% 后，用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟，随后用 S1P (800 nM) 刺激 30 分钟（用于检测 Akt 磷酸化）或 24 小时（用于检测 VEGF 表达）。收集细胞裂解液进行 SDS-PAGE 电泳，然后转移至 PVDF 膜，并用针对磷酸化 Akt、总 Akt、裂解型 caspase-3、VEGF 和 GAPDH 的抗体进行检测。采用增强化学发光法显色 [3]。 基于细胞的检测方法用于评估 S1PR1 介导的信号抑制。功能性检测方法用于评估 W146 阻断 S1PR1 激动剂诱导的反应（例如钙动员、细胞迁移或下游信号通路激活）的能力。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：小鼠（4-6周龄）[3]。
剂量：5 mg/kg。 给药途径：腹腔注射，在AMD3100（ADM）给药前1小时。 实验结果：与预先用葡聚糖处理后再给予AMD3100的小鼠相比，KSL-HSPC动员显著增加。 HSPC动员研究（小鼠）：C57BL/6小鼠（6-8周龄，每组5只）腹腔注射W146（5 mg/kg体重）或载体。1小时后，动物接受AMD3100（5 mg/kg，皮下注射）。给予 AMD3100 两小时后，从下腔静脉采集约 500 μL 外周血至 EDTA 抗凝管中。进行全血细胞计数，红细胞裂解后，用谱系标记物 Sca-1 和 c-Kit 抗体对 KSL-HSPC 进行染色，然后通过流式细胞术进行分析。采用甲基纤维素培养基进行 CFU-G/M 集落形成实验 [2]。 EPC 研究（大鼠）：体外实验采用从 Sprague-Dawley 大鼠分离的大鼠骨髓来源内皮祖细胞 (EPC)。在 S1P 刺激前 30 分钟，用浓度为 10 μM 的 W146 处理细胞 [3]。 体内疗效在 S1PR1 介导的疾病（例如自身免疫性疾病、炎症和癌症）的动物模型中进行评估。评估该化合物调节免疫细胞迁移和炎症反应的能力。还需要进一步研究来全面了解其体内活性。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
W146 TFA 以即用型 10 mM DMSO 溶液和用于研究的固体材料两种形式提供。作为一种小分子 S1PR1 拮抗剂，它可能具有良好的口服生物利用度。需要进一步的药代动力学研究来确定其 ADME 特性。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠造血干细胞动员研究中，腹腔注射给予小鼠 5 mg/kg 的 W146，未观察到明显的毒性反应。使用无活性的对映体 W140 作为对照，也未观察到任何作用 [2]。在大鼠内皮祖细胞 (EPC) 研究中，体外使用浓度为 10 μM 的 W146，未观察到细胞毒性 [3]。W146 TFA 的临床前毒性数据有限。作为一种 S1PR1 拮抗剂，它可能具有与免疫调节相关的靶向作用。应遵循标准的实验室安全预防措施。需要进一步的毒理学研究以进行全面的安全性评估。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
[(3R)-3-氨基-4-[(3-己基苯基)氨基]-4-氧代丁基]-膦酸是一种氨基酸酰胺。
W146 TFA 是一种选择性 S1PR1 拮抗剂，其 Ki 值约为 70-80 nM，EC50 值为 398 nM。它常用于体外药理学和信号传导研究，以探索 S1PR1 介导的信号通路。该化合物是研究 S1PR1 在包括免疫细胞迁移、炎症和癌症在内的各种生物过程中的作用的重要研究工具。 |
| 分子式 |
C18H28F3N2O6P
|
|---|---|
| 分子量 |
456.393696784973
|
| 精确质量 |
456.163
|
| 元素分析 |
C, 47.37; H, 6.18; F, 12.49; N, 6.14; O, 21.03; P, 6.79
|
| CAS号 |
909725-62-8
|
| 相关CAS号 |
W146;909725-61-7
|
| PubChem CID |
6857802
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| tPSA |
150
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
23
|
| 分子复杂度/Complexity |
400
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
P(CCC(C(NC1=CC=CC(=C1)CCCCCC)=O)N)(=O)(O)O.FC(C(=O)O)(F)F
|
| InChi Key |
JDWCNCPWPLHFEX-XFULWGLBSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H27N2O4P.C2HF3O2/c1-2-3-4-5-7-13-8-6-9-14(12-13)18-16(19)15(17)10-11-23(20,21)22;3-2(4,5)1(6)7/h6,8-9,12,15H,2-5,7,10-11,17H2,1H3,(H,18,19)(H2,20,21,22);(H,6,7)/t15-;/m1./s1
|
| 化学名 |
[(3R)-3-amino-4-(3-hexylanilino)-4-oxobutyl]phosphonic acid;2,2,2-trifluoroacetic acid
|
| 别名 |
W-146 TFA; 909725-62-8; W 146 TFA; [(3R)-3-Amino-4-[(3-hexylphenyl)amino]-4-oxobutyl]-phosphonic acid mono(trifluoroacetate); W146 trifluoroacetate salt; W146 TFA; W146 (TFA);
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 22.73 mg/mL (49.80 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1911 mL | 10.9555 mL | 21.9111 mL | |
| 5 mM | 0.4382 mL | 2.1911 mL | 4.3822 mL | |
| 10 mM | 0.2191 mL | 1.0956 mL | 2.1911 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
