| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p53-MDM2 interaction
YH239-EE is a specific antagonist of the p53-MDM2 protein-protein interaction, with a Ki value of 1.6 nM as determined by surface plasmon resonance (SPR) assay [1] ; - In a homogeneous time-resolved fluorescence (HTRF) assay for p53-MDM2 binding inhibition, YH239-EE exhibited an IC50 of 9.6 nM [1] . |
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| 体外研究 (In Vitro) |
通过阻止 p53 和 MDM2 之间的相互作用，YH239-EE 减少了具有野生型 p53 的 OCI-AML-3 细胞的生长。四种 AML 细胞（具有野生型 p53 的 OCI-AML-3 和 MOLM-13、具有 p53 突变的 NB4 和具有 p53 缺失的 HL60）对 YH239-EE 通过激活而引起的细胞周期停滞和强效细胞凋亡敏感。 p53 和下游目标。[1]
AML细胞系中的抗增殖活性： - OCI-AML3（野生型TP53）：YH239-EE处理72小时对细胞增殖的IC50为120 nM（CellTiter-Glo活力实验） [1] ; - MV4-11（野生型TP53）：YH239-EE处理72小时对细胞增殖的IC50为210 nM（CellTiter-Glo活力实验） [1] ; - K562（TP53缺失型）：即使浓度高达10 μM，YH239-EE也无显著抗增殖作用，表明其活性依赖于TP53 [1] ; - p53通路激活： - OCI-AML3细胞经YH239-EE（200 nM，24小时）处理后，Western blot检测显示p53蛋白水平升高约5倍，p53靶基因p21蛋白水平升高约4倍 [1] ; - 实时定量PCR（qPCR）分析表明，YH239-EE（200 nM，24小时）使OCI-AML3细胞中p21 mRNA表达上调约6倍，PUMA mRNA上调约5.5倍 [1] ; - 凋亡诱导作用： - OCI-AML3细胞经YH239-EE（500 nM，48小时）处理后，Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测显示凋亡率约为35%，而溶媒对照组约为5% [1] ; |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用
OCI-AML3皮下异种移植模型： - 6-8周龄雄性裸鼠皮下接种5×10⁶ OCI-AML3细胞，肿瘤达~150 mm³时随机分组。YH239-EE以25 mg/kg剂量腹腔注射，每日1次，连续14天 [1] ; - 治疗结束时，YH239-EE处理组肿瘤体积较溶媒组减少约60%，肿瘤重量较溶媒组减少约55% [1] ; - 肿瘤组织免疫组化（IHC）染色显示，YH239-EE组p53阳性细胞数较溶媒组增加约3.5倍，p21阳性细胞数增加约3倍 [1] ; |
| 酶活实验 |
p53-MDM2结合亲和力SPR实验：
1. 将MDM2蛋白（1-125位残基）通过胺偶联法共价固定在CM5传感器芯片上，运行缓冲液为含0.05%表面活性剂的HEPES缓冲盐水（pH 7.4） [1]
; 2. 系列浓度的YH239-EE（0.1-100 nM）以30 μL/min流速注入芯片表面，结合相持续120秒，解离相持续600秒 [1] ; 3. 传感器图采用1:1结合模型拟合分析，计算得到Ki值为1.6 nM [1] ; - p53-MDM2相互作用抑制HTRF实验： 1. 反应体系包含生物素化p53肽段（17-29位残基）、His标签MDM2蛋白（1-125位残基）、Eu标记抗His抗体、链霉亲和素-XL665及系列浓度YH239-EE（1-1000 nM），溶于实验缓冲液 [1] ; 2. 混合物在384孔板中室温孵育2小时，使用HTRF兼容酶标仪检测620 nm和665 nm处荧光 [1] ; 3. 计算665 nm/620 nm荧光比值，拟合剂量-反应曲线得到IC50值为9.6 nM [1] ; |
| 细胞实验 |
在对数生长期收获细胞系并接种之前，将细胞系暴露于 p53-MDM2 拮抗剂。使用台盼蓝 0.4% 染色和 Countess 载玻片计数来计数细胞并确定其活力。
细胞增殖实验（CellTiter-Glo法）： 1. AML细胞（OCI-AML3、MV4-11、K562）以2×10³细胞/孔接种于384孔板，37°C、5% CO₂培养过夜 [1] ; 2. 加入系列浓度YH239-EE（0.01 nM-10 μM），继续培养72小时 [1] ; 3. 每孔加入CellTiter-Glo试剂，室温孵育10分钟后检测发光值，使用GraphPad Prism软件计算IC50值 [1] ; - p53及靶蛋白Western blot检测： 1. OCI-AML3细胞以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，用YH239-EE（50-500 nM）或溶媒处理24小时 [1] ; 2. 含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测定蛋白浓度 [1] ; 3. 取30 μg蛋白进行12% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，5%脱脂牛奶室温封闭1小时，一抗（p53、p21、GAPDH）4°C孵育过夜 [1] ; 4. HRP标记二抗室温孵育1小时，ECL显色，ImageJ软件定量条带强度 [1] ; - 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI双染色法）： 1. OCI-AML3细胞经YH239-EE（500 nM）或溶媒处理48小时后收集，冷PBS洗涤两次 [1] ; 2. 细胞重悬于结合缓冲液，按实验规程加入Annexin V-FITC和PI染色，1小时内通过流式细胞术分析 [1] ; |
| 动物实验 |
OCI-AML3 皮下异种移植实验：1. 动物：雄性裸鼠（6-8 周龄，每组 n=6）饲养于 SPF 级条件下，12 小时光照/黑暗循环，自由摄食饮水 [1] ；2. 肿瘤接种：将 OCI-AML3 细胞（5×10⁶ 个细胞溶于 100 μL PBS 和 Matrigel 1:1 混合液中）皮下注射至每只小鼠右侧腹部 [1] ；3. 药物配制：将 YH239-EE 溶解于 10% DMSO、40% PEG400 和 50% 生理盐水的混合溶液中。超声处理以确保药物完全溶解 [1] 4. 治疗：当肿瘤体积达到约150 mm³时，每日一次腹腔注射YH239-EE（25 mg/kg），连续14天。对照组注射相同的溶剂混合物，但不注射药物[1]；5. 监测：每2天测量一次肿瘤体积（计算公式为长×宽²/2）和体重。实验结束时，切除肿瘤，称重，并固定用于免疫组化分析[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
裸鼠体内毒性：- 用 YH239-EE（25 mg/kg，腹腔注射，14 天）治疗的小鼠未出现明显的体重减轻（载体组：~23 g vs. 药物组：~22.5 g）[1]
; |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
YH239-EE 是 YH239 的乙酯衍生物，旨在增强其细胞渗透性，与母体化合物相比[1]
；- YH239-EE 与 MDM2 结合的结构基础：X 射线晶体学表明，YH239-EE 与 MDM2 的 p53 结合口袋（PDB 代码：4LXZ）结合，并与 MDM2 的 Tyr67、Gln72 和 Leu86 残基形成氢键[1] ；- YH239-EE 对 MDM2 具有高度选择性，即使浓度高达 10 μM，也几乎不与 MDMX（MDM2 的同源物）结合[1] ； |
| 分子式 |
C25H27CL2N3O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
504.41
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| 精确质量 |
503.137
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| 元素分析 |
C, 59.53; H, 5.40; Cl, 14.06; N, 8.33; O, 12.69
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| CAS号 |
1364488-67-4
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
56943013
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
763.3±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
415.4±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.615
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| LogP |
4.85
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| tPSA |
91.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
723
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C(N1)=C(C(N(CC2=CC=C(Cl)C=C2)C=O)C(NC(C)(C)C)=O)C3=C1C=C(Cl)C=C3)OCC
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| InChi Key |
OTUBDDRFPQLPKD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H27Cl2N3O4/c1-5-34-24(33)21-20(18-11-10-17(27)12-19(18)28-21)22(23(32)29-25(2,3)4)30(14-31)13-15-6-8-16(26)9-7-15/h6-12,14,22,28H,5,13H2,1-4H3,(H,29,32)
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| 化学名 |
ethyl 3-[2-(tert-butylamino)-1-[(4-chlorophenyl)methyl-formylamino]-2-oxoethyl]-6-chloro-1H-indole-2-carboxylate
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| 别名 |
YH239-EE; YH239EE; YH239 EE; YH239 Ethylester
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| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9825 mL | 9.9126 mL | 19.8251 mL | |
| 5 mM | 0.3965 mL | 1.9825 mL | 3.9650 mL | |
| 10 mM | 0.1983 mL | 0.9913 mL | 1.9825 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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