Acridine Orange base

别名: 吖啶橙;3,6-2(二甲胺)ㄚ啶;3,6-2(二甲基胺)ㄚ啶;溶剂橙15;3,6-双(二甲基氨基)吖啶
目录号: V51238 纯度: ≥98%
吖啶橙碱是一种细胞渗透性(穿透性)荧光染料,可以对生物体(病毒、寄生虫、病毒等)进行染色。
Acridine Orange base CAS号: 494-38-2
产品类别: Parasite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
100mg
500mg

Other Forms of Acridine Orange base:

  • 吖啶橙
  • 碱性橙 14
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
吖啶橙碱是一种具有细胞渗透性(穿透性)的荧光染料,可以将生物体(病毒、寄生虫、病毒等)染成亮橙色,并且当在适当的条件下(pH=3.5,Ex=460 nm)可以将人体吖啶橙碱染成亮橙色。橙色碱基与dsDNA结合时,发出绿色荧光(Ex=488,Em=520-524),与ssDNA(Ex=457,Em=630-644)或ssRNA结合时,发出红色荧光(Ex=457) ,Em=630-644),也可用于细胞周期测定。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
建议(这是我们建议的方案,应根据您的具体情况进行调整,因为它只是提供指导)。 1. 使用以下步骤可以对未固定细胞中的 DNA 和 RNA 进行不同的染色 [1]: (1) 将流式细胞仪设置为在 488 nm 处激发,使用发射滤光片,并区分红色荧光二向色镜发光(在 640 以上测量)或 650 nm)和绿色荧光(在 515-545 nm 处测量)。 (2) 将第一份细胞悬液的 0.2 mL 部分倒入一个小玻璃或塑料管中,例如容量为 2 或 5 mL 的管。在冰上保持凉爽。应逐渐加入 0.4 mL 冰冷的细胞透化液。将细胞置于冰上并等待 15 秒。 (4) 加入 1.2 mL 冰冷的吖啶橙碱染色液,轻轻搅拌。在黑暗中将细胞储存在冰上。 (5)加入吖啶橙碱染色液后2~10分钟,用流式细胞仪测量并记录细胞荧光。 2. 固定细胞的差异标记[1]: (1a) 在冰冷的 PBS 中冲洗细胞一次,并以约 106 个细胞/mL 的浓度悬浮培养细胞或血液样本中的细胞。 (1b) 对于粘附在组织培养板上的细胞:通过胰蛋白酶消化从培养皿或烧瓶中收集细胞,将其与漂浮在培养基中的细胞(主要是脱落的有丝分裂细胞和死细胞)混合,然后用含有血清的培养基洗涤该混合物一次使细胞失去活性。胰蛋白酶。大约 106 个细胞/mL 悬浮在冰冷的 PBS 中。 (1c) 对于从实体瘤中分离的细胞,以约 106 个细胞/mL 的密度在冰冷的 PBS 中冲洗细胞,除去用于解离细胞的任何酶。 (2) 在 15 mL 锥形玻璃管中加入 10 mL 冰冷的 70% 乙醇,并使用巴斯德移液器加入 1 mL 细胞悬液。将细胞置于冰上至少两个小时。 (3) 将管在 4°C、300 × g 下离心 5 分钟。除去所有乙醇,在冰冷的 PBS 中冲洗细胞一次,然后将它们以低于 2 × 106 个细胞/mL 的密度重新悬浮在相同的 PBS 中。 (4) 吸取细胞悬液0.2 mL(≤2×105个细胞),置于细管(如容量为2或5 mL的管)中。在冰上保持凉爽。 (5) 倒入0.4毫升冰冷的透化液。将细胞置于冰上并等待 15 秒。 (6) 加入吖啶橙碱染色液1.2 mL,冰冷。将细胞置于冰上。 (7)加入吖啶橙碱染色液后2~10分钟,用流式细胞仪测量并记录细胞荧光。
参考文献

[1]. Differential staining of DNA and RNA. Curr Protoc Cytom. 2004 Nov;Chapter 7:Unit 7.3.

[2]. Mirrett S. Acridine orange stain. Infect Control. 1982 May-Jun;3(3):250-2.

[3]. Lipophilic tracer Dil and fluorescence labeling of acridine orange used for Leishmania major tracing in the fibroblast cells. Heliyon. 2019 Dec 18;5(12):e03073.

其他信息
Acridine orange free base is a member of the class of aminoacridines that is acridine carrying two dimethylamino substituents at positions 3 and 6. The hydrochloride salt is the fluorescent dye 'acridine orange', used for cell cycle determination. It has a role as a fluorochrome and a histological dye. It is a member of aminoacridines, an aromatic amine and a tertiary amino compound.
A cationic cytochemical stain specific for cell nuclei, especially DNA. It is used as a supravital stain and in fluorescence cytochemistry. It may cause mutations in microorganisms.
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H19N3
分子量
265.35
精确质量
265.157
CAS号
494-38-2
相关CAS号
Acridine Orange hydrochloride;65-61-2;Acridine Orange zinc chloride salt;10127-02-3
PubChem CID
62344
外观&性状
Yellow to brown solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
468.6±25.0 °C at 760 mmHg
熔点
165ºC (dec.)(lit.)
闪点
237.2±23.2 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.710
LogP
4.65
tPSA
19.37
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
298
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C17H19N3/c1-19(2)14-7-5-12-9-13-6-8-15(20(3)4)11-17(13)18-16(12)10-14/h5-11H,1-4H3
化学名
3-N,3-N,6-N,6-N-tetramethylacridine-3,6-diamine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.7686 mL 18.8430 mL 37.6861 mL
5 mM 0.7537 mL 3.7686 mL 7.5372 mL
10 mM 0.3769 mL 1.8843 mL 3.7686 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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