Acridine Orange base

别名: 吖啶橙;3,6-2(二甲胺)ㄚ啶;3,6-2(二甲基胺)ㄚ啶;溶剂橙15;3,6-双(二甲基氨基)吖啶
目录号: V51238 纯度: ≥98%
吖啶橙碱是一种细胞渗透性(穿透性)荧光染料,可以对生物体(病毒、寄生虫、病毒等)进行染色。
Acridine Orange base CAS号: 494-38-2
产品类别: Parasite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
100mg
500mg

Other Forms of Acridine Orange base:

  • 吖啶橙
  • 碱性橙 14
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
吖啶橙碱是一种细胞可渗透的荧光染料,可将生物体(病毒、寄生虫等)染成亮橙色。在适当条件下(pH=3.5,激发波长=460 nm),吖啶橙碱与双链DNA结合时发出绿色荧光(激发波长=488 nm,发射波长=520-524 nm),与单链DNA(激发波长=457 nm,发射波长=630-644 nm)或单链RNA结合时发出红色荧光(激发波长=457 nm,发射波长=630-644 nm),也可用于细胞周期测定。
吖啶橙碱是一种细胞可渗透的、核酸选择性的荧光阳离子染料。它广泛应用于细胞生物学中,用于细胞周期测定和细胞自噬检测。当与双链 DNA (dsDNA) 结合时,它会发出绿色荧光(激发/发射波长 502/525 nm);当与单链 DNA (ssDNA) 或 RNA 结合时,它会发出红色荧光(激发/发射波长 460/650 nm)。
生物活性&实验参考方法
靶点
Acridine Orange base targets nucleic acids (DNA and RNA). It is a metachromatic dye that intercalates into double-stranded nucleic acids or binds to single-stranded nucleic acids and acidic organelles. Its differential fluorescence emission allows for the discrimination of dsDNA (green) from ssDNA and RNA (red). This property makes it a useful tool for studying cell cycle, apoptosis, and autophagy.
体外研究 (In Vitro)
建议(以下是我们建议的操作流程,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。1. 以下步骤可用于对未固定细胞中的 DNA 和 RNA 进行不同的染色[1]:(1) 将流式细胞仪的激发波长设置为 488 nm,使用发射滤光片,并区分红色荧光二向色镜发光(波长高于 640 或 650 nm)和绿色荧光(波长为 515-545 nm)。(2) 将 0.2 mL 的第一份细胞悬液倒入一个小型玻璃或塑料管中,例如容量为 2 或 5 mL 的管子。置于冰上冷却。(3) 缓慢加入 0.4 mL 冰冷的细胞透化溶液。将细胞置于冰上,等待 15 秒。(4) 轻轻搅拌加入 1.2 mL 冰冷的含吖啶橙的碱性染色溶液。将细胞置于冰上避光保存。 (5) 加入吖啶橙碱性染色液后2至10分钟,使用流式细胞仪测量并记录细胞荧光。2. 固定细胞的差异标记[1]:(1a) 对于悬浮培养细胞或血液样本,用冰冷的PBS缓冲液冲洗一次,并将细胞悬浮于约10⁶个细胞/mL的浓度。(1b) 对于贴壁于组织培养板的细胞:用胰蛋白酶消化收集培养皿或培养瓶中的细胞,将其与培养基中漂浮的细胞(主要是脱落的有丝分裂细胞和死细胞)混合,然后用含血清的培养基洗涤混合物一次,使细胞失活。将约10⁶个细胞/mL的细胞悬浮于冰冷的PBS缓冲液中。(1c) 对于从实体瘤中分离的细胞,用冰冷的PBS缓冲液冲洗细胞,使其浓度约为10⁶个细胞/mL,以去除用于解离细胞的任何酶。 (2) 用10 mL冰冷的70%乙醇填充一个15 mL锥形玻璃管,然后用巴斯德吸管加入1 mL细胞悬液。将细胞置于冰上至少2小时。(3) 将锥形管在4°C、300 × g下离心5分钟。去除所有乙醇,用冰冷的PBS缓冲液洗涤细胞一次,然后将细胞重悬于相同的PBS缓冲液中,使细胞密度低于2 × 10⁶个细胞/mL。(4) 吸取0.2 mL细胞悬液(≤2 × 10⁵个细胞),并将其置于一个小的离心管(例如2 mL或5 mL的离心管)中。保持冰凉。(5) 倒入0.4 mL冰冷的细胞膜通透化溶液。将细胞置于冰上,等待15秒。(6) 加入1.2 mL冰冷的吖啶橙碱性染色液。将细胞置于冰上。(7) 加入吖啶橙碱性染色液后2至10分钟,使用流式细胞仪测量并记录细胞荧光。
体外实验中,吖啶橙碱性染色液可用作活细胞染色剂,用于评估细胞活力、研究核酸含量和细胞器酸化。其异染性使其能够同时检测细胞中的DNA和RNA。此外,它还可用于检测顺势疗法药物的效价。
体内研究 (In Vivo)
吖啶橙碱通常不用于体内治疗,但广泛用于组织学和细胞学染色。其应用主要集中在科研和诊断领域。
酶活实验
吖啶橙碱的使用通常包括将细胞与染料孵育,然后洗涤,并通过荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。差异荧光发射用于定量核酸含量和评估细胞功能。
细胞实验
吖啶橙碱的细胞活性在多种细胞类型中得到评估。细胞用该染料染色后,通过流式细胞术或荧光显微镜分析其摄取和荧光情况。该染料对酸性细胞器(例如溶酶体)的染色能力也被用于研究自噬。
动物实验
吖啶橙碱不用于动物实验中的治疗。其用途仅限于细胞和组织的离体分析。
药代性质 (ADME/PK)
吖啶橙碱是一种小分子(分子量 265.35,C17H19N3)。它可溶于水和有机溶剂。为保持其稳定性,应避光并在适宜的温度下储存。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
吖啶橙碱的毒理学数据主要与其作为实验室试剂的用途相关。它是一种诱变剂,应谨慎操作。它不适用于人类或兽医用途。
参考文献

[1]. Differential staining of DNA and RNA. Curr Protoc Cytom. 2004 Nov;Chapter 7:Unit 7.3.

[2]. Mirrett S. Acridine orange stain. Infect Control. 1982 May-Jun;3(3):250-2.

[3]. Lipophilic tracer Dil and fluorescence labeling of acridine orange used for Leishmania major tracing in the fibroblast cells. Heliyon. 2019 Dec 18;5(12):e03073.

其他信息
吖啶橙游离碱属于氨基吖啶类化合物,其结构为吖啶环,在3位和6位分别带有二甲氨基取代基。其盐酸盐是荧光染料“吖啶橙”,用于细胞周期测定。它既可用作荧光染料,也可用作组织学染料。吖啶橙属于氨基吖啶类化合物,是一种芳香胺和叔胺化合物。它是一种阳离子细胞化学染色剂,特异性靶向细胞核,尤其是DNA。它可用作活细胞染色剂和荧光细胞化学染色剂。它可能导致微生物突变。
吖啶橙碱(CAS:494-38-2)是一种经典的、用途广泛的荧光染料,几十年来一直是细胞生物学领域的主力军。它能够区分DNA和RNA的染色,使其成为从细胞周期分析到自噬研究等众多应用领域中不可或缺的工具。它的持续使用凸显了它在基础研究中的实用性和重要性。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H19N3
分子量
265.35
精确质量
265.157
CAS号
494-38-2
相关CAS号
Acridine Orange hydrochloride;65-61-2;Acridine Orange zinc chloride salt;10127-02-3
PubChem CID
62344
外观&性状
Yellow to brown solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
468.6±25.0 °C at 760 mmHg
熔点
165ºC (dec.)(lit.)
闪点
237.2±23.2 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.710
LogP
4.65
tPSA
19.37
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
298
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C17H19N3/c1-19(2)14-7-5-12-9-13-6-8-15(20(3)4)11-17(13)18-16(12)10-14/h5-11H,1-4H3
化学名
3-N,3-N,6-N,6-N-tetramethylacridine-3,6-diamine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.7686 mL 18.8430 mL 37.6861 mL
5 mM 0.7537 mL 3.7686 mL 7.5372 mL
10 mM 0.3769 mL 1.8843 mL 3.7686 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们