| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Menin (menin-KMT2A interaction). [1][2]
In a homogeneous time-resolved fluorescence assay, the average IC50 of JNJ-75276617 against human menin was 0.1 ± 0.05 nM across 10 independent experiments. Against mouse menin, IC50 was 0.045 ± 0.002 nM. Against dog menin, IC50 was ≤0.066 ± 0.004 nM. [2] In a fluorescence polarization binding assay, the Ki values for JNJ-75276617 against wild-type menin, M327I mutant menin, and T349M mutant menin were 0.02 nM, 0.4 nM, and 3.8 nM, respectively. [2] Bleximenib oxalate specifically targets the protein-protein interaction between menin and MLL (KMT2A). Menin is a scaffold protein that binds to MLL fusion proteins, which is essential for the oncogenic transformation in MLL-rearranged leukemias. By inhibiting this interaction, the compound disrupts the binding of the menin-KMT2A complex to chromatin at target gene promoters. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在浓度为 0.1 至 1.0 μM 时，JNJ-75276617 可降低 KMT2A-r MOLM-14 和 NPM1c OCI-AML3 细胞中 menin 与靶基因启动子（MEIS1、HOXA9、HOXA10）的结合，与 DMSO 对照组相比，结合倍数降低了 1.4 至 24.7 倍。[2] JNJ-75276617 可抑制 KMT2A-r 和 NPM1c AML 细胞系中 menin-KMT2A 靶基因（MEIS1、JMJD1C、FLT3、MEF2C、PBX3）的 mRNA 表达，并增加分化标志物（ITGAM/CD11b、MNDA）的表达。 [2]
JNJ-75276617在以下急性髓系白血病（AML）细胞系中显示出抗增殖活性：MOLM-14（IC50 <0.1 μM）、MOLM-13（IC50 <0.1 μM）、MV4-11（IC50 <0.1 μM）、THP-1（IC50 >15 μM）、EOL-1（IC50 = 0.116 μM）、OCI-AML3（IC50 = 0.045 μM），以及B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）RS4;11（IC50 = 0.040 μM）。浓度高达10 μM，持续7天，对正常外周血单核细胞无影响。 [2] JNJ-75276617 处理 7 天后，以剂量依赖的方式诱导 MOLM-14、OCI-AML3 和 RS4;11 细胞凋亡。[2] JNJ-75276617 处理 3 天和 7 天后，诱导 MOLM-14 和 OCI-AML3 细胞中 CD11b 和 CD14 分化标志物的表达。在 KMT2A-AF9 转导的小鼠骨髓细胞中，200 nM JNJ-75276617 处理 10 天后，中性粒细胞样形态增加（28.9% ± 2.6% vs DMSO 组 10.65% ± 1.35%）。 [2] JNJ-75276617在第7天和第14天对13例NPM1c原发性AML患者样本中的6例表现出抗增殖活性，并诱导CD11b表达。它还在KMT2A-r B-ALL原发性患者样本中显示出抗增殖作用和剂量依赖性细胞凋亡。[2] JNJ-75276617与吉瑞替尼在MOLM-13细胞中显示出协同抗增殖作用（p<0.001）。[2] JNJ-75276617与维奈托克或维奈托克联合阿扎胞苷在MOLM-13细胞中显示出协同抗增殖作用。 [2] JNJ-75276617在MEN1M327I和MEN1T349M突变型MV4-11细胞中保持了强效的抗增殖活性（IC50分别为22.6 nM和53.59 nM）。[2] JNJ-75276617处理（0.3 μM，4天）可上调原发性AML样本中HLA-A和HLA-DR的mRNA和蛋白表达，且该过程依赖于CIITA。[1] JNJ-75276617预处理（0.3 μM，4天）可增强原发性AML样本（尤其是携带NPM1c和DNMT3A突变的样本）在同种异体和自体移植条件下的T细胞介导的细胞毒性。 [1] 体外实验表明，草酸布莱西美尼是一种高效抑制剂，对人源酶的IC₅₀值为0.1 nM，对小鼠酶的IC₅₀值为0.045 nM，对犬源酶的IC₅₀值≤0.066 nM。它在急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞系中表现出抗增殖活性。该化合物的高效性和选择性使其成为治疗MLL重排白血病的潜在候选药物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在皮下MOLM-14 AML异种移植小鼠模型中，每日口服30、50和100 mg/kg的JNJ-75276617（草酸盐形式），持续5周，可诱导剂量依赖性的肿瘤消退，消退率分别为70%、97%和99%（p<0.0001）。在50和100 mg/kg剂量组，停药3个月后，10/10和9/9个肿瘤均未复发。[2] 在KMT2A-AF6 AML PDX模型（CBAM-68552）中，JNJ-75276617治疗显著延长了小鼠的生存期，所有剂量组的生存期均延长超过89%（p<0.05），同时减少了人CD45+白血病细胞的数量，并增加了分化标志物（CD11b、CD13、CD14）的表达。 [2]在NPM1c AML PDX模型（LEXFAM-2734和AM7577）中，30、50或100 mg/kg剂量的JNJ-75276617分别使中位生存期超过133天和147天（对照组：74天和53.5天），显著延长了生存期（>66%至>169%，p<0.0001）。[2]在KMT2A-AF4 B-ALL PDX模型（CBAB-62871）中，每日30和100 mg/kg剂量的JNJ-75276617分别使生存期延长了>48%和>160%（p=0.002），并降低了骨髓中的白血病负荷。 [2] 在播散性 MOLM-13 模型中，JNJ-75276617 (10 mg/kg) 联合阿扎胞苷 (2 mg/kg) 和维奈克拉 (100 mg/kg) 可使生存期延长 277% (p<0.0001)，优于阿扎胞苷+维奈克拉方案 (53% ILS)。[2] 在播散性 OCI-AML3 NPM1c 模型中，JNJ-75276617 联合阿扎胞苷和维奈克拉可获得优于阿扎胞苷+维奈克拉的生存期，但疗效主要由 JNJ-75276617 驱动。[2] 在体内，草酸布莱西美尼已在癌症的临床前模型中进行了评估。作为一种口服活性化合物，它可用于动物模型研究其对肿瘤生长和存活的影响。其在体外表现出的强效活性表明，它在MLL重排白血病的体内治疗中具有强大的疗效潜力。
|
| 酶活实验 |
采用均相时间分辨荧光 (HTRF) 检测法定量分析了 JNJ-75276617 取代荧光素异硫氰酸酯 (FITC) 标记的 menin 结合基序 1 肽（源自 KMT2A）与铽标记的人、犬和小鼠 menin 结合的能力。将该化合物与 menin 和 FITC-MBM1 肽孵育，并使用酶标仪监测 TR-FRET 信号。在达到平衡的 300 或 420 分钟时报告抑制剂效力。使用 Prism 软件计算抑制率和效力。[2] 进行荧光偏振结合实验以评估 JNJ-75276617 与野生型、M327I 突变体和 T349M 突变体 menin 的结合情况。测定了KMT2A肽的剂量依赖性置换。[2]
通常使用生化分析方法评估menin-MLL相互作用的抑制情况，例如荧光偏振(FP)或时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)。使用重组menin和MLL肽来测量化合物破坏蛋白质-蛋白质相互作用的能力，并根据剂量反应曲线计算IC₅₀值。 |
| 细胞实验 |
为了筛选menin-KMT2A抑制剂，将冷冻保存的AML患者单核细胞解冻，重悬于含DNase I、MgSO4和肝素的培养基中，然后在含G-CSF、TPO和IL-3（均为20 ng/mL）的液体培养基中培养，或与MS5基质细胞共培养。细胞用DMSO或0.03、0.30和3.00 μM的JNJ-75276617处理14天，在第7天加入新鲜培养基和抑制剂。在第7天和第14天，用CD45-PECy7和CD117对细胞进行染色，并使用流式细胞仪测量荧光强度。 [1]
为检测细胞凋亡，将细胞用JNJ-75276617处理长达7天后，用膜联蛋白V和活/死细胞染料染色，然后进行流式细胞术分析。[2] 为评估细胞分化，用CD11b和CD14抗体对细胞进行染色，然后进行流式细胞术分析。用May-Grünwald Giemsa染色法评估KMT2A-AF9转导的小鼠骨髓细胞在用200 nM JNJ-75276617处理10天后的形态学变化。 [2] 对于T细胞毒性试验，将原代AML样本用0.3 μM JNJ-75276617预处理4天，然后洗涤并与来自健康供体的抗CD3/CD28活化T细胞以不同的效应细胞：靶细胞比例共培养3天。活细胞计数通过Annexin-V和Zombie NIR染色测定。[1] 对于自体T细胞毒性试验，从NPM1c AML患者样本中分选出CD45+原始细胞和CD3+ T细胞群，并将AML原始细胞与自身T细胞以固定比例在有或无0.3 μM JNJ-75276617存在的情况下进行培养。 [1] 对于染色质免疫沉淀 (ChIP)-qPCR，细胞经交联、裂解和超声处理。使用 Menin 抗体进行免疫沉淀，并定量分析其与靶基因启动子（MEIS1、HOXA9、HOXA10）的结合。[2] 对于 Quantigene 多重检测，细胞用 JNJ-75276617 或 DMSO 处理 48-72 小时后裂解。将靶标特异性探针与裂解液混合，并在 FLEXMAP 3D 系统上测量信号。通过剂量反应模型计算绝对 IC50 值。[2] Bleximenib 草酸盐的细胞活性检测包括用该化合物处理具有 MLL 重排的白血病细胞系。使用 CTG 或 MTT 等细胞活力检测方法来测量其抗增殖活性。可以通过 ChIP-qPCR 评估该化合物抑制 menin-KMT2A 复合物与染色质结合的能力。 |
| 动物实验 |
本研究使用6至8周龄的免疫缺陷雌性小鼠进行异种移植研究。JNJ-75276617（草酸盐）以不同浓度（10、30、50、100 mg/kg）每日口服给药，持续4周。维奈托克（100 mg/kg）每日口服给药。阿扎胞苷（2 mg/kg）仅在第一周每日腹腔注射给药。所有实验均按照机构指南进行。[2]
在皮下MOLM-14模型中，测量肿瘤体积并评估肿瘤消退情况。在播散模型中，监测生存期，并通过流式细胞术检测骨髓中人CD45+细胞来评估白血病负荷。[2] 体内研究在MLL重排白血病的小鼠异种移植模型中进行。该化合物通常口服给药。监测肿瘤生长抑制情况，并评估肿瘤组织中MLL靶基因表达等药效学标志物。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
草酸布莱西美尼具有口服活性。它可溶于二甲基亚砜、水和乙醇。用于体内口服给药时，可将其配制成羧甲基纤维素钠（CMC-Na）的均质混悬液。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
JNJ-75276617 对 hERG 钾电流的抑制 IC50 > 30 μM。在人诱导多能干细胞来源的心肌细胞中，浓度高达 5 μM 时，JNJ-75276617 对钙瞬变持续时间 90%、搏动频率、Ca2+ 振幅、搏动停止发生率、早期后去极化样或颤动样事件均未产生任何生理相关影响。[2] 在 1.0 μM 的浓度下，JNJ-75276617 对激酶谱（n=109）未显示出显著活性。在 10 μM 的浓度下，JNJ-75276617 对 52 种受体均未观察到显著相互作用（对对照特异性结合的抑制率 > 50%）。 [2]
草酸布利西美尼仅供研究使用，尚未获准用于临床。其毒理学特征将在临床前研究中进行评估。 |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
JNJ-75276617 正在进行临床研究，用于治疗携带 KMT2A 或 NPM1 改变的急性白血病，作为复发/难治性急性白血病的单药疗法（NCT04811560），或与 AML 靶向疗法联合使用（NCT05453903）。[2] JNJ-75276617 与 menin 具有独特的结合模式，包括与 Asp290 形成氢键（盐桥），这使其区别于其他 menin-KMT2A 抑制剂，例如 revumenib。[2] JNJ-75276617 对赋予其他 menin-KMT2A 抑制剂耐药性的 MEN1M327I 和 MEN1T349M 突变细胞表现出强效活性。 [2]
草酸布莱西美尼（JNJ-75276617）是一种高效、选择性强且口服有效的menin-KMT2A抑制剂。它正在开发用于治疗MLL重排的急性白血病。该化合物可以抑制肿瘤细胞增殖，并诱导其凋亡和分化。 |
| 分子式 |
C34H52FN7O7
|
|---|---|
| 分子量 |
689.817791938782
|
| 精确质量 |
689.391
|
| 元素分析 |
C, 59.20; H, 7.60; F, 2.75; N, 14.21; O, 16.23
|
| CAS号 |
2866179-95-3
|
| 相关CAS号 |
(S)-Bleximenib oxalate;Bleximenib;2654081-35-1
|
| PubChem CID |
171034104
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| tPSA |
162
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
14
|
| 可旋转键数目(RBC) |
16
|
| 重原子数目 |
49
|
| 分子复杂度/Complexity |
932
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
CCN(C(C)C)C(=O)C1=C(C=CC(=C1)F)OC2=C(N=CN=N2)N3CCC4(C3)CN(C4)[C@H](CCCN(C)CCOC)C(C)C.C(=O)(C(=O)O)O
|
| InChi Key |
OYKHOVACUSUKFI-HZPIKELBSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H50FN7O3.C2H2O4/c1-8-40(24(4)5)31(41)26-18-25(33)11-12-28(26)43-30-29(34-22-35-36-30)38-15-13-32(19-38)20-39(21-32)27(23(2)3)10-9-14-37(6)16-17-42-7;3-1(4)2(5)6/h11-12,18,22-24,27H,8-10,13-17,19-21H2,1-7H3;(H,3,4)(H,5,6)/t27-;/m1./s1
|
| 化学名 |
N-ethyl-5-fluoro-2-[[5-[2-[(3R)-6-[2-methoxyethyl(methyl)amino]-2-methylhexan-3-yl]-2,7-diazaspiro[3.4]octan-7-yl]-1,2,4-triazin-6-yl]oxy]-N-propan-2-ylbenzamide;oxalic acid
|
| 别名 |
Bleximenib oxalate; 2866179-95-3; Bleximenib (oxalate); (R)-N-Ethyl-5-fluoro-N-isopropyl-2-((5-(2-(6-((2-methoxyethyl)(methyl)amino)-2-methylhexan-3-yl)-2,6-diazaspiro[3.4]octan-6-yl)-1,2,4-triazin-6-yl)oxy)benzamide oxalate; orb2278831;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4497 mL | 7.2483 mL | 14.4965 mL | |
| 5 mM | 0.2899 mL | 1.4497 mL | 2.8993 mL | |
| 10 mM | 0.1450 mL | 0.7248 mL | 1.4497 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
