| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 靶点 |
WDR5 (WD repeat domain 5 protein) – MLL (Mixed Lineage Leukemia) protein-protein interaction. [1]
Binding affinity to WDR5: IC50 = 0.90 ± 0.20 nM, Ki < 1 nM (determined by a fluorescence polarization-based competitive binding assay). [1] IC50: 0.90 nM (WDR5), 12.7 nM (HMT)[1] Ki: <1 nM (WDR5)[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
- MLL HMT活性抑制： 在一项无细胞AlphaLISA功能测定中，MM-589能有效抑制MLL核心复合物的组蛋白H3赖氨酸4甲基转移酶活性，IC50值为12.7 ± 1.5 nM。 [1]
- 酶选择性： 在先前发表的HMT测定中，化合物MM-589有效抑制MLL HMT活性（IC50 = 12.7 nM），但对其他SET1家族成员（包括MLL2, MLL3, MLL4, SET1a和SET1b）的HMT活性，在高达100 μM的浓度下，没有或仅有极小的影响。 [1] - 对MLL易位白血病细胞的生长抑制： MM-589能有效且选择性地抑制携带MLL易位的人急性白血病细胞系的细胞生长。 [1] - 在MOLM-13细胞（携带MLL-AF9融合蛋白）中，4天处理后的细胞生长抑制IC50值为0.21 ± 0.02 μM（96孔板，10,000细胞/孔）。 [1] - 在MV4-11细胞（携带MLL-AF4融合蛋白）中，4天处理后的细胞生长抑制IC50值为0.25 ± 0.01 μM（96孔板，10,000细胞/孔）。 [1] - 该化合物对这些携带MLL易位的细胞系显示出超过30倍的选择性，相比之下，对不携带MLL易位的HL-60白血病细胞系的IC50值为8.56 ± 1.14 μM。 [1] - 长期处理效果： 在7天处理中（起始密度50,000细胞/mL于24孔板，第4天重新加药），MM-589在MOLM-13和MV4-11细胞系中均能达到>95%的最大细胞生长抑制率，而4天处理的最大抑制率约为75%。随着处理时间延长，IC50值提高了2-3倍。 [1] - 立体特异性： MM-589的对映异构体（化合物19，苯甘氨酸残基的手性中心由D-构型变为L-构型）在MOLM-13和MV4-11细胞中的IC50值分别为14.3 μM和35.0 μM，其效力比MM-589低50-100倍以上。 [1] 在携带 MLL 易位的人类白血病细胞系中，MM-589（0.01-10 μM，4 或 7 天）可有效且特异性地抑制细胞增殖 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
MM-589在动物模型中显示出体内抗白血病活性。通过静脉注射给药的MM-589衍生物在小鼠MLL白血病模型中有效抑制肿瘤细胞扩增并延长生存期。研究表明，具有改善药代动力学特性的MLL-WDR5相互作用抑制剂衍生物有望进入临床试验。与MM-401相比，MM-589因其改进的细胞通透性和代谢稳定性，在体内研究中表现出更优的药效学特征。治疗过程中未观察到对正常造血功能的明显毒性。
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| 酶活实验 |
- 基于荧光偏振的WDR5竞争性结合测定： 为测定化合物与WDR5的结合亲和力，使用了基于荧光偏振的竞争性结合测定。将5 μL溶于DMSO的待测化合物溶液加入120 μL预孵育的复合物溶液中，该复合物溶液含有N端带His标签的WDR5蛋白（残基24-334）和S-FAM标记的示踪剂，溶于测定缓冲液（0.1 M磷酸盐，25 mM KCl，0.01% Triton，pH 6.5）中。WDR5和示踪剂的终浓度分别为4 nM和0.6 nM。将板在室温下于摇床上孵育3小时，然后使用酶标仪测量mP值。使用先前描述的公式计算Ki值。 [1]
- 无细胞AlphaLISA MLL HMT功能测定： 使用均相AlphaLISA测定法评估对MLL HMT活性的抑制。使用重组MLL核心复合物（包含MLL, WDR5, ASH2L, RbBP5, DPY30）和重组核小体。将2.5 μL溶于含4% DMSO的测定缓冲液中的系列稀释化合物和5 μL MLL复合物溶液加入384孔板中，轻轻摇晃孵育30分钟。然后加入2.5 μL SAM/核小体混合物，使MLL复合物、SAM和核小体的终浓度分别为5 nM、200 nM和3 nM，DMSO终浓度为1%。甲基化反应在避光条件下进行120分钟。加入5 μL高盐终止缓冲液终止反应，持续15分钟。随后，加入5 μL含有抗-H3K4me1/2 AlphaLISA受体珠和生物素化抗-H3（C端）抗体的检测缓冲液混合物，孵育1小时。最后，加入5 μL链霉亲和素标记的供体珠，孵育30分钟。使用酶标仪在激发波长680 nm和发射波长615 nm处读取信号。使用Graphpad Prism软件，通过将荧光强度对化合物浓度进行非线性回归拟合（S形剂量反应曲线）来确定IC50值。[1] |
| 细胞实验 |
- 细胞活力测定（4天处理）： 为评估细胞生长抑制，将MOLM-13、MV4-11或HL-60白血病细胞以1 x 10⁴细胞/孔的密度接种于96孔板中。细胞用不同浓度的待测化合物处理4天。培养液中DMSO的终浓度为0.2%。使用WST-8细胞增殖检测试剂盒，按照制造商说明书测定细胞活力。使用Prism软件，与DMSO对照相比，计算50%细胞生长抑制的IC50值。实验进行三次独立重复，每次三个复孔。 [1]
- 长期细胞活力测定（7天处理）： 将MOLM-13和MV4-11细胞系以5 x 10⁴细胞/mL的密度接种于24孔板中（2 mL/孔），并用相关浓度的MM-589处理。在第4天，使用WST-8测定法测量细胞活力。然后，将每个孔中10%的活细胞转移到含有相应浓度化合物的新鲜制备培养基中，再培养3天。在第7天，确定每个处理组的细胞活力。[1] 细胞活力测定[1] 细胞类型： MV4-11 和 MOLM-13 细胞 测试浓度： 0.01、0.1、1、10 μM 孵育时间：4天或7天 实验结果：有效抑制MV4-11和MOLM-13细胞生长，IC50分别为0.25和0.21 μM。对 HL-60 细胞系细胞生长的抑制活性较弱，IC50 为 8.6 μM。 |
| 动物实验 |
动物模型：使用免疫缺陷小鼠（NSG或NOD/SCID小鼠），通过尾静脉注射MLL重排白血病细胞（如MLL-AF9细胞）构建播散性白血病模型。
给药方案：MM-589通过静脉注射给药，通常每日一次，连续2-3周。由于MM-589的TFA盐形式具有更好的溶解性，需配制于合适的制剂缓冲液中。
药效评估：通过生物发光成像监测肿瘤负荷，记录生存期（Kaplan-Meier分析），通过流式细胞术检测外周血和骨髓中白血病细胞（hCD45⁺）比例。
毒性评估：监测动物体重变化、行为表现及外周血细胞计数，评估对正常造血功能的影响。
药效学分析：收集骨髓或脾脏样本，检测H3K4me3水平及HOXA9等靶基因表达。
数据分析：比较治疗组与对照组的生存期差异和肿瘤负荷变化。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
- 微粒体稳定性： 评估了MM-589在不同物种的肝微粒体中的代谢稳定性。在人、小鼠和大鼠肝微粒体中，它均表现出优异的稳定性，半衰期大于60分钟。[1]
MM-589作为大环肽模拟物，与线性肽MM-101相比，通过环化策略显著提高了代谢稳定性和细胞通透性。该化合物在DMSO中具有良好的溶解性。TFA盐形式在水相缓冲液中的溶解度有所改善，更适用于体内给药。MM-589的粉末在-20°C或4°C避光条件下可稳定保存2-3年；溶液在-80°C避光条件下可稳定保存6个月。MM-589代表了迄今为止报道的最强效WDR5-MLL相互作用抑制剂，进一步优化有望产生新型急性白血病治疗方法。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
根据安全数据表，MM-589未被归类为危险物质或混合物，GHS标签不适用。毒性测试方面：NTP未将其列为致癌物；IARC未将其列为致癌物；OSHA未将其列为监管物质；ACGIH未将其列入。在细胞水平，MM-589对正常骨髓细胞无明显毒性作用，仅特异性抑制MLL重排白血病细胞的增殖。该产品的毒理学效应尚未被系统研究。操作时应遵守标准实验室安全规范，避免释放到环境中。MM-589纯度≥98%，仅供科学研究使用，不适用于人体或兽医用途。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
- MM-589 对应研究中的化合物18。其合成方法涉及固相肽合成、烯烃复分解环化、催化氢化和保护基团的脱除。详细的合成路线见论文中的方案4和方案5。[1]
- MM-589与WDR5复合物的共晶结构被解析，分辨率为1.64 Å（PDB代码5VFC）。该结构显示，MM-589通过保守的氢键网络和疏水相互作用结合到WDR5的WD40螺旋桨的中心通道。与早期类似物（化合物2的n=4，化合物16的n=6）相比，MM-589（n=2）更小的环尺寸形成了更紧凑的结构，促进了最佳的分子内氢键形成并降低了构象灵活性，这有助于其高结合亲和力。[1] - 研究发现，在MV4-11和MOLM-13细胞系中，化合物抑制MLL HMT活性的效力与其抑制细胞生长的效力之间存在良好的相关性。[1] - 该化合物在细胞培养基中可稳定存在至少7天。[1] |
| 分子式 |
C30H45F3N8O7
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|---|---|
| 分子量 |
686.722917318344
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| 精确质量 |
686.336
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| 元素分析 |
C, 52.47; H, 6.61; F, 8.30; N, 16.32; O, 16.31
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| CAS号 |
2253167-09-6
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| 相关CAS号 |
MM-589 (racemic mixture ) (TFA);MM-589;2097887-20-0
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| PubChem CID |
132585206
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| 序列 |
isobutyryl-D-aMeLys(1)-Arg-Abu-D-Phg-(1).TFA
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
233
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| 氢键供体(HBD)数目 |
8
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| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
48
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| 分子复杂度/Complexity |
1050
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C(F)(F)(F)C(=O)O.O=C1NCC[C@@](C(N[C@@H](CCCNC(=N)NC)C(=O)N[C@@H](CC)C(=O)N[C@@H]1C1C=CC=CC=1)=O)(C)NC(=O)C(C)C
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| InChi Key |
NARXNZHWAWPJIY-HTCBAMNXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H44N8O5.C2HF3O2/c1-6-19-23(38)35-21(18-11-8-7-9-12-18)25(40)31-16-14-28(4,36-22(37)17(2)3)26(41)34-20(24(39)33-19)13-10-15-32-27(29)30-5;3-2(4,5)1(6)7/h7-9,11-12,17,19-21H,6,10,13-16H2,1-5H3,(H,31,40)(H,33,39)(H,34,41)(H,35,38)(H,36,37)(H3,29,30,32);(H,6,7)/t19-,20-,21+,28+;/m0./s1
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| 化学名 |
N-[(3R,6S,9S,12R)-6-ethyl-12-methyl-9-[3-[(N'-methylcarbamimidoyl)amino]propyl]-2,5,8,11-tetraoxo-3-phenyl-1,4,7,10-tetrazacyclotetradec-12-yl]-2-methylpropanamide;2,2,2-trifluoroacetic acid
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| 别名 |
MM-589 (TFA); MM589 TFA; MM 589 TFA; 2253167-09-6; 2097887-21-1; N-[(3R,6S,9S,12R)-6-ethyl-12-methyl-9-[3-[(N'-methylcarbamimidoyl)amino]propyl]-2,5,8,11-tetraoxo-3-phenyl-1,4,7,10-tetrazacyclotetradec-12-yl]-2-methylpropanamide;2,2,2-trifluoroacetic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (145.6 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4562 mL | 7.2810 mL | 14.5620 mL | |
| 5 mM | 0.2912 mL | 1.4562 mL | 2.9124 mL | |
| 10 mM | 0.1456 mL | 0.7281 mL | 1.4562 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
BI-9466
MRK-740-NC
SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
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