MS-023 trihydrochloride

别名: MS023 trihydrochloride); MS023 triHCl N1-methyl-N1-[[4-[4-(1-methylethoxy)phenyl]-1H-pyrrol-3-yl]methyl]-1,2-ethanediamine,trihydrochloride
目录号: V51600 纯度: ≥98%
MS023 triHClide 是一种有效的细胞活性人 I 型蛋白精氨酸甲基转移酶 (PRMT) 抑制剂,对 PRMT1、PRMT3、PRMT4、PRMT6 和 PRMT8 的 IC50 值分别为 30、119、83 和 4纳摩。
MS-023 trihydrochloride CAS号: 2108631-19-0
产品类别: Histone Methyltransferase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
25mg
50mg
Other Sizes

Other Forms of MS-023 trihydrochloride:

  • MS023
  • MS023 二盐酸盐
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产品描述
MS023 triHClide 是一种有效的细胞活性人 I 型蛋白精氨酸甲基转移酶 (PRMT) 抑制剂,对 PRMT1、PRMT3、PRMT4、PRMT6 和 PRMT8 的 IC50 值分别为 30、119、83 和 4、和5纳摩。
生物活性&实验参考方法
靶点
PRMT1 (IC50 = 30 nM); PRMT3 (IC50 = 119 nM); PRMT4 (IC50 = 83 nM); PRMT6 (IC50 = 4 nM); PRMT8 (IC50 = 5 nM)
体外研究 (In Vitro)
MS023 二盐酸盐(1-1000 nM;48 小时)可抑制 MCF7 细胞中的 PRMT1 甲基转移酶活性 [1]。 MS023 二盐酸盐(1-1000 nM;20 小时)可抑制 HEK293 细胞中的 PRMT6 甲基转移酶活性 [1]。
体内研究 (In Vivo)
MS023 diHClide (160 mg/kg, ip) 与 PKC412 (100 mg/kg, ig) 结合通过减少功能性 MLL-r ALL 起始细胞的支持来防止 MLL-r 及时循环 (ALL)。 )
酶活实验
PRMT生化测定[1]
闪烁邻近度测定(SPA)用于评估试验化合物对抑制PRMT催化的甲基转移反应的影响,如前所述。27简言之,氚化的S-腺苷-L-甲硫氨酸被用作甲基的供体。将(3H)甲基化生物素标记肽捕获在链亲和素/闪烁体包被的微孔板中,使掺入的3H甲基和闪烁体接近,从而产生发光,通过追踪TopCount NXT™微孔板闪烁和发光计数器测量的放射性信号(每分钟计数)来量化发光。必要时,使用非氚化SAM来补充反应。在平衡条件下,通过滴定反应混合物中的测试化合物,在底物和辅因子的Km浓度下测定IC50值。
细胞PRMT1测定[1]
MCF7细胞在补充有10%FBS、青霉素(100单位mL−1)和链霉素(100μg mL−1。将40%汇合的细胞用不同浓度的MS023和化合物4-6以指定浓度或DMSO对照处理48小时。将细胞在100μL总裂解缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8、150 mM NaCl、1 mM EDTA、10 mM MgCl2、0.5%TritonX-100、12.5 U mL−1苯并酶、完全不含EDTA的蛋白酶抑制剂混合物)中裂解。在RT下孵育3分钟后,将SDS添加到最终1%的浓度。在SDS-PAGE上运行裂解物,并如下所述进行免疫印迹以在蛋白质印迹中测定H4R3me2a、精氨酸不对称二甲基化、精氨酰对称二甲基化和精氨酸单甲基化。
细胞PRMT6测定[1]
HEK293细胞在补充有10%FBS、青霉素(100 U mL−1)和链霉素(100μg mL−1)的DMEM中的12孔板中生长。按照制造商的说明,使用jetPRIME®转染试剂(Polyplus Transferion),用FLAG标记的PRMT6或突变体V86K/D88A PRMT6(每孔1μg DNA)转染50%的融合细胞。4小时后移除培养基,并用指示浓度的MS023或DMSO对照处理细胞。20小时后,取出培养基,并在100μL的总裂解缓冲液中裂解细胞。
细胞实验
蛋白质印迹分析 [1]
细胞类型: MCF7 和 HEK293 细胞
测试浓度: 1.4、4、12、37、111、333 和 1000 nM
孵育持续时间:MCF7细胞为48小时; HEK293 细胞 20 小时 (hrs (hours))
实验结果::治疗有效且浓度依赖性地降低 H4R3me2a 的细胞水平 (IC50=9±0.2 nM)。处理浓度依赖性地减少 H3R2me2a 标记 (IC50=56±7 nM)。
动物实验
动物/疾病模型:携带原发性MLL-r ALL细胞的NOD-scid IL2Rgnull (NSG)小鼠[2]
剂量:160 mg/kg
给药途径:腹腔注射(ip);扩散[2]。PKC412(100 mg/kg,灌胃)、MS023(160 mg/kg,腹腔注射)或联合治疗4周的结果:联合治疗较单药治疗延长了白血病小鼠的生存期。
参考文献

[1]. A Potent, Selective, and Cell-Active Inhibitor of Human Type I Protein Arginine Methyltransferases. ACS Chem Biol. 2016 Mar 18;11(3):772-81.

[2]. Targeting PRMT1-mediated FLT3 methylation disrupts maintenance of MLL-rearranged acute lymphoblastic leukemia. Blood. 2019 Oct 10;134(15):1257-1268.

其他信息
蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMTs)在多种生物过程中发挥着至关重要的作用。PRMTs的过度表达与包括癌症在内的多种人类疾病密切相关。因此,学术界和制药工业都在积极研发PRMTs的选择性小分子抑制剂,将其作为验证生物学和治疗学假设的化学工具。PRMTs分为三类:I型PRMTs催化精氨酸残基的单甲基化和不对称二甲基化;II型PRMTs催化精氨酸残基的单甲基化和对称二甲基化;III型PRMTs仅催化精氨酸残基的单甲基化。本文报道了一种高效、选择性强且具有细胞活性的I型PRMTs抑制剂MS023的发现,并通过一系列生化、生物物理和细胞实验对其进行了表征。 MS023 对 I 型 PRMT(包括 PRMT1、-3、-4、-6 和 -8)表现出高效的抑制活性,但对 II 型和 III 型 PRMT、蛋白质赖氨酸甲基转移酶和 DNA 甲基转移酶完全无效。PRMT6 与 MS023 复合物的晶体结构显示,MS023 可与底物结合位点结合。MS023 可显著降低细胞内组蛋白精氨酸不对称二甲基化的水平。它还能降低细胞内精氨酸不对称二甲基化的总体水平,同时提高精氨酸单甲基化和对称二甲基化的水平。我们还开发了 MS023 的类似物 MS094,该化合物在生化和细胞实验中均无活性,可作为化学生物学研究的阴性对照。 MS023 和 MS094 是研究 I 型 PRMT 在健康和疾病中作用的有效化学工具。[1]复发仍然是 MLL 重排 (MLL-r) 急性淋巴细胞白血病 (ALL) 治疗失败的主要原因,这是由于常规化疗或靶向治疗后耐药克隆的持续存在所致。因此,阐明 MLL-r ALL 维持的机制对于开发有效的治疗方法至关重要。PRMT1 可在组蛋白/非组蛋白上沉积不对称二甲基精氨酸标记,据报道其在多种癌症中过表达。本文中,我们证实了 MLL-r ALL 细胞中 PRMT1 水平升高,并表明抑制 PRMT1 可显著抑制白血病细胞的生长和存活。从机制上讲,我们发现 PRMT1 可甲基化 Fms 样受体酪氨酸激酶 3 (FLT3) 的精氨酸 (R) 残基 972 和 973 (R972/973),并且其在 MLL 复发性急性淋巴细胞白血病 (MLL-r ALL) 细胞中的致癌功能依赖于 FLT3 的甲基化。生物化学和计算分析均表明,R972/973 甲基化可以以依赖于或不依赖于磷酸化酪氨酸 (Y) 残基 969 (Y969) 的方式促进衔接蛋白募集至 FLT3。表达 R972/973 甲基化缺陷型 FLT3 的细胞比表达 Y969 磷酸化缺陷型 FLT3 的转导细胞表现出更强的凋亡和生长抑制。我们还发现,I 型 PRMT 抑制剂 MS023 抑制白血病细胞活力的能力与基线 FLT3 R972/973 甲基化水平呈正相关。最后,在患者来源的小鼠异种移植模型中,将 FLT3 酪氨酸激酶抑制剂 PKC412 与 MS023 联合治疗,与单独使用 PKC412 治疗相比,能更有效地清除 MLL-r ALL 细胞。这些结果表明,通过抑制 PRMT1 来消除 FLT3 精氨酸甲基化是一种很有前景的靶向 MLL-r ALL 细胞的策略。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H28CL3N3O
精确质量
287.199
元素分析
C, 51.46; H, 7.11; Cl, 26.80; N, 10.59; O, 4.03
CAS号
2108631-19-0
相关CAS号
MS023;1831110-54-3;MS023 dihydrochloride;1992047-64-9
PubChem CID
129626591
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
1.1±0.1 g/cm3
沸点
437.8±45.0 °C at 760 mmHg
闪点
218.6±28.7 °C
蒸汽压
0.0±1.1 mmHg at 25°C
折射率
1.567
LogP
2.3
tPSA
54.3Ų
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
7
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
290
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
VEUUSCXROKBMMJ-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C17H25N3O.3ClH/c1-13(2)21-16-6-4-14(5-7-16)17-11-19-10-15(17)12-20(3)9-8-18;;;/h4-7,10-11,13,19H,8-9,12,18H2,1-3H3;3*1H
化学名
N1-((4-(4-isopropoxyphenyl)-1H-pyrrol-3-yl)methyl)-N1-methylethane-1,2-diamine trihydrochloride
别名
MS023 trihydrochloride); MS023 triHCl
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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