| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
FabI/enoyl-acyl carrier protein reductase
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AFN-1252是烯酰基载体蛋白还原酶（FabI）的强效抑制剂，在浓度<=0.12微克/毫升时，抑制了所有测试的金黄色葡萄球菌（n=502）和表皮葡萄球菌（t=51）的临床分离株，包括耐甲氧西林（甲氧西林）的分离株。相比之下，AFN-1251对肺炎链球菌、β-溶血性链球菌、肠球菌属、肠杆菌科、非发酵革兰氏阴性杆菌和卡他莫拉菌的临床分离物没有活性（MIC（90）>4微克/毫升）。这些数据支持AFN-1252继续开发用于治疗耐药葡萄球菌感染患者[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
类鼻疽是一种热带细菌感染，由革兰阴性菌假鼻疽伯克氏菌（B.pseudomallei；Bpm）引起。目前的治疗选择主要限于甲氧苄啶-磺胺甲恶唑和β-内酰胺类药物，治疗时间约为4个月。此外，有报道称对这些药物有耐药性。因此，迫切需要开发新的类鼻疽抗生素。抑制脂肪酸生物合成途径中的关键酶烯酰基ACP还原酶（FabI）在抗菌药物开发方面显示出巨大的前景。FabI已被确定为假鼻疽杆菌中存在的主要烯酰基ACP还原酶。在这项研究中，我们评估了目前正在临床开发的金黄色葡萄球菌FabI抑制剂AFN-1252与BpmFabI酶结合并抑制拟鼻疽杆菌生长的潜力。AFN-1252稳定了BpmFabI并抑制了酶活性，IC50为9.6 nM。它对从类鼻疽患者中分离出的拟鼻疽杆菌R15菌株显示出良好的抗菌活性（MIC为2.35mg/L）。以2.3Å的分辨率确定了含有AFN-1252的BpmFabI的X射线结构。BpmFabI与AFN-1252的复合物形成了一个对称的四聚体结构，每个单体亚基上都结合有一个AFN-125二分子。动力学和热熔融研究支持了AFN-1252可以独立于辅因子与BpmFabI结合的发现。这些研究的结构和机理见解可能有助于新FabI抑制剂的合理设计和开发[2]。
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| 酶活实验 |
AFN-1252的BpmFabI酶抑制试验[2]
AFN-1252是使用已发表的合成方案在内部合成的。38通过监测辅因子NADH.33的氧化，在分光光度测定中评估了AFN-1252中抑制BpmFabI的效力。用于测定的缓冲液为30 mM PIPES，pH 6.8，含有150 mM NaCl和1 mM EDTA。试验中使用了175 nM BpmFabI酶。米氏常数（Km）和Kcat是根据巴豆酰辅酶A浓度增加时的酶活性确定的。Km（257µM）和Kcat（307分钟-1）的值略高于报告的值（分别为188µM和215分钟-1）。为了测定IC50，将AFN-1252与BpmFabI预孵育30分钟，并通过加入含有巴豆酰辅酶A（300µM）和NADH（375µM）的底物混合物开始反应。通过跟踪340nm处吸光度的降低来监测NADH的氧化。IC50值是通过使用Graphpad Prism软件V4将剂量反应数据拟合到S形剂量反应（可变斜率）曲线来确定的。为了确定结合机制，在不同浓度的抑制剂下进行了动力学研究，并在固定浓度的巴豆酰辅酶a（300µM）下改变NADH的浓度，同时通过改变巴豆酰CoA的浓度将NADH浓度固定在375µM。随后生成Lineweaver–Burk图，以确定AFN-1252与BpmFabI结合的机制。
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| 细胞实验 |
使用Wiegand等人描述的微量稀释技术进行最低抑菌浓度（MIC）测定，并进行了一些修改。39在脑心输注肉汤（BHIB）中制备化合物的两倍连续稀释液，并将其分配到96孔板中。将1×108cfu/mL的BpR15接种物加入每个孔中，在37°C下孵育24小时。同时制备生长对照（仅细菌接种物）、无菌对照（仅肉汤）和阳性对照（含三氯生的细菌接种）孔并孵育。记录了MIC，定义为抑制BpR15可见生长的AFN-1252的最低浓度。MIC结果为n=2[2]的平均值。
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| 动物实验 |
伯克霍尔德氏菌R15株（以下简称BpR15）分离自马来西亚吉隆坡医院一名死于类鼻疽的患者。40 BpR15常规在37℃的Ashdown琼脂培养基上培养，并在BHIB培养基中制备过夜细菌培养物。AFN-1252溶解于二甲基亚砜（DMSO）中，并储存于-20℃直至使用。[2]
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| 参考文献 |
[5]. Yao J, Ericson ME, Frank MW, Rock CO. Enoyl-Acyl Carrier Protein Reductase I (FabI) is Essential for the Intracellular Growth of Listeria monocytogenes. Infect Immun. 2016 Oct 10. pii: IAI.00647-16. PubMed PMID: 27736774. |
| 分子式 |
C29H31N3O7S
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|---|---|
| 分子量 |
565.637346506119
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| 精确质量 |
565.188
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| 元素分析 |
C, 61.58; H, 5.52; N, 7.43; O, 19.80; S, 5.67
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| CAS号 |
1047981-30-5
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| 相关CAS号 |
1047981-31-6;620175-39-5;1047981-30-5 (tosylate hydrate);
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| PubChem CID |
25029351
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
6.036
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| tPSA |
150.91
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
829
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(C1C=CC(C)=CC=1)(=O)(=O)O.O1C2C=CC=CC=2C(C)=C1CN(C)C(/C=C/C1C=NC2=C(C=1)CCC(N2)=O)=O.O
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| InChi Key |
OUSNFNLWEQZRCQ-WRQJSNHTSA-N
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| InChi Code |
1S/C22H21N3O3.C7H8O3S.H2O/c1-14-17-5-3-4-6-18(17)28-19(14)13-25(2)21(27)10-7-15-11-16-8-9-20(26)24-22(16)23-12-151-6-2-4-7(5-3-6)11(8,9)10/h3-7,10-12H,8-9,13H2,1-2H3,(H,23,24,26)2-5H,1H3,(H,8,9,10)1H2/b10-7+
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| 化学名 |
(E)-N-methyl-N-((3-methylbenzofuran-2-yl)methyl)-3-(7-oxo-5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naphthyridin-3-yl)acrylamide
4-methylbenzenesulfonate hydrate
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| 别名 |
AFN-1252 tosylate monohydrate; AFN-1252 tosylate; AFN1252; AFN-12520000; API-1252 tosylate; AFN-1252; Debio 1452; AFN 1252; API-1252; AFN-1252 tosylate monohydrate; 1047981-30-5; API-1252 tosylate monohydrate; UNII-004HXS4MNN; 004HXS4MNN; 2-Propenamide, N-methyl-N-((3-methyl-2-benzofuranyl)methyl)-3-(5,6,7,8-tetrahydro-7-oxo-1,8-naphthyridin-3-yl)-, (2E)-, 4-methylbenzenesulfonate, hydrate (1:1:1); (E)-N-methyl-N-((3-methylbenzofuran-2-yl)methyl)-3-(7-oxo-5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naphthyridin-3-yl)acrylamide 4-methylbenzenesulfonate hydrate; SCHEMBL726863;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7679 mL | 8.8395 mL | 17.6791 mL | |
| 5 mM | 0.3536 mL | 1.7679 mL | 3.5358 mL | |
| 10 mM | 0.1768 mL | 0.8840 mL | 1.7679 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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