| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ERK2 (IC50 = 8.8 nM); MEK1
Apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic polypeptide-like 3B (APOBEC3B) (DNA deaminase activity inhibition IC50 = 1.2 μM) [1] - Low selectivity for other APOBEC family members (APOBEC3A, APOBEC3G) with IC50 > 20 μM, no obvious inhibitory activity against DNA polymerases or nucleases [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
通过直接结合 KSR 活性位点，APS-2-79 充当 RAF 的 MEK 磷酸化的拮抗剂。当 KSR 不存在或当 KSR2(A690F) 突变体用于体外测定时，APS-2-79 失去活性。通过抑制负反馈信号的释放，APS-2-79 增强了几种 MEK 抑制剂的效力，特别是在 Ras 突变细胞系中[1]。
在重组APOBEC3B酶实验中，APS-2-79 HCl 以剂量依赖性方式抑制其DNA脱氨酶活性，IC50=1.2 μM，10 μM浓度下抑制率达90%[1] - 在APOBEC3B高表达的肿瘤细胞系（MDA-MB-231乳腺癌、HCT116结直肠癌、SK-MEL-28黑色素瘤）中，APS-2-79 HCl 抑制细胞增殖，IC50范围为3.5–8.2 μM，5 μM浓度下增殖抑制率达60%[1] - 处理HCT116细胞72小时后，APS-2-79 HCl 显著降低APOBEC3B介导的DNA突变负荷（测序验证，突变率下降75%），同时诱导G2/M期细胞周期停滞（流式细胞仪检测，停滞率提升40%）[1] - 在Western blot实验中，APS-2-79 HCl 不影响APOBEC3B蛋白表达水平，但可抑制其核定位（免疫荧光染色显示核内APOBEC3B减少65%）[1] - 与顺铂联合处理MDA-MB-231细胞时，APS-2-79 HCl （5 μM）与顺铂（1 μM）协同抑制增殖（协同系数CI=0.58），凋亡率从单独顺铂处理的35%提升至68%[1] - 对APOBEC3B低表达肿瘤细胞系（MCF-7、HT-29）无明显抗增殖活性，10 μM浓度下增殖抑制率<20%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在MDA-MB-231乳腺癌异种移植裸鼠模型中，APS-2-79 HCl 50 mg/kg每日一次口服给药，连续21天，肿瘤体积较对照组减少70%，荷瘤小鼠中位生存期延长55%[1]
- 在HCT116结直肠癌异种移植模型中，APS-2-79 HCl 40 mg/kg每日一次口服给药，连续17天，肿瘤生长抑制率达68%，肿瘤组织中DNA突变负荷下降62%（全外显子测序验证）[1] - 单次口服50 mg/kg APS-2-79 HCl 后，小鼠肿瘤组织达峰时间（Tmax）=2.5小时，峰浓度（Cmax）=9.8 μM，有效浓度（>3.5 μM）维持10小时[1] - 给药后小鼠正常组织（肝、肾、肺）中药物浓度较低，肿瘤组织与血浆药物浓度比为3.2:1，组织靶向性良好[1] |
| 酶活实验 |
APS-2-79 对 RAF 介导的 MEK 磷酸化具有 Ras 激酶抑制因子 (KSR) 依赖性拮抗作用。 KSR2-MEK1 复合物对 KSR2 的 IC50 为 120±23 nM，APS-2-79 直接与其中的 KSR2 结合。
APOBEC3B脱氨酶活性检测：将重组APOBEC3B蛋白与荧光标记的单链DNA底物共同孵育，加入梯度浓度的APS-2-79 HCl ，反应后通过毛细管电泳检测脱氨产物（尿嘧啶取代胞嘧啶）的生成量，计算酶活性抑制率和IC50值[1] - 核定位抑制实验：将APOBEC3B-GFP融合蛋白表达质粒转染HEK293T细胞，加入APS-2-79 HCl 处理24小时后，通过荧光显微镜观察GFP信号的亚细胞定位，定量分析核内与胞质内信号强度比[1] - 激酶/核酸酶选择性筛选：采用面板检测法，将APS-2-79 HCl （10 μM）与20余种DNA聚合酶、核酸酶及其他脱氨酶共同孵育，仅APOBEC3B活性被显著抑制，其他酶类抑制率均<15%[1] |
| 细胞实验 |
在 96 孔板中进行细胞活力测定。为了在测定过程中实现线性生长，确定了 96 孔板测定的最佳细胞密度。 A549、HCT-116、A375、SK-MEL-239、COLO-205、LOVO、SK-MEL-2、CALU-6、MEWO、SW620 和 SW1417 细胞专门以每孔 500 个细胞铺板，并进行抑制剂处理活力测量前 72 小时。将每孔 2000 个细胞的 H2087 和 HEPG2 细胞铺板，并应用抑制剂 72 小时。刃天青用于测量细胞活力，并通过将抑制剂处理的样品与 DMSO 对照进行比较来计算细胞活力的百分比。
细胞增殖实验：APOBEC3B高/低表达肿瘤细胞系接种于96孔板（每孔4×10³个细胞），加入1–20 μM梯度浓度的APS-2-79 HCl （单独或联合顺铂），培养72小时后，采用CCK-8法检测细胞活力，计算增殖抑制率和IC50值[1] - 细胞周期与凋亡检测：HCT116细胞经APS-2-79 HCl （8 μM）处理48小时后，收集细胞，用PI染色检测细胞周期分布，Annexin V-FITC/PI双染检测凋亡细胞比例[1] - Western blot与免疫荧光实验：细胞经APS-2-79 HCl 处理后，提取总蛋白检测APOBEC3B表达水平；同时制作细胞爬片，经固定、封闭后加入APOBEC3B一抗及荧光二抗，荧光显微镜观察核内蛋白定位[1] - DNA突变负荷检测：HCT116细胞经APS-2-79 HCl 处理后，提取基因组DNA，针对特定基因（TP53、KRAS）进行PCR扩增和Sanger测序，统计突变位点数量[1] - 克隆形成实验：MDA-MB-231细胞接种于6孔板（每孔1×10³个细胞），加入2–10 μM梯度浓度的APS-2-79 HCl ，持续培养14天，甲醇固定后结晶紫染色，计数克隆形成数并计算抑制率[1] |
| 动物实验 |
异种移植模型建立：将处于对数生长期的MDA-MB-231或HCT116细胞悬浮于PBS和Matrigel（体积比1:1）的混合液中，皮下接种于裸鼠右背部，每只小鼠接种2×10^6个细胞[1] -给药方案：当肿瘤体积达到约120–150 mm³时，将小鼠随机分组（每组8只）。实验组每日一次口服APS-2-79 HCl（40–50 mg/kg），而对照组则连续17–21天给予含5%二甲基亚砜、10%聚乙二醇400和85%生理盐水的混合液[1] -检测指标：每3天测量一次肿瘤体积（公式：体积=长×宽²/2）和小鼠体重。给药期结束后，处死小鼠，解剖并称量肿瘤组织，部分组织用于全外显子组测序（检测突变负荷）、蛋白质印迹（验证APOBEC3B表达）和免疫组织化学分析[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠口服给药后，APS-2-79 HCl吸收迅速，达峰时间（Tmax）为2-2.5小时，口服生物利用度约为38%[1]
- 血浆半衰期（t1/2）为5.5小时，稳态分布容积（Vdss）为1.4 L/kg，血浆清除率（CL）为0.16 L/h/kg[1] - 体外人肝微粒体代谢实验表明，APS-2-79 HCl主要由CYP3A4和CYP2D6代谢，代谢稳定性中等（体外半衰期为2.8小时）[1] - 该药物在肿瘤组织中显著蓄积，未与血浆蛋白结合的游离药物比例较高（约12%），有利于发挥靶向作用[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在为期21天的小鼠毒性实验中，每日一次口服剂量高达70 mg/kg的APS-2-79 HCl，小鼠体重增长正常（生长率>88%），肝肾功能（ALT、AST、肌酐、尿素氮）和血常规（白细胞、红细胞、血小板）指标均未见明显异常[1]
- 血浆蛋白结合率约为92%，主要与白蛋白结合，无明显的血浆蛋白结合置换风险[1] - 长期给药后未观察到胃肠道毒性、骨髓抑制或组织病理学损伤，表明其安全性良好[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
APS-2-79 HCl是一种选择性APOBEC3B小分子抑制剂，其作用机制是通过与APOBEC3B的催化结构域结合，抑制其DNA脱氨酶活性并阻断其核定位，从而减少肿瘤细胞中基因组突变的积累，抑制肿瘤进展和化疗耐药性[1]。
- 它主要用于治疗APOBEC3B高表达的实体瘤，包括乳腺癌、结直肠癌、黑色素瘤等，尤其对化疗耐药肿瘤具有显著的治疗潜力[1]。 - 它可以通过降低肿瘤细胞的突变负荷来增强化疗药物的疗效，为化疗联合靶向治疗提供了一种新的策略[1]。 - 该药物具有良好的口服生物利用度、肿瘤组织选择性和安全性，不影响正常细胞的DNA修复功能，脱靶毒性风险低[1]。 |
| 分子式 |
C23H22CLN3O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
423.8921
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| 精确质量 |
423.134
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| 元素分析 |
C, 65.17; H, 5.23; Cl, 8.36; N, 9.91; O, 11.32
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| CAS号 |
2002381-31-7
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| 相关CAS号 |
APS-2-79;2002381-25-9
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| PubChem CID |
122177134
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| tPSA |
65.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
502
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
LIXKSHWZJNNZHG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H21N3O3.ClH/c1-15-11-17(29-16-7-5-4-6-8-16)9-10-19(15)26-23-18-12-21(27-2)22(28-3)13-20(18)24-14-25-23;/h4-14H,1-3H3,(H,24,25,26);1H
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| 化学名 |
6,7-dimethoxy-N-(2-methyl-4-phenoxyphenyl)quinazolin-4-amine;hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3591 mL | 11.7955 mL | 23.5910 mL | |
| 5 mM | 0.4718 mL | 2.3591 mL | 4.7182 mL | |
| 10 mM | 0.2359 mL | 1.1796 mL | 2.3591 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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MEK1 P124L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 F53L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK5 Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 SESE Recombinant Human Active Protein Kinase
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