| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
cIAP1 (IC50 = 15 nM); cIAP2 (IC50 = 21 nM); XIAP (IC50 = 15 nM)
In H1975 NSCLC cells, AZD5582 (20 nM; 48 hours) inhibits cell viability by working with IFN or viral double-stranded RNA (dsRNA)[2]. Inducing the cleavage of caspase-3 and caspase-7, AZD5582 (20 nM; 17 or 25 hours) downregulates cIAP-1, activates RIPK1 (the upstream regulator of caspase-8), and activates the extrinsic (caspase-8) and intrinsic (caspase-9) apoptosis pathways[2]. Due to the co-treatment of HCC827 NSCLC cells with AZD5582 and IFN, which results in the induction of cell death and active caspase-3/8 activities, AZD5582 (20 nM; 48 hours) causes apoptosis[2]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 H1975 NSCLC 细胞中,AZD5582(20 nM;48 小时)通过与 IFN 或病毒双链 RNA (dsRNA) 协同作用抑制细胞活力[2]。 AZD5582(20 nM;17 或 25 小时)诱导 caspase-3 和 caspase-7 裂解,下调 cIAP-1,激活 RIPK1(caspase-8 的上游调节因子),并激活外源性 (caspase-8) 和内源性(caspase-9) 凋亡途径[2]。由于 HCC827 NSCLC 细胞与 AZD5582 和 IFN 共同处理,导致细胞死亡和活性 caspase-3/8 活性的诱导,AZD5582(20 nM;48 小时)会导致细胞凋亡[2]。
AZD5582 单药在20 nM浓度下可轻微抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H1975细胞系的活力。[2] AZD5582(20 nM)与低至1 ng/ml的干扰素-γ(IFNγ)联用,能强烈协同诱导H1975细胞死亡。相比之下,AZD5582 与TNFα、IFNα或IFNλ联用效果甚微。[2] AZD5582(20 nM)与双链RNA类似物聚肌胞苷酸(poly(I:C))联用也能诱导H1975细胞死亡,但效果弱于与IFNγ联用。AZD5582 与顺铂或TRAIL联用仅显示轻微的协同效应。[2] AZD5582 与IFNγ联用诱导的协同细胞死亡在其他NSCLC细胞系(如HCC827和H1437)中也观察到,但在A549细胞中效应较弱,在Calu-3和H441细胞中无效。该联合用药对正常人肺泡上皮细胞(HAECs)无害。[2] 在长期(4周)克隆形成实验中,AZD5582(20 nM)与IFNγ(1或5 ng/ml)联用能完全根除H1975细胞的集落形成,而 AZD5582 单药或与poly(I:C)联用则不能。[2] 蛋白质印迹分析显示,AZD5582(20 nM)单药可下调cIAP1蛋白水平,并诱导H1975细胞中RIPK1的磷酸化以及caspase-8、caspase-9、caspase-3、caspase-7和PARP的切割(激活)。当 AZD5582 与IFNγ(10 ng/ml)联用时,这些凋亡标志物显著增强。[2] 在HCC827细胞中,AZD5582(20 nM)与IFNγ(5 ng/ml)联用可协同诱导caspase-8和PARP的时间依赖性切割,并显著提高caspase-3和caspase-8的酶活性。膜联蛋白V染色证实了细胞凋亡的诱导。[2] AZD5582/IFNγ联合诱导的细胞死亡几乎可被JAK激酶抑制剂完全阻断,并可被广谱caspase抑制剂Z-VAD-FMK、caspase-8特异性抑制剂Z-IETD-FMK和RIPK1抑制剂necrostatin-1显著抑制。该细胞死亡不受TNFα中和抗体、NF-κB抑制剂、EGFR抑制剂或坏死性凋亡抑制剂(RIPK3抑制剂GSK872、MLKL抑制剂necrosulfonamide)的影响,表明其机制是不依赖于TNFα、由JAK激酶、caspase-8和RIPK1介导的细胞凋亡。[2] 细胞对 AZD5582/IFNγ联合用药的敏感性与细胞具备功能性IFNγ信号传导(表达IFNγ受体-1和STAT1)以及低表达IAP蛋白survivin和livin相关。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
AZD5582(静脉注射;0.1-3.0 mg/kg;每周一次;两周)治疗两周后,肿瘤大部分消失。当给小鼠给予中等剂量的药物(0.5 mg/kg)时,cIAP1在给药后降解,但需要一段时间才能达到诱导细胞凋亡的效果[1]。
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| 细胞实验 |
使用至少 200~500 个细胞,通过台盼蓝排除法评估细胞死亡,具体取决于细胞是否用 AZD5582、siRNA 或 DNA 处理。将胰腺癌细胞按每孔 1~3 × 104 个细胞接种到 96 孔微量滴定板中进行 MTS 测定。第二天,细胞接受不同剂量的 IAP 拮抗剂 AZD5582,持续 72 小时。 MTS 测定按照MTS 测定方案进行。
细胞活力/增殖实验: 将NSCLC细胞接种于48孔板中,生长至亚汇合状态,然后用 AZD5582(不同浓度,常用20 nM)单独或与细胞因子(如IFNγ、TNFα)或其他试剂(如poly(I:C)、TRAIL、顺铂)联合处理指定时间(如48-72小时)。使用MTS检测试剂评估细胞活力。测定吸光度,并计算相对于DMSO处理对照细胞的存活率。也可使用台盼蓝拒染法和自动细胞计数仪进行活细胞计数。[2] 克隆形成实验: 将细胞以低密度(500个细胞/孔)接种于12孔板中。过夜贴壁后,用 AZD5582(20 nM)和/或IFNγ(1或5 ng/ml)处理细胞4周,每5天更换一次培养基。然后固定细胞集落,用结晶紫染色,并进行视觉计数。也可洗脱染料,通过测量540 nm处的吸光度进行定量。[2] 蛋白质印迹分析: 用 AZD5582 和/或IFNγ处理细胞,用PBS洗涤并裂解。测定蛋白质浓度。取等量蛋白质进行SDS-PAGE分离,转印至膜上,并用针对靶蛋白(如切割的caspases、PARP、cIAP1、XIAP、p-RIPK1、STAT1、survivin、livin)的一抗进行孵育。与HRP标记的二抗孵育后,使用增强化学发光底物检测信号。[2] 细胞凋亡实验(膜联蛋白V流式细胞术): 用 AZD5582(20 nM)和IFNγ(5 ng/ml)处理细胞48小时。收集贴壁和悬浮的细胞。然后用FITC标记的膜联蛋白V染色,并通过流式细胞术分析以鉴定凋亡细胞。[2] Caspase活性测定: 用 AZD5582 和IFNγ处理细胞,然后裂解。将细胞裂解液(含100 µg蛋白质)与比色法caspase-3底物(DEVD-pNA)或caspase-8底物(IETD-pNA)在反应缓冲液中孵育。通过测量405 nm处的吸光度来监测发色基团对硝基苯胺(pNA)的释放,活性表示为每单位蛋白质的OD405值。[2] 使用抑制剂的机制研究: 为探究细胞死亡通路,在 AZD5582 和IFNγ处理的同时或之前,用各种药理学抑制剂(如Z-VAD-FMK、Z-IETD-FMK、necrostatin-1、JAK激酶抑制剂、TNFα中和抗体、GSK872、necrosulfonamide)对细胞进行预处理或共处理。随后通过MTS法评估细胞活力,以确定通路抑制对联合用药诱导的细胞死亡的影响。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AZD5582 is described as a novel class of dimeric Smac mimetic. [2]
As a monotherapy, AZD5582 exhibited limited antiproliferative activity across a panel of NSCLC cell lines in this study, consistent with the reported profile of IAP inhibitors. Its therapeutic potential is significantly enhanced when combined with IFNγ. [2] The study proposes that the AZD5582/IFNγ combination represents a novel apoptosis-targeted therapy for a subset of NSCLC. Biomarkers predicting response may include functional IFNγ signaling pathway components (IFNγR1 and STAT1 expression/activation) and low expression of specific IAP proteins (survivin and livin). [2] |
| 分子式 |
C58H78N8O8
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|---|---|
| 分子量 |
1015.2887
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| 精确质量 |
1014.594
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| 元素分析 |
C, 68.61; H, 7.74; N, 11.04; O, 12.61
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| CAS号 |
1258392-53-8
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| 相关CAS号 |
AZD5582 dihydrochloride;1883545-51-4
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| PubChem CID |
49847690
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
1207.3±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
683.9±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.622
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| LogP |
9.22
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| tPSA |
200
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
19
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| 重原子数目 |
74
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| 分子复杂度/Complexity |
1950
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| 定义原子立体中心数目 |
10
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| SMILES |
O=C([C@H](C1CCCCC1)NC([C@H](C)NC)=O)N1CCC[C@H]1C(N[C@H]1C2=CC=CC=C2C[C@H]1OCC#CC#CCO[C@@H]1CC2=CC=CC=C2[C@@H]1NC([C@@H]1CCCN1C([C@H](C1CCCCC1)NC([C@H](C)NC)=O)=O)=O)=O
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| InChi Key |
WLMCRYCCYXHPQF-ZVMUOSSASA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C58H78N8O8/c1-37(59-3)53(67)61-49(39-21-9-7-10-22-39)57(71)65-31-19-29-45(65)55(69)63-51-43-27-15-13-25-41(43)35-47(51)73-33-17-5-6-18-34-74-48-36-42-26-14-16-28-44(42)52(48)64-56(70)46-30-20-32-66(46)58(72)50(40-23-11-8-12-24-40)62-54(68)38(2)60-4/h13-16,25-28,37-40,45-52,59-60H,7-12,19-24,29-36H2,1-4H3,(H,61,67)(H,62,68)(H,63,69)
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| 化学名 |
(2S)-1-[(2S)-2-cyclohexyl-2-[[(2S)-2-(methylamino)propanoyl]amino]acetyl]-N-[(1S,2R)-2-[6-[[(1S,2R)-1-[[(2S)-1-[(2S)-2-cyclohexyl-2-[[(2S)-2-(methylamino)propanoyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-2,3-dihydro-1H-inden-2-yl]oxy]hexa-2,4-diynoxy]-2,3-dihydro-1H-inden-1-yl]pyrrolidine-2-carboxamide
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| 别名 |
AZD-5582; AZD 5582; AZD5582
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~98.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9849 mL | 4.9247 mL | 9.8494 mL | |
| 5 mM | 0.1970 mL | 0.9849 mL | 1.9699 mL | |
| 10 mM | 0.0985 mL | 0.4925 mL | 0.9849 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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