| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IMPDH/inosine 5'-monophosphate dehydrogenase
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| 体外研究 (In Vitro) |
尽管苯基系列提供了许多高效的类似物，但取代的吡啶基吖啶酮表现出最佳的体内疗效，具有改善的药代动力学和体外分析特性。基于这一分析，我们选择了类似物4m/BMS-566419作为我们的主要候选者。稳态酶动力学研究确定，4m/BMS-566419是IMPDH II的可逆和非竞争性抑制剂，对IMP的Ki为25±3 nM，对NAD为20±4 nM。分析数据的部分列表如表4所示。[1]
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| 体内研究 (In Vivo) |
在广泛使用的人类类风湿性关节炎临床前模型——完全预防性Lewis大鼠佐剂性关节炎（AA大鼠）模型中评估了吖啶酮4m/BMS-566419，以确定复合治疗对接种完全弗氏佐剂后足肿胀的影响。选择大鼠是因为它对IMPDH抑制剂的免疫抑制作用敏感，并且容易受到类似机制的毒性，如MMF临床观察到的贫血和胃肠道毒性。
通过将弗氏完全佐剂皮下注射到雄性Lewis大鼠的尾部底部来诱导关节炎。在第一个实验中，每天以50和25 mg/kg PO/QD的剂量给药吖啶酮4m/BMS-566419，在第二个实验中（图3B），每天以15 mg/kg的MMF剂量给药，从第0天开始，每天以10和5 mg/kg的剂量给药剂量给药21天。通过体积测量法获得后爪体积的基线测量值。在接下来的三周内进行了额外的爪子体积测量，并计算了爪子体积高于基线的增加量。在10、25和50 mg/kg PO/QD剂量下，爪肿胀明显受到抑制（与水载体相比，p<0.05，Student's t检验，图3）。此外，通过大体检查或组织病理学检查，大鼠在任何剂量下都没有表现出胃肠道毒性的迹象。MMF在15mg/kg剂量下表现出显著的抑制作用（图3A），在10mg/kg PO/QD剂量下仅表现出适度（约30%）的抑制作用，但对爪子肿胀的抑制作用没有统计学意义（数据未显示），在这些剂量下也没有显示出胃肠道毒性的迹象。这项研究清楚地证明了这种新型口服活性吖啶酮抑制剂（4m）/BMS-566419在大鼠佐剂性关节炎模型中的疗效。[1] 慢性同种异体肾病（CAN）是晚期同种异体移植物丢失的主要原因。CAN的一个形态学特征是肾间质纤维化。霉酚酸酯（MMF）是肌苷5'-单磷酸脱氢酶（IMPDH）抑制剂，据报道可以减轻肾间质纤维化的进展。然而，新合成的与MMF结构不同的IMPDH抑制剂是否具有抗纤维化作用的问题仍未得到解答。我们使用单侧输尿管梗阻（UUO）实验大鼠模型评估了化学合成的IMPDH抑制剂BMS-566419的抗纤维化作用，并与MMF进行了比较。还研究了在UUO诱导的肾纤维化中起重要作用的单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和转化生长因子β1（TGF-β1）的表达水平，以确定BMS-566419影响肾纤维化进展的机制。在UUO治疗14天后，在给予载体对照的大鼠肾皮质中经常观察到间质纤维化。在组织病理学实验中，口服BMS-566419对UUO诱导的肾纤维化显示出显著的剂量依赖性抑制作用。BMS-566419治疗还降低了胶原蛋白含量，如羟脯氨酸浓度和1型胶原蛋白mRNA的表达。BMS-566419还降低了MCP-1和TGF-β1的mRNA表达。60 mg/kg的BMS-566419治疗的抗纤维化作用似乎与40 mg/kg的MMF治疗相当。这些结果表明，BMS-566419和其他化学合成的IMPDH抑制剂具有与MMF相似的有益药理作用，是治疗纤维化肾病（包括CAN）的潜在候选药物[2]。 |
| 酶活实验 |
IMPDH I型和II型酶活性。[1]
使用类似于先前报道的程序测量人IMPDH I型或II型的酶活性。17在340 nm下用分光光度法跟踪NAD+转化为NADH的过程。将含有0.1 M Tris、0.1 M KCl、3 mM EDTA、pH 8.0、400μM IMP、2 mM DTT和40 nM IMPDH I或II的反应混合物加入平底UV透明96孔板的孔中。为了测试抑制剂，将溶解在DMSO中的4m/BMS-566419在反应中稀释，使DMSO的最终浓度为2.5%。用于这些测定的IMPDH I和II分别从表达人I型或II型酶基因的大肠杆菌中纯化。通过加入NAD+至终浓度为400μM来引发反应。在25°C下孵育2小时后，读数为340 nM。使用四参数逻辑图计算抑制NADH积累50%所需的化合物浓度（IC50）。 |
| 细胞实验 |
人T淋巴细胞（CEM）增殖抑制试验。[1]
人T淋巴母细胞CEM细胞系（ATCC）在含有10%热灭活FBS和100单位/mL青霉素和链霉素的RPMI 1640中培养。在0.5%DMSO存在下，将细胞以3000个细胞/孔的浓度接种在96孔Costar平底组织培养板中。试验化合物以10μM的终浓度加入三份，连续稀释3倍。将细胞培养物在5%CO2加湿气氛中保持72小时。在用10%（v/v）Alamar Blue染料孵育最后5小时后，测量细胞存活率。Alamar Blue的荧光转换分别在激发/发射设置为530/590nm的Cytoflower II多孔板读数器上读取。使用四参数逻辑图计算IC50值。 人外周血单个核细胞增殖抑制试验。[1] 根据ICN/Cappel LSM规范，通过密度梯度离心从肝素化全血中分离出人PBMC。将PBMC维持在含有10%热灭活FBS和100单位/mL青霉素和链霉素的RPMI 1640培养基中。全血分离后，立即将5×104个细胞/孔接种到96孔组织培养板中，用200 ng/mL的抗CD3单克隆抗体OKT3和1μg/mL的可溶性抗CD28抗体刺激。以3.3μM的最终起始浓度加入三份试验化合物，并连续稀释3倍。所有培养孔均含有0.5%的DMSO。将细胞培养物在5%CO2加湿气氛中保持72小时，然后添加1μCi 3H-胸苷/孔。孵育5小时后，测定放射性标记的胸苷[3H] 掺入量。使用四参数逻辑图计算抑制PBMC增殖50%所需的化合物浓度（IC50）。 |
| 动物实验 |
UUO模型[2]
7周龄雄性Sprague Dawley大鼠腹腔注射苯巴比妥钠（40 mg/kg）麻醉。左侧输尿管用5-0丝线结扎两点，并在结扎线之间切断。输尿管暴露但未结扎的动物作为假手术对照组。使用MMF和BMS-566419。MMF（20或40 mg/kg）溶于0.5%甲基纤维素水溶液，BMS-566419（30或60 mg/kg）溶于0.1 N HCl，从手术当天开始，连续14天，每日一次口服给药。术后第14天，将大鼠放血后在戊巴比妥钠（40 mg/kg）麻醉下处死，并取出左肾用于后续研究。在UUO治疗后第14天评估药物对肾纤维化的影响，因为UUO引起的组织病理学和生化改变至少在第7天较小，之后显著增加。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在药代动力学 (PK) 研究（表 5）中，4m/BMS-566419 在大鼠体内的生物利用度为 43%，半衰期为 3.6 小时；在食蟹猴体内的生物利用度为 88%，半衰期为 4.0 小时。这些研究表明，4m/BMS-566419 代谢稳定，且由于不含酚类残基，预计不会像 MMF 那样发生肠肝循环。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在Lewis大鼠AA模型中，评估了吖啶酮BMS-566419/4m和MMF的胃肠道耐受性。为了确定胃肠道毒性方面的最大耐受剂量，给大鼠分别给予递增剂量的MMF或4m，持续长达14天。随后监测大鼠腹泻和体重减轻的情况。每日接受50 mg/kg MMF或125 mg/kg BMS-566419/4m的大鼠在为期两周的研究中存活，仅观察到轻微的短暂体重减轻，部分大鼠偶有软便。较高剂量的MMF和4m/BMS-566419（例如分别为75 mg/kg和150 mg/kg）会导致中度至重度腹泻，经组织病理学证实（隐窝细胞坏死），进而导致发病。基于这些发现，MMF 50 mg/kg和4m 125 mg/kg被选为胃肠道毒性的最大耐受剂量。基于这些大鼠研究中的暴露量（AUC），确定了4m和MMF的胃肠道毒性治疗指数（TI）。根据4m在最低有效剂量和最大耐受剂量下的AUC，确定其在AA大鼠模型中的胃肠道毒性TI为19倍。相比之下，MMF的TI为6.9倍。[1]
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| 参考文献 |
[1]. Acridone-based inhibitors of inosine 5'-monophosphate dehydrogenase: discovery and SAR leading to the identification of N-(2-(6-(4-ethylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)propan-2-yl)-2- fluoro-9-oxo-9,10-dihydroacridine-3-carboxamide (BMS-566419). J Med Chem. 2007;50(15):3730-3742.
[2]. Effect of the inosine 5'-monophosphate dehydrogenase inhibitor BMS-566419 on renal fibrosis in unilateral ureteral obstruction in rats. Int Immunopharmacol. 2010 Nov;10(11):1434-9. |
| 其他信息 |
肌苷单磷酸脱氢酶 (IMPDH) 是鸟苷核苷酸从头合成的关键酶，它催化肌苷-5'-单磷酸不可逆地氧化为黄嘌呤核苷-5'-单磷酸，该过程依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+)。霉酚酸酯 (MMF) 是霉酚酸的前药，其作用机制是基于对 IMPDH 的抑制，因此在临床上可用于治疗移植排斥反应。MMF 的总体临床疗效受限于其普遍认为的剂量限制性胃肠道 (GI) 毒性，这种毒性与其特定的药代动力学特征相关。因此，开发一种具有全新结构和不同药代动力学特征的 IMPDH 抑制剂可能降低胃肠道毒性的发生率，并提高其疗效。本文将详细介绍新型高效吖啶酮类IMPDH抑制剂BMS-566419/4m的发现及其构效关系研究，并探讨其在佐剂性关节炎大鼠模型中口服给药的疗效和胃肠道耐受性。[1]
总之，我们发现了一系列新型的吖啶酮类IMPDH II抑制剂。构效关系研究获得了多个高效类似物，这些类似物不仅显著抑制IMPDH活性，还能抑制CEM淋巴母细胞和人外周血单核细胞（PBMC）的增殖。基于其体外活性、体内活性以及药代动力学和安全性特征，我们选择4m/BMS-566419作为先导候选药物。化合物 4m/BMS-566419 在大鼠佐剂性关节炎模型（一种人类类风湿性关节炎的临床前模型）中，以 10 mg/kg 的剂量显示出疗效。该化合物的体外和体内药代动力学及代谢特征与 MMF 不同，因此，在大鼠中对 4m/BMS-566419 进行了评估，以确定其在体内的疗效与毒性之间的关系。结果发现，与 MMF 相比，4m/BMS-566419 在胃肠道毒性方面，其治疗指数提高了约 3 倍。总体而言，临床前数据表明，与吗替麦考酚酯（MMF）相比，吖啶酮4m在人体中可能具有更佳的胃肠道不良反应安全性。[1] 总之，本研究表明，BMS-566419对UUO治疗肾脏的抗纤维化作用与MMF相同，并伴有MCP-1和TGF-β1表达的降低。这些发现提示，新合成的IMPDH抑制剂（如BMS-566419）是治疗移植领域CAN急性排斥反应和肾纤维化的强效且可能有效的新药。[2] |
| 分子式 |
C28H30FN5O2
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|---|---|
| 分子量 |
487.57
|
| 精确质量 |
487.238
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| 元素分析 |
C, 68.97; H, 6.20; F, 3.90; N, 14.36; O, 6.56
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| CAS号 |
566161-24-8
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| PubChem CID |
9913339
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
4.6
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| tPSA |
84.82
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
36
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| 分子复杂度/Complexity |
801
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1=CC2C(C3C=CC=CC=3NC=2C=C1C(NC(C)(C)C1=CN=C(C=C1)N1CCN(CC)CC1)=O)=O
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| InChi Key |
XEVJUIZOZCFECP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H30FN5O2/c1-4-33-11-13-34(14-12-33)25-10-9-18(17-30-25)28(2,3)32-27(36)20-16-24-21(15-22(20)29)26(35)19-7-5-6-8-23(19)31-24/h5-10,15-17H,4,11-14H2,1-3H3,(H,31,35)(H,32,36)
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| 化学名 |
N-[2-[6-(4-ethylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl]propan-2-yl]-2-fluoro-9-oxo-10H-acridine-3-carboxamide
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| 别名 |
BMS566419; BMS-566419; BMS-566,419; 566161-24-8; BMS 566,419; UNII-9688E11ZQ0; 9688E11ZQ0; N-(1-(6-(4-Ethyl-1-piperazinyl)-3-pyridinyl)-1-methylethyl)-2-fluoro-9,10-dihydro-9-oxo-3-acridinecarboxamide; 3-Acridinecarboxamide, N-(1-(6-(4-ethyl-1-piperazinyl)-3-pyridinyl)-1-methylethyl)-2-fluoro-9,10-dihydro-9-oxo-; N-(2-(6-(4-ethylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)propan-2-yl)-2-fluoro-9-oxo-9,10-dihydroacridine-3-carboxamide; BMS 566419
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0510 mL | 10.2549 mL | 20.5099 mL | |
| 5 mM | 0.4102 mL | 2.0510 mL | 4.1020 mL | |
| 10 mM | 0.2051 mL | 1.0255 mL | 2.0510 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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