当用作杀菌剂时，克菌丹可能会对植物生长至关重要的微生物过程产生负面影响，从而导致其失效[1]。

本研究在实验室微宇宙模型中，而非在活体动物中，探讨了克菌丹对土壤微生物群落的影响。研究发现，在四种不同的农田土壤中施用农业剂量（2.0、3.5、5.0 和 10.0 kg/ha）的克菌丹，对多种微生物群落产生了显著且不同的影响[1]。
在所有测试剂量（2.0 至 10.0 kg/ha）下，可培养真菌总数均显著降低。第二次施用杀菌剂后，抑制作用更加明显，且随着浓度的增加而增强[1]。
在所有测试浓度下，克菌丹均对需氧固氮细菌的数量及其相关的固氮酶活性产生了显著的负面影响。这两个参数呈高度正相关（r² = 0.92），且与克菌丹的剂量呈显著负线性相关[1]。硝化细菌（包括将铵氧化为亚硝酸盐的I期硝化细菌和将亚硝酸盐氧化为硝酸盐的II期硝化细菌）也受到克菌丹的负面影响，尤其是在第二次施用杀菌剂后[1]。相反，总可培养细菌和反硝化细菌的数量在克菌丹存在下显著增加。这种刺激作用在第二次施用杀菌剂后通常更为明显[1]。

固氮酶活性测定：采用乙炔还原法测定土壤样品中的固氮酶活性。将土壤样品置于20 mL试管中，用橡胶塞密封。注入乙炔至终浓度为10% (v/v)。在28℃下孵育24小时后，取出气体样品，使用配备火焰离子化检测器的气相色谱仪分析乙烯的生成量。通过与乙烯和氮气混合物制备的标准品[1]的峰面积进行比较，对乙烯峰进行定量。

可培养细菌和真菌总数：采用标准土壤稀释平板法对微生物种群进行计数。将土壤样品进行系列稀释，取等分试样接种于选择性培养基上：细菌用胰蛋白胨大豆琼脂，真菌用查氏琼脂（pH 6.0）。平板在28℃下培养3天（细菌）或5天（真菌）后进行菌落计数[1]。
需氧固氮细菌：采用系列稀释平板法，在添加琼脂的伯克氏无氮培养基上估算需氧固氮菌的数量。在28°C培养3天后，通过测定液体摇瓶培养物中的固氮酶活性来确认菌落的固氮能力[1]。
反硝化细菌：文献中提到了反硝化细菌的测定，但没有提供该特定方法的详细操作步骤[1]。
硝化细菌（最可能数法）：采用最可能数法对硝化细菌进行计数。分别对I期（氨氧化）细菌和II期（亚硝酸盐氧化）细菌进行分析。将接种后的烧瓶在28°C下培养，并定期测定亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的含量，以对阳性试管进行计数[1]。

吸收、分布和排泄
克菌丹和福美双是农业中广泛使用的两种杀菌剂，但生物监测数据大多仅限于测量工人尿液样本中克菌丹代谢物的浓度，这使得结果难以解释，例如内剂量估算、基于工作内容的日变化以及最可能的暴露途径。本研究旨在对田间工人进行重复的克菌丹和福美双暴露生物测量，以（i）更好地评估基于工作内容的内剂量和主要暴露途径，以及（ii）建立最合适的采样和分析策略。本研究建立了树木种植者（n = 2）和葡萄种植者（n = 3）在典型工作周（连续七天，包括喷洒和收获活动）内尿液中克菌丹和福美双特异性和非特异性生物标志物的详细排泄时间曲线。本研究评估了尿液测量结果表达方式的影响，包括肌酐校正或未校正的排泄率以及特定时间段（8、12 和 24 小时）内的累积量。随后，利用动力学模型，基于 24 小时累积尿量估算了吸收剂量和主要进入途径。时间进程分析表明，喷洒作业期间的暴露水平高于收割作业期间。模型模拟还显示，受试者对农药的吸收有限，主要通过皮肤暴露。此外，该研究指出，与随机尿样中的浓度或排泄率相比，使用重复 24 小时尿液收集的体重校正值来表达生物标志物值具有优势，且无需肌酐校正。大量研究表明，克菌丹易于从胃肠道吸收，并迅速代谢和排出体外。四氢邻苯二甲酰亚胺和三氯甲基硫代部分的可能代谢途径已被阐明。在大鼠体内，四氢邻苯二甲酰亚胺部分在48小时内92%排出体外，96小时内97%排出体外（85%经尿液排出，12%经粪便排出）。三氯甲基硫醚部分转化为光气，光气进一步代谢为噻唑烷-2-硫酮-4-羧酸，后者经口服给药大鼠的尿液排出；二氧化碳也是光气代谢的产物，其代谢途径涉及羰基硫中间体的形成。光气也可在肠道内被亚硫酸盐解毒，并经口服给药大鼠的尿液排出，生成二硫代双(甲磺酸)及其二硫化物单氧化物衍生物。
克霉唑可从胃肠道迅速吸收，并在血液中迅速代谢。它不会在组织中蓄积，且易与含硫醇的化合物反应。
口服(35)S-克霉唑后，超过90%的放射性物质在24小时内经粪便和尿液排出，几乎100%在3天内排出；0.01-0.05%的放射性物质在器官中被检测到或掺入蛋白质和核酸中。
有关克霉唑（共8种）的吸收、分布和排泄（完整）的更多数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
口服后，克霉唑类杀菌剂在体内迅速代谢，产生两种可在尿液中检测到的代谢物：四氢邻苯二甲酰亚胺（THPI）和噻唑烷-2-硫代-4-羧酸（TTCA）。两者都被认为是职业暴露的有效生物标志物。
对克菌丹的大量研究表明，它易于从胃肠道吸收并迅速代谢。代谢后，它从体内排出。四氢邻苯二甲酰亚胺和三氯甲基硫代部分的可能代谢途径已被阐明。在大鼠体内，92%的四氢邻苯二甲酰亚胺部分在48小时内排出，97%在96小时内排出（85%经尿液排出，12%经粪便排出）。三氯甲基硫代部分转化为光气，光气进一步代谢为噻唑烷-2-硫代-4-羧酸，后者经口服给药的大鼠尿液排出；二氧化碳也是光气代谢的产物，其代谢途径涉及羰基硫中间体的形成。硫源光气也可在肠道内被亚硫酸盐解毒，并经口服给药的大鼠尿液排出，生成二硫代双(甲磺酸)及其二硫化物单氧化物衍生物。克霉唑在体外通过混合肝脏代谢代谢。氧化酶将克霉唑氧化为羰基硫，提示其代谢途径与体内相似。肠道降解似乎在克霉唑的代谢中起着重要作用。毒性代谢物硫源光气是在细胞硫醇存在下，由克霉唑分子的三氯甲基硫部分生成的。硫源光气进一步代谢为噻唑烷-2-硫代-4-羧酸，后者经口服给药的大鼠尿液排出。二氧化碳也是硫源光气代谢的产物，羰基硫是其中间产物（23%的放射性碳以二氧化碳的形式排出）。硫源光气也可在肠道内被亚硫酸盐解毒，并通过口服给药的大鼠尿液排出，形成二硫代双(甲磺酸)及其二硫化物单氧化物衍生物。
有关克菌丹代谢/代谢物（共9种）的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

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生物半衰期
研究了¹⁴C标记的克菌丹在幼鼠和成年鼠中的皮肤渗透性……皮肤吸收呈双相性，至少93%的剂量在皮肤上的半衰期至少为1000小时。
研究了克菌丹（纯度79.9%）在与人血孵育期间的降解情况。将浓度约为 1 μg/mL 的克菌丹与 37 °C 的血液混合。在 0 至 31 秒的不同时间点，通过加入磷酸和丙酮终止反应。测定了克菌丹的降解和 THPI 的生成。克菌丹迅速代谢为 THPI，计算得到的半衰期为 0.97 秒。质谱分析表明，THPI 是唯一的降解产物。
……克菌丹的半衰期非常短，血液中光气的浓度（分别为 0.9 秒和 0.6 秒）表明，这些化合物在口服后不会直接到达胎儿体内，但 THPI 可能可以。

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[1]. Effects of the fungicide Captan on some functional groups of soil microflora. Applied Soil Ecology Volume 7, Issue 3, March 1998, Pages 245-255.

根据美国环境保护署 (EPA) 的说法，克菌丹可能具有致癌性。克菌丹是一种白色固体，可溶于液体载体，属于水乳化剂类。它可通过吸入、皮肤吸收和/或摄入引起疾病。该物质的主要危害在于其对环境的威胁。一旦发生泄漏，应立即采取措施限制其扩散到环境中。由于它是液体，因此很容易渗入土壤并污染地下水。它用作杀菌剂。克菌丹是一种二羧酰亚胺，化学式为 3a,4,7,7a-四氢邻苯二甲酰亚胺，其中与氮原子相连的氢原子被三氯甲基取代。它是一种非内吸性杀菌剂，于 20 世纪 50 年代引入，广泛用于防治水果、蔬菜和观赏作物的真菌病害。它是一种抗真菌农药。它属于异吲哚、有机氯、有机硫和邻苯二甲酰亚胺类杀菌剂。克菌丹是一种用于水果、蔬菜和观赏植物的杀菌剂。急性（短期）皮肤接触克菌丹可能导致人类皮炎和结膜炎。大量摄入克菌丹可能导致人类呕吐和腹泻。研究发现，克菌丹对某些品系的小鼠具有致癌性，这些小鼠在通过饮食摄入克菌丹后会发生十二指肠肿瘤。然而，通过灌胃（实验性地将该化学物质注入胃中）或注射的方式接触克菌丹的小鼠并未观察到肿瘤发生率增加。美国环境保护署 (EPA) 已将克菌丹列为 2 类致癌物，这意味着它可能对人类致癌。克菌丹是一种通用杀虫剂 (GUP)，属于邻苯二甲酰亚胺类杀菌剂。虽然克菌丹可以单独使用，但它通常作为成分添加到其他杀虫剂的混合物中。它用于防治多种水果、蔬菜和观赏植物的病害。它还可以改善许多水果的外观，使其看起来更鲜艳、更健康。长期高剂量使用克菌丹被认为具有致癌性，会导致细胞毒性和再生细胞增殖。然而，这些高剂量的克菌丹远远高于人们日常饮食中可能摄入的剂量，也高于他们在职业或居住环境中可能接触到的剂量。因此，克菌丹不太可能是人类致癌物，也不会构成令人担忧的癌症风险。
邻苯二甲酰亚胺类杀菌剂之一。

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背景：克菌丹是一种常用的农业杀菌剂，用于防治多种植物真菌病原体。其农艺用量通常为 1.5 至 10.0 kg/ha [1]。
环境影响：本研究表明，克菌丹 可显著改变土壤微生物群落的组成和功能。它对真菌和参与氮循环的关键微生物群落（例如固氮菌和硝化菌）尤其有害。这可能会影响土壤肥力，特别是氮素收支。该研究表明，克菌丹 的轮作和合理使用对于预防环境危害至关重要 [1]。
差异性影响：该杀菌剂对不同的微生物群落表现出差异性影响，抑制真菌、固氮菌和硝化菌，同时刺激细菌总数和反硝化菌。剂量越高、重复施用，这种影响通常越明显 [1]。

C9H8CL3NO2S

300.58

298.934

133-06-2

Captan-d6;1330190-00-5

8606

White to cream powder
Crystals from carbon tetrachloride
Colorless crystals
White, crystalline powder [Note: Commercial product is a yellow powder]

1.6±0.1 g/cm3

314.2±52.0 °C at 760 mmHg

178°C

143.8±30.7 °C

0.0±0.7 mmHg at 25°C

1.636

1.85

62.68

0

3

1

16

340

0

C1=CCC2C(C1)C(=O)N(C2=O)SC(Cl)(Cl)Cl

LDVVMCZRFWMZSG-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C9H8Cl3NO2S/c10-9(11,12)16-13-7(14)5-3-1-2-4-6(5)8(13)15/h1-2,5-6H,3-4H2

2-(trichloromethylsulfanyl)-3a,4,7,7a-tetrahydroisoindole-1,3-dione

AI3-26538 Buvisild K Glyodex 3722Captan HexacapCaptabAmercideAacaptan Agrosol S Bangton Captadin Captaf Captax Vanicide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~50 mg/mL (~166.34 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。