| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
CAY10397对LoVo和HCA-7细胞裂解物中15-PGDH的抑制作用
与LoVo细胞相比，已知HCA-7细胞系表达COX-2，仅表达微量COX-1和15-PGDH。这通过蛋白质印迹分析得到证实（数据未显示）。将LoVo（图6a）或HCA-7（图6b）细胞裂解物与500 mM NAD+一起孵育10分钟，加入或不加入15-PGDH抑制剂CAY10397（50μM）。抑制15-PGDH可显著消除内源性11-氧代ETE的形成（图6a。然而，由于在HCA-7细胞裂解液中检测不到氧代ETE和13,14-二氢-15-氧代-PGE2，因此对其前体进行了定量，CAY10397对其水平没有影响（图6b）。
CAY103977对15-PGDH酶的抑制显著减少了LoVo细胞裂解物中内源性11-氧代ETE的形成（图6a）。此外，在用CAY10397处理的LoVo细胞裂解物中，15-氧代ETE以及13,14-二氢-15-氧代-PGE2（另外两种15-PGDH依赖性代谢物）的形成也显著减少（图6a）。相比之下，HCA-7细胞中检测不到三种15-PGDH产物，即11-和15-氧代ETE和13,14-二氢-15-氧代-PGE2，因为这些细胞不表达任何15-PGDH。10,28相反，在裂解物中观察到这三种代谢物的相应前体。此外，CAY10397治疗对11（R）-HETE、15（S）-HETE或PGE2水平没有影响（图6b）。 |
| 细胞实验 |
CAY10397对LoVo或HCA-7细胞裂解物中15-PGDH的抑制作用
LoVo或HCA-7细胞生长至90%融合，用10 mL磷酸缓冲盐水（PBS）缓冲液洗涤（2次），然后在600μL含有0.1 M Tris-HCl（pH 7.9）和蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液中轻轻刮取。将细胞悬浮液转移到2mL Eppendorf管中，在冰上超声处理60秒（功率5）。然后将细胞裂解液与选择性15-PGDH抑制剂（CAY10397，50μM）及其辅因子（NAD+，500μM）在37°C下孵育10分钟。然后用10%乙酸水溶液（10μL）将pH值调节至4，然后加入内标混合物[13C20]-15-氧代ETE、[2H8]-15（S）-HETE和[2H4]-PGE2（50 pg/μL，20μL）。加入乙醚（600μL），将样品涡旋混合并离心（15000 rpm×2 min）。在氮气下蒸发有机层，然后如上所述用PFB溴化物衍生化二十烷类化合物。最后，将样品重新溶解在己烷/乙醇（95:5；v/v，100μL）中，并通过正相LC-ECAPIC/MS进行分析（20μL）。通过BCA测定每种裂解物的蛋白质浓度对二十烷类化合物的量进行归一化。
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| 参考文献 |
[1]. 11-Oxoeicosatetraenoic acid is a cyclooxygenase-2/15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase-derived antiproliferative eicosanoid. Chem Res Toxicol. 2011 Dec 19;24(12):2227-36.
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| 其他信息 |
CAY10397 属于偶氮苯类化合物，其结构为：一个苯环的 4 位被乙氧羰基取代，另一个苯环的 3 位被羧甲基取代，4 位被羟基取代。它是 15-羟基前列腺素脱氢酶 (15-羟基-PGDH) 的强效选择性抑制剂，属于 EC 1.1.1.141 [15-羟基前列腺素脱氢酶 (NAD(+))] 抑制剂。它是一种二羧酸单酯、乙酯，属于偶氮苯类和酚类化合物。
此前，我们已证实11(R)-羟基-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-二十碳四烯酸 (HETE) 是上皮细胞中一种重要的环氧合酶 (COX)-2 衍生的花生四烯酸 (AA) 代谢产物。我们采用稳定同位素稀释手性液相色谱 (LC)-电子捕获大气压化学电离 (ECAPCI)/质谱 (MS) 技术，对表达 COX-2 和 15-羟基前列腺素脱氢酶 (15-PGDH) 的人结直肠腺癌 (LoVo) 上皮细胞系中 COX-2 衍生的二十碳酸类物质进行了定量分析。添加AA后，11(R)-HETE的分泌量在数分钟内达到峰值浓度，随后迅速下降，表明发生了进一步的代谢。令人惊讶的是，通常特异性氧化二十碳酸类物质15(S)-羟基的重组15-PGDH，被发现能够将11(R)-HETE转化为11-氧代-5,8,12,14-(Z,Z,E,Z)-二十碳四烯酸(ETE)。此外，LoVo细胞裂解液能够将11(R)-HETE转化为11-氧代-ETE，而使用5-[[4-(乙氧羰基)苯基]偶氮]-2-羟基苯乙酸(CAY10397) (50 μM)抑制15-PGDH则显著抑制了内源性11-氧代-ETE的生成，同时11(R)-HETE的水平相应升高。这些数据证实了COX-2和15-PGDH是负责11-oxo-ETE生物合成的酶。最后，向LoVo细胞中添加AA后，11-oxo-ETE迅速分泌到培养基中，并在孵育开始后20分钟内达到峰值。随后，11-oxo-ETE水平急剧下降。LC-MS/MS分析证实，在LoVo细胞中，谷胱甘肽(GSH)S-转移酶(GST)可将11-oxo-ETE代谢为11-oxo-ETE-GSH (OEG)加合物。基于溴脱氧尿苷(BrdU)的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖实验表明，11-oxo-ETE抑制HUVEC增殖的半数抑制浓度(IC50)为2.1 μM。这些结果表明，11-oxo-ETE 是一种新型的 COX-2/15-PGDH 衍生的二十碳酸类物质，它抑制内皮细胞增殖的能力与 15d-PGJ2 相似。[1] |
| 分子式 |
CH3*Y
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|---|---|
| 分子量 |
103.94042
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| 精确质量 |
328.105
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| 元素分析 |
C, 62.19; H, 4.91; N, 8.53; O, 24.36
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| CAS号 |
78028-01-0
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| PubChem CID |
2601
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
578.0±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
303.4±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.599
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| LogP |
3.41
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| tPSA |
108.55
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
460
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCOC(=O)C1=CC=C(C=C1)N=NC2=CC=C(C(=C2)CC(=O)O)O
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| InChi Key |
YYBSDOZYJSGLTH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H16N2O5/c1-2-24-17(23)11-3-5-13(6-4-11)18-19-14-7-8-15(20)12(9-14)10-16(21)22/h3-9,20H,2,10H2,1H3,(H,21,22)
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| 化学名 |
2-[5-[(4-ethoxycarbonylphenyl)diazenyl]-2-hydroxyphenyl]acetic acid
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| 别名 |
78028-01-0; 5-[2-[4-(Ethoxycarbonyl)phenyl]diazenyl]-2-hydroxybenzeneacetic acid; 5-(2-(4-(Ethoxycarbonyl)phenyl)diazenyl)-2-hydroxybenzeneacetic acid; cay10397; CK47A; 2-[3-[(4-ethoxycarbonylphenyl)hydrazinylidene]-6-oxo-1-cyclohexa-1,4-dienyl]acetic Acid; 2-[5-[(4-ethoxycarbonylphenyl)diazenyl]-2-hydroxyphenyl]acetic acid; SCHEMBL10834750;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 9.6209 mL | 48.1047 mL | 96.2094 mL | |
| 5 mM | 1.9242 mL | 9.6209 mL | 19.2419 mL | |
| 10 mM | 0.9621 mL | 4.8105 mL | 9.6209 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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