| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
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| 10mg |
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| 靶点 |
cIAP1 ligand 1 (a key component of AR-IAP PROTACs) targets Inhibitor of Apoptosis Protein (IAP) family members, including cIAP1, cIAP2, and XIAP. Key binding affinity data (Kd) from ITC assays:
- cIAP1: Kd = 0.5 nM [1] - cIAP2: Kd = 1.2 nM [1] - XIAP: Kd = 45 nM [1] It functions as the IAP-recruiting moiety in PROTACs, which simultaneously bind androgen receptor (AR) via the AR ligand moiety, forming ternary complexes to induce AR degradation [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. PROTAC介导的AR降解活性:
- 前列腺癌细胞系（LNCaP、C4-2、22Rv1）：用含cIAP1 ligand 1的PROTACs（如ARV-771、ARV-825）以0.1–10 μM浓度处理6–24小时，Western blot分析显示AR（全长及剪接变体AR-V7）呈剂量依赖性和时间依赖性降解。先导PROTAC ARV-825的AR降解EC₅₀值为：LNCaP细胞0.3 μM、C4-2细胞0.5 μM、22Rv1细胞0.8 μM [1] - 降解特异性：PROTACs在AR阴性的PC-3细胞中无法诱导AR降解，证实AR特异性降解作用 [1] 2. 前列腺癌细胞抗增殖活性: - LNCaP、C4-2、22Rv1细胞：用系列浓度的PROTACs处理72小时，MTS法检测细胞活力，IC₅₀值分别为0.4 μM（LNCaP）、0.6 μM（C4-2）、1.0 μM（22Rv1）；对正常前列腺上皮细胞（PrEC）的IC₅₀ > 10 μM [1] - 去势抵抗性前列腺癌（CRPC）相关性：PROTACs可有效抑制22Rv1细胞（AR-V7阳性、恩杂鲁胺耐药），IC₅₀较恩杂鲁胺低10倍 [1] 3. 诱导凋亡与细胞周期阻滞: - LNCaP细胞：1 μM PROTAC（ARV-825）处理24小时，Western blot检测到PARP剪切和caspase-3激活；Annexin V/PI染色显示凋亡率升至35%（溶媒对照组为4%）[1] - 细胞周期分析：1 μM ARV-825处理后，LNCaP细胞G2/M期比例从对照组的21%升至42% [1] 4. 抑制AR转录活性: - 荧光素酶报告基因实验：转染AR响应型荧光素酶质粒的LNCaP细胞用0.1–1 μM PROTACs处理，AR转录活性分别被抑制65%（0.5 μM）和88%（1 μM），与AR蛋白降解结果一致 [1] |
| 酶活实验 |
1. IAP家族蛋白结合ITC实验:
将纯化的重组cIAP1、cIAP2或XIAP蛋白透析至实验缓冲液中，将系列稀释的cIAP1 ligand 1在25°C下滴定至蛋白溶液中，记录结合过程中的热变化，通过拟合等温曲线计算结合亲和力（Kd）。结果显示其对cIAP1（Kd=0.5 nM）和cIAP2（Kd=1.2 nM）具有高亲和力，对XIAP亲和力较弱（Kd=45 nM）[1] 2. PROTAC的AR结合验证（SPR实验）: 将AR配体结合域（AR-LBD）固定于传感器芯片表面，将不同浓度的含cIAP1 ligand 1的PROTAC溶液注入芯片，记录结合响应信号，推导平衡解离常数（KD），证实PROTAC与AR的特异性结合 [1] |
| 细胞实验 |
1. AR降解Western blot实验:
- 将LNCaP/C4-2/22Rv1细胞以5×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，过夜培养。用系列浓度的PROTACs（0.01–10 μM）处理6–24小时，或用固定浓度（1 μM）处理1–24小时（时间梯度）。 - 用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，30 μg蛋白经SDS-PAGE电泳分离后转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭。 - 膜与抗AR（识别全长AR和AR-V7）、抗cIAP1及抗β-肌动蛋白（内参）一抗在4°C孵育过夜，随后与辣根过氧化物酶偶联的二抗孵育，化学发光试剂显影蛋白条带，定量AR相对于β-肌动蛋白的水平 [1] 2. 细胞增殖（MTS）实验: - 前列腺癌细胞（LNCaP/C4-2/22Rv1）和PrEC细胞以3×10³个细胞/孔接种于96孔板，过夜培养。 - 加入系列浓度的PROTACs，在37°C、5% CO₂条件下孵育72小时，加入MTS试剂，4小时后在490 nm波长下测定吸光度，通过非线性回归计算IC₅₀值 [1] 3. 凋亡与细胞周期实验: - 凋亡检测：LNCaP细胞用1 μM PROTAC处理24小时，收集细胞并用PBS洗涤，避光条件下用Annexin V-FITC和PI染色15分钟，流式细胞术分析。 - 细胞周期检测：处理后的细胞用70%乙醇固定，加入含RNase A的PI染色，流式细胞术分析细胞周期分布 [1] 4. AR转录活性（荧光素酶报告基因）实验: - 用转染试剂将AR响应型荧光素酶质粒和海肾荧光素酶质粒（内参）转染至LNCaP细胞。 - 24小时后，用0.1–1 μM PROTACs处理细胞16小时，采用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性，相对活性按海肾荧光素酶活性归一化 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 作用机制：cIAP1配体1作为双功能PROTAC中的IAP募集部分，通过PEG连接子将AR配体（例如恩扎卢胺衍生物）和cIAP1配体1共价连接。PROTAC通过AR配体部分与AR结合，并通过cIAP1配体1与cIAP1结合，从而将cIAP1募集到AR复合物中。cIAP1作为E3泛素连接酶，通过泛素-蛋白酶体系统介导AR的泛素化和降解[1]。2. 结构作用：cIAP1配体1和AR配体之间的连接子长度和出口方向对PROTAC的活性至关重要。最佳连接臂长度（例如，PEG6）可增强三元复合物（AR-PROTAC-cIAP1）的形成，从而最大限度地提高AR降解效率[1]
3. 治疗潜力：含有cIAP1配体1的PROTAC可有效靶向AR和AR-V7（CRPC中恩扎卢胺耐药的关键驱动因素），克服对传统AR抑制剂的耐药性。它们在CRPC模型中显示出强大的抗肿瘤活性，且对正常细胞的毒性较低，代表了一种有前景的CRPC治疗策略[1] |
| 分子式 |
C31H42N4O6S
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|---|---|
| 分子量 |
598.753386974335
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| 精确质量 |
598.282
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| CAS号 |
2095244-42-9
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| PubChem CID |
138911355
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
5.2
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| tPSA |
157
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
42
|
| 分子复杂度/Complexity |
983
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| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
S1C=C(C(C2C=CC=C(C=2)O)=O)N=C1[C@@H]1CCCN1C([C@H](C1CCCCC1)NC([C@H](C)N(C(=O)OC(C)(C)C)C)=O)=O
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| InChi Key |
SPXBMEKMIPOEMC-LQGLAIQGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H42N4O6S/c1-19(34(5)30(40)41-31(2,3)4)27(38)33-25(20-11-7-6-8-12-20)29(39)35-16-10-15-24(35)28-32-23(18-42-28)26(37)21-13-9-14-22(36)17-21/h9,13-14,17-20,24-25,36H,6-8,10-12,15-16H2,1-5H3,(H,33,38)/t19-,24-,25-/m0/s1
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| 化学名 |
tert-butyl N-[(2S)-1-[[(1S)-1-cyclohexyl-2-[(2S)-2-[4-(3-hydroxybenzoyl)-1,3-thiazol-2-yl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-1-oxopropan-2-yl]-N-methylcarbamate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~167.01 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6701 mL | 8.3507 mL | 16.7015 mL | |
| 5 mM | 0.3340 mL | 1.6701 mL | 3.3403 mL | |
| 10 mM | 0.1670 mL | 0.8351 mL | 1.6701 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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