| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
CFTR (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)
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| 体外研究 (In Vitro) |
校正器C4作为II类校正器，靶向核苷酸结合结构域（NBD）2-膜跨接结构域（MSD）1接口，当与靶向NBD1-MSD2接口的I类校正剂（VX-809）结合时，该校正器修复CFTR-p.PPhe508del的表达并协同发挥作用[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
正在以突变特异性的方式为囊性纤维化（CF）开发恢复囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）门控（增强因子）或转运（校正因子）缺陷的小分子疗法。CFTR-p.p.Fe508del（F508del）的药理学校正选项正在广泛研究中，但也可能受益于校正治疗的其他运输突变体的校正在很大程度上仍然未知。我们研究了VX-809和其他18种校正器（C1-C18）在人类肠道CF类器官中使用功能性CFTR测定法对折叠突变体CFTR-pPhe508del、p-Ala455Glu（A455E）和p-Asn1303Lys（N1303K）的校正。CFTR-p.p.Phe508del和p-Ala455Glu的功能都被多种校正剂增强，但没有残余或校正剂诱导的活性与CFTR-p.Asn1303Lys相关。重要的是，VX-809诱导的校正对CFTR-p.p.Fe508del最为显著，而对CFTR.p.Ala455Glu的校正在一组称为双噻唑（C4、C13、C14和C17）和C5的化合物中最高。这些数据支持开发突变特异性校正剂，以优化处理不同的CFTR运输突变体，并确定C5和双噻唑是校正CFTR-p.Ala455Gru最有前景的化合物 [1]。
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| 酶活实验 |
FIS的量化[1]
使用Volocity成像软件自动定量毛喉素刺激的类器官肿胀。总类器官面积（xy平面）相对于t=0增加 计算毛喉素处理的最小值，并从每个条件下的两个单独的孔中取平均值。在某些情况下，根据标准操作程序中详细描述的标准，人工排除细胞碎片和不可行的结构。曲线下面积（AUC）（t=60或120 最小基线100%）。[1] 蛋白质印迹分析[1] 未处理或用VX-809或C17处理的类器官在补充有完整蛋白酶抑制剂片的莱姆利缓冲液中裂解。通过SDS-PAGE分析裂解物，并将其电泳转移到聚偏二氟乙烯膜上。用Tris缓冲盐水-吐温（0.3%吐温，10 mM Tris（pH 8）和150 mM氯化钠在水中），并探测3 室温下用小鼠单克隆E-钙粘蛋白特异性（1/10 000稀释度；BD Biosciences）或CFTR特异性抗体（囊性纤维化折叠联合体450、570和596；1/3000稀释；），然后与辣根过氧化物酶偶联的第二抗体孵育并增强化学发光发展。[1] |
| 细胞实验 |
直肠抽吸活检的隐窝分离和类器官培养[1]
方法与之前描述的方案略有不同。简言之，将隐窝分离并接种在24孔板中的50%基质胶（生长因子减少，无酚）中（每个孔在三个10μL基质胶液滴中约10-30个隐窝）。生长培养基进一步补充Primocin（稀释1/500）。在培养的第一周加入万古霉素和庆大霉素。介质每2-3次刷新一次 天，类器官每7-10次传代约1/5 天。[1] FIS测定[1] 先前描述的测量毛喉素诱导的类器官肿胀的方法略有改变。简言之，将7-10天龄培养物的直肠CF类器官（传代1-30）接种在平底96孔培养板中，共5个 μL 50%基质胶，通常含有20–80种类有机物，浸泡在100 μL完整培养基，含或不含3 μM VX-809或C1–C18，浓度如图2所示。接种后1天，将类器官孵育30 最小值为3 μM的钙黄绿。在钙黄绿染色后，以如图所示的浓度加入毛喉素，并通过共聚焦活细胞显微镜（LSM710），5×物镜）直接分析类器官60 min（p.Phe508del/p.Phe508del和p.Phe508 del/p.Ala455Glu）或120 min（p.Phe508del/I类和p.Phe508 del/p.Asn1303Lys）。每个条件使用两到三个井。每个个体在三到五个不同的时间点重复每个实验。 |
| 动物实验 |
Human material [1]
Approval for this study was obtained by the Ethics Committee of the University Medical Centre Utrecht and the Erasmus Medical Centre Rotterdam. Informed consent was obtained from all subjects participating in the study. Organoids from healthy controls and CF subjects (CFTR genotypes indicated in figure 1) were generated from four rectal suction biopsies after intestinal current measurements obtained 1) during standard CF care, 2) for diagnostic purposes or 3) during voluntary participation in studies. |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C21H17CLN4O2S2
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|---|---|
| 分子量 |
456.96
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| 精确质量 |
456.048
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| 元素分析 |
C, 55.20; H, 3.75; Cl, 7.76; N, 12.26; O, 7.00; S, 14.03
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| CAS号 |
421580-53-2
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| PubChem CID |
1144671
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.44g/cm3
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| 折射率 |
1.711
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| LogP |
6.038
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| tPSA |
139.34
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
583
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=C(SC(=N1)NC(=O)C2=CC=CC=C2)C3=CSC(=N3)NC4=C(C=CC(=C4)Cl)OC
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| InChi Key |
RDOBOPJBMQURAT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H17ClN4O2S2/c1-12-18(30-21(23-12)26-19(27)13-6-4-3-5-7-13)16-11-29-20(25-16)24-15-10-14(22)8-9-17(15)28-2/h3-11H,1-2H3,(H,24,25)(H,23,26,27)
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| 化学名 |
N-(2-((5-chloro-2-methoxyphenyl)amino)-4'-methyl-[4,5'-bithiazol]-2'-yl)benzamide
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| 别名 |
Corrector C 4; Corrector C-4; Corrector C4
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
> 10 mM in DMSO
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1884 mL | 10.9419 mL | 21.8838 mL | |
| 5 mM | 0.4377 mL | 2.1884 mL | 4.3768 mL | |
| 10 mM | 0.2188 mL | 1.0942 mL | 2.1884 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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