| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
NOX; TRPA1 (EC50: 1 to 3 μM)
DPI targets flavin-dependent enzymes, particularly NADPH oxidases (NOX enzymes). It also inhibits NOS2 (iNOS) and NOS3 (eNOS). DPI functions as a TRPA1 activator. It binds strongly to flavoproteins and inhibits several enzymes, including NO synthase, NADPH oxidases and NADPH cytochrome P450 oxidoreductase. It also inhibits platelet aggregation. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
NADPH氧化酶（NOX）和TRPA1激活剂二苯碘氯化物（DPI）的EC50为1至3 μM。在0.03至10 μM的浓度范围内使用DPI可成功诱导HEK-TRPA1细胞产生Ca2+反应。然而，即使在相对较高的10 μM浓度下，DPI也无法在对照HEK细胞中引起Ca2+反应。DPI可引起Ca2+反应[1]。在共培养体系中加入DPI后，观察到脂多糖（LPS）诱导的细胞反应。二苯铵处理可显著降低LPS诱导的O2-产生量2.0倍，使其降至对照组的27%以内[2]。体外实验表明，DPI是巨噬细胞NOS2（iNOS）和内皮细胞NOS3（eNOS）的强效不可逆抑制剂。它是一种具有强效抗菌活性的 NADPH/NADH 氧化酶抑制剂。氯化二吡咯烷酮 (DPI) 已被用于抑制其他黄素酶，例如中性粒细胞 NADPH 氧化酶，并能与黄素蛋白牢固结合。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
将2 mM二苯碘鎓氯化物注射到纤维爪的足底可诱发舔舐或啃咬行为[1]。二苯碘鎓氯化物处理可有效减少LPS诱导的O4促进的细胞丢失，无论是在注射后立即进行还是在24小时后进行。当立即或24小时后给予二苯碘鎓时，LPS注射引起的白质纤维紊乱显著减少。然而，LPS注射48小时后，二苯碘鎓(DPI)处理似乎并不能修复LPS诱导的白质损伤。在注射LPS后立即或24小时后给予DPI治疗，可显著降低膜模块中gp91phox和p67phox的积累[2]。
小胶质细胞活化对中枢神经系统（CNS）中少突胶质细胞前体（preOL）损伤的贡献被认为是脑室周围白质软化症（PVL）发病机制的主要原因之一。本研究探讨了NADPH氧化酶（NOX）抑制剂二苯碘鎓（DPI）在体内外对细菌脂多糖（LPS）诱导的小胶质细胞毒性对preOL的保护作用。体外实验表明，与小胶质细胞共培养的preOL在LPS暴露后表现出preOL凋亡增加，并伴有超氧阴离子（O₂⁻）的过度产生和过氧亚硝酸根（ONOO⁻）的形成。 LPS显著上调了活化的小胶质细胞NOX亚基p67-phox和gp91-phox在质膜上的积累。二苯碘鎓(DPI) (10μM)可显著减弱这种NOX活性的上调。体内实验中，对接受LPS脑内注射的2日龄新生Sprague-Dawley大鼠，连续3天皮下注射DPI (1mg/kg/天)。在LPS注射后24小时内给予DPI治疗，可显著改善白质损伤，减少少突胶质细胞前体(preOL)的丢失、超氧阴离子(O₂⁻)的生成和过氧亚硝酸根(ONOO⁻)的形成，并抑制小胶质细胞中p67-phox和gp91-phox的合成以及p67-phox的膜转位。这些结果表明，LPS诱导的preOL凋亡可能由小胶质细胞来源的ONOO⁻介导。 DPI 可预防 LPS 诱导的脑损伤，其最可能的机制是通过抑制 NOX 介导的 ONOO⁻ 生成，从而防止少突胶质细胞前体丢失和未成熟白质损伤 [2]。 在体内，DPI 可预防啮齿动物模型中早期酒精性肝损伤。它被用作研究工具，用于研究 NOX 酶在各种生理和病理过程中的作用，包括炎症和心血管疾病。它通过间接激活交感神经系统产生升压和心动过速效应。 |
| 酶活实验 |
DPI的体外酶活性测定通常检测其抑制NOX或NOS酶的能力。将酶与其底物在浓度递增的化合物存在下进行孵育。采用分光光度法或化学发光法测定酶活性，并计算IC50值。由于抑制作用是不可逆的，因此需要精心设计测定方法。
|
| 细胞实验 |
神经胶质细胞培养分两个阶段进行：首先建立神经胶质细胞混合培养，然后分离纯化神经胶质细胞。首先，按照先前描述的方法（略有修改），从2日龄Sprague-Dawley大鼠的大脑皮层制备原代混合神经胶质细胞培养物。简而言之，将从大脑皮层分离的细胞以10⁶个细胞/cm²的密度接种于含有10%胎牛血清（FBS；Gibco，美国）的DMEM/F12培养基（Hyclone，美国）的75 cm²培养瓶中，每隔一天换液一次，培养7-9天。然后，按照先前描述的方法，通过摇动和差异分离法从原代混合神经胶质细胞培养物中分离出原代前少突胶质细胞（preOLs）和小胶质细胞。将混合胶质细胞培养瓶在200 rpm下摇动2小时，分离出小胶质细胞，并在含10%胎牛血清的DMEM/F12（1:1）培养基中培养2-3天。通过免疫荧光染色（数据未显示）检测小胶质细胞标志物异凝集素B4，发现原代小胶质细胞纯度>95%。随后，将混合胶质细胞培养物在220 rpm下继续摇动过夜，以将前少突胶质细胞（preOLs）与星形胶质细胞层分离（Li et al., 2005）。将所得培养上清液细胞悬液接种到未包被的培养皿中，孵育1小时，以去除残留的黏附小胶质细胞和星形胶质细胞。分离的少突胶质细胞前体（preOL）在无血清的preOL条件培养基（DMEM/F12，0.1%牛血清白蛋白，50 μg/ml人载脂蛋白转铁蛋白，50 μg/ml胰岛素，30 nM亚硒酸钠，10 nM D-生物素，10 nM氢化可的松，10 ng/ml血小板衍生生长因子（PDGF），10 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子（bFGF））中培养3-5天。使用针对少突胶质细胞标志物O4和O1的生物素标记单克隆抗体，通过免疫细胞化学方法区分O4+O1−晚期少突胶质细胞前体与其他发育阶段特异性少突胶质细胞。原代preOL中O4+O1−细胞的比例>99%（数据未显示）。
随后，使用Transwell培养系统（美国康宁公司）将纯化的小胶质细胞和preOL进行共培养。共培养细胞分为三组：对照组、LPS激活组和LPS+DPI组。小胶质细胞在Transwell小室中培养于已建立的preOL层上，并分别暴露于LPS（100 ng/ml；大肠杆菌O111:B4，Sigma）、LPS+DPI（10 μmol/l；Sigma，美国）或未处理组。孵育48小时后，收集共培养的培养基上清液和细胞蛋白组分进行进一步分析[2]。 基于细胞的DPI检测包括用该化合物处理各种细胞系，并测量ROS生成、NO生成和钙信号。评估该化合物抑制NOX和NOS酶以及激活TRPA1的能力。DPI选择性地抑制细胞内活性氧。 |
| 动物实验 |
如前所述，本研究使用出生两天的Sprague-Dawley大鼠幼崽（雌雄均有）进行新生大鼠脑室周围白质软化（PVL）损伤模型的脑内注射。简而言之，幼崽用异氟烷（1.5%）麻醉后，置于带有新生大鼠适配器的立体定位仪下。在颅骨表面切开头皮，暴露前囟。脑内注射点位于前囟后方1.0 mm、左侧1.0 mm、颅骨表面下2.0 mm处。将LPS悬浮液（1 mg/kg，溶于无菌生理盐水）以0.5 μl/min的速率注射到大鼠左侧脑半球，注射速率已在前文中确定。注射后，针头在原位停留2分钟，然后缓慢拔出以防止渗漏。缝合伤口后，将幼崽置于保温毯（34-35 °C）上进行恢复。脑内注射后，80%的动物存活。
所有幼鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+DPI组，LPS+DPI组进一步分为DPI-0 h、DPI-24 h和DPI-48 h三个亚组。对照组使用注射无菌PBS的幼鼠。DPI组幼鼠在LPS注射后0 h、24 h或48 h开始皮下注射DPI（单次剂量1 mg/kg/天），持续3天，具体方法如前所述。 所有动物实验均已获得上海交通大学医学院附属新华医院实验动物伦理委员会的批准。 LPS注射后5天，所有幼鼠均用戊巴比妥钠（100 mg/kg）麻醉，然后通过经心灌注冷生理盐水处死，随后用4%多聚甲醛固定以制备脑切片，或断头取脑组织用于免疫印迹分析[2]。 实验前，将6至7周龄的ddy小鼠单独置于透明笼中30分钟。随后，向右后爪足底注射10 μL二苯碘鎓氯化物（2 mM，溶剂：含20% DMSO的Kolliphor EL），同时或不进行腹腔注射HC030031（300 mg/kg，在注射二苯碘鎓氯化物前0.5小时腹腔注射；溶剂：含0.5%甲基纤维素的生理盐水）。注射后45分钟内记录舔舐或啃咬注射爪的时间[2]。 DPI的体内动物研究通常涉及对肝损伤、炎症或心血管疾病啮齿动物模型进行给药。评估该化合物预防组织损伤和调节炎症反应的能力。它通过间接激活交感神经系统引起升压和心动过速效应。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
干粉吸入剂（DPI）的药代动力学特性尚未得到充分阐明。该化合物通常溶于二甲基亚砜（DMSO）或其他溶剂中进行体外和体内研究。其半衰期和分布情况尚未得到广泛研究。体外DMSO溶解度为13 mg/mL。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
DPI是一种强效的多种酶抑制剂，可导致显著毒性。在实验室环境中操作时应极其谨慎。该化合物的毒性与其抑制黄素依赖性酶和诱导氧化应激的能力有关。它是线粒体NADH-泛醌氧化还原酶的抑制剂。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
二苯并碘鎓氯化物是一种有机氯化物，其抗衡离子为二苯并碘鎓。它是一种EC 1.6.3.1 [NAD(P)H氧化酶（生成H₂O₂）]抑制剂和G蛋白偶联受体激动剂。它含有一个二苯并碘鎓基团。瞬时受体电位强直蛋白1 (TRPA1) 是一种钙离子通透性非选择性阳离子通道，在神经元和非神经元细胞中均有表达，在急性疼痛和炎症性疼痛中发挥重要作用。本研究表明，NADPH氧化酶 (NOX) 抑制剂二苯并碘鎓 (DPI) 在人胚肾细胞 (HEK-TRPA1) 和表达人TRPA1的人成纤维细胞样滑膜细胞中可作为TRPA1激活剂。在HEK-TRPA1细胞中，浓度范围为0.03至10 μM的DPI可诱导浓度依赖性的Ca²⁺反应。选择性TRPA1拮抗剂HC-030031 (HC) 可有效阻断Ca²⁺反应。相反，DPI对表达TRPV1-V4或TRPM8的HEK细胞无影响。其他四种NOX抑制剂，阿朴西林(APO)、VAS2870 (VAS)、氧化铅和2-乙酰吩噻嗪，也能诱导HEK-TRPA1细胞产生Ca²⁺反应，而HC预处理可抑制该反应。在5 mM谷胱甘肽存在下，DPI诱导的Ca²⁺反应显著降低。此外，TRPA1中半胱氨酸621的突变显著抑制了DPI诱导的Ca²⁺反应，但并未抑制APO和VAS诱导的反应。在膜片钳实验中，无论膜片位于外侧还是内侧，DPI均能诱导通道活性。内源性新霉素的应用显著抑制了DPI诱导的内向电流。在表达TRPA1的炎症滑膜细胞中，DPI诱导的Ca²⁺反应对氢氯噻嗪敏感。在小鼠中，足底注射DPI可引起疼痛相关反应，而预先注射氢氯噻嗪可抑制该反应。总之，我们的研究结果表明，DPI和其他NOX抑制剂激活人TRPA1，但不通过NOX介导。[1]
DPI是研究NOX酶、NOS酶和TRPA1通道的常用研究工具。它尚未获准用于治疗用途。该化合物对于研究这些靶点在健康和疾病（包括氧化应激、炎症和心血管功能）中的作用具有重要价值。 |
| 分子式 |
C12H8CLI
|
|---|---|
| 分子量 |
314.55
|
| 精确质量 |
313.936
|
| 元素分析 |
C, 45.82; H, 2.56; Cl, 11.27; I, 40.34
|
| CAS号 |
4673-26-1
|
| 相关CAS号 |
244-54-2; 4673-26-1 (Cl)
|
| PubChem CID |
2733504
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid
|
| 熔点 |
312-322ºC
|
| tPSA |
0
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
1
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
14
|
| 分子复杂度/Complexity |
170
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C12=CC=CC=C1C3=CC=CC=C3[I+]2.[Cl-]
|
| InChi Key |
FCFZKAVCDNTYID-UHFFFAOYSA-M
|
| InChi Code |
InChI=1S/C12H8I.ClH/c1-3-7-11-9(5-1)10-6-2-4-8-12(10)13-11;/h1-8H;1H/q+1;/p-1
|
| 化学名 |
8-iodoniatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-1(13),2,4,6,9,11-hexaene;chloride; Dibenziodolium chloride
|
| 别名 |
DPI; Dibenziodolium chloride; iphenyleneiodonium chloride; 4673-26-1; Dibenziodolium chloride; DPI; UNII-7M9D81YZ2N; 7M9D81YZ2N; CHEBI:77967; MFCD00214165; Diphenyleneiodonium Chloride
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~6 mg/mL (~19.07 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1791 mL | 15.8957 mL | 31.7914 mL | |
| 5 mM | 0.6358 mL | 3.1791 mL | 6.3583 mL | |
| 10 mM | 0.3179 mL | 1.5896 mL | 3.1791 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
