DT2216

BCL-XL
DT2216 targets BCL-XL, an anti-apoptotic member of the BCL-2 protein family. As a PROTAC, it recruits BCL-XL to an E3 ubiquitin ligase complex, leading to ubiquitination and subsequent proteasomal degradation of BCL-XL. This mechanism of action is distinct from traditional BCL-XL inhibitors.

DT2216 是一种靶向 Von Hippel-Lindau (VHL) E3 连接酶的 BCL-XL 蛋白水解靶向嵌合体 (PROTAC)，可引导 BCL-XL 降解。由于 VHL 在血小板中表达较低，DT2216 对血小板的毒性显著低于 ABT263，因此对多种 BCL-XL 依赖性白血病和癌细胞更有效。[1] DT2216 通过 VHL 依赖性降解 Bcl-xL，选择性地杀死 Bcl-xL 依赖性 TCL 细胞系。体外实验表明，DT2216 与 ABT199 联合使用可协同杀伤 TCL PDX 细胞。[2] 体外实验表明，DT2216 可有效诱导癌细胞系中 BCL-XL 的降解，从而诱导细胞凋亡并抑制细胞增殖。它的活性使其成为研究 BCL-XL 在癌症中的作用以及开发新的癌症疗法的宝贵工具。

DT2216 单独使用或与其他化疗药物联合使用，可有效减缓多种异种移植瘤在体内的生长，且不会显著增加血小板减少症。[1]
DT2216 是一种比 ABT263 更有效的抗肿瘤药物，且体内血小板毒性更低。[1]
DT2216 与其他 BCL-2 家族蛋白抑制剂联合使用可增强其抗肿瘤活性。[1]
DT2216 与传统化疗药物具有协同作用。[1]

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在体内，DT2216 单独使用对小鼠 MyLa TCL 异种移植瘤具有高度疗效，且不会引起明显的血小板减少症或其他毒性。此外，DT2216 与 ABT199（一种选择性 Bcl-2 抑制剂）联用，在依赖于 Bcl-2 和 Bcl-xL 的 TCL PDX 小鼠模型中，协同降低了疾病负荷并提高了生存率。[2]
在体内，DT2216 已在小鼠异种移植模型中显示出抗肿瘤疗效。作为一种基于 PROTAC 的 BCL-XL 降解剂，它可用于癌症动物模型，以研究其对肿瘤生长和进展的影响。其降解 BCL-XL 和诱导细胞凋亡的能力转化为体内疗效。

AlphaScreen 用于测定 DT2216 与 BCL-XL、BCL-2 和 BCL-W 的结合亲和力[1]
为了评估 DT2216 和 ABT263 与 BCL-XL、BCL-2 和 BCL-W 的结合亲和力，我们进行了 AlphaScreen 竞争性结合实验。该实验在室温下进行，试剂用含有 250 mM HEPES（pH 7.5）、1 M NaCl、1% BSA 和 0.05% Tween-20 的缓冲液稀释。将纯化的重组His标签BCL-XL（0.1 nM）、BCL-2（0.2 nM）或BCL-W（0.2 nM）与递增浓度的DT2216或ABT263以及15 nM生物素标记的BAD（N端标记Biotin-LWAAQRYGRELRRMSDEFEGSFKGL）或30 nM BIM肽（N端标记Biotin-MRPEIWIAQELRRIGDEFNA）在96孔PCR板中孵育，最终体积为40 μL。BAD肽用于评估化合物与BCL-XL的结合亲和力，而BIM肽用于评估化合物与BCL-2和BCL-W的结合亲和力。孵育24小时后，向每个孔中加入5 μL终浓度为20 μg/mL的6X His受体磁珠，并继续孵育1小时。随后，向每个孔中加入5 μL终浓度为20 μg/mL的链霉亲和素-供体磁珠，并孵育30分钟。孵育结束后，将每个样品取17 μL转移至384孔板的相邻孔中。使用Biotek Synergy Neo2多功能酶标仪上的Alpha程序扫描该板。抑制常数 (Ki) 的计算采用 GraphPad Prism 7 软件中的非线性回归、单一位点竞争性结合模型，并使用 Fit Ki 函数，基于实验测定的每对蛋白质/肽的 Kd 值。[1]

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AlphaLISA 三元复合物形成检测[1]
我们使用 AlphaLISA 检测法监测靶蛋白、PROTAC 和 E3 连接酶之间的三元复合物形成，如前所述^{44, 58}。为了验证 BCL-XL/BCL-2、DT2216 和 VHL E3 连接酶三元复合物的形成，将固定浓度的 His 标签重组蛋白（100 nM BCL-XL 和 10 nM BCL-2）和重组活性 GST 标签 VHL/Elongin B/C 复合物（BCL-XL 为 50 nM，BCL-2 为 5 nM）与不同浓度的测试化合物进行 4 倍系列稀释，最终体积为将 40 μL 样品加入 96 孔 PCR 板中。室温孵育 30 分钟后，向每个孔中加入 5 μL 终浓度为 20 μg/mL 的 α-谷胱甘肽供体磁珠，并孵育 15 分钟。之后，向每个孔中加入 5 μL 终浓度为 20 μg/mL 的 6X-His 受体磁珠，并在室温下继续孵育 45 分钟。随后，将每个样品取 17 μL 转移至相邻的 384 孔模拟板孔中，并使用 Biotek Synergy Neo2 多功能酶标仪上的 Alpha 程序进行扫描。数据以平均 AlphaLISA 信号表示，并绘制成不同化合物浓度的曲线图。
DT2216 的体外检测通常涉及测量其对 BCL-XL 蛋白水平的影响。将细胞用递增浓度的化合物处理固定时间，并通过 Western blot 检测 BCL-XL 蛋白水平。 DC50值由剂量反应曲线计算得出。三元复合物的形成可通过生化分析进行评估。

将指定浓度的DT2216或ABT263应用于接种于60 mm培养皿（每皿5 mL完全细胞培养基中含2.5 × 10⁶个细胞）的MOLT-4细胞，孵育24小时。在冰乙醇浴中进行冻融循环或在冰上孵育30分钟均可有效裂解细胞，裂解缓冲液为1X细胞裂解缓冲液。[1]

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细胞热位移分析（CETSA）[1]
CETSA分析方法参考了Smith等人的研究。简而言之，将2.5 × 10⁷个MOLT-4或RS4细胞用1 μM DT2216或DMSO处理6小时，然后收集细胞，用PBS洗涤，并重悬于含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的PBS中。对于MOLT-4细胞，添加10 μM MG132以防止BCL-XL降解。将重悬的细胞用液氮进行四次冻融循环。每次冻融循环后，短暂涡旋振荡裂解液以确保均匀解冻。通过在 4 °C 下以 20,000 ×g 离心 30 分钟分离可溶性组分和细胞碎片，然后将样品在 42 °C 至 69.5 °C 的梯度温度下加热 3 分钟，再冷却至 25 °C 并保持 3 分钟。将处理后的样品在 4 °C 下以 20,000 ×g 离心 30 分钟以去除变性蛋白，然后进行免疫印迹分析。
对于体外细胞实验，培养癌细胞系并用不同浓度的 DT2216 处理。通过蛋白质印迹法确认 BCL-XL 的降解。通过 Annexin V/PI 染色和 caspase-3/7 活性检测评估细胞凋亡。采用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测法评估细胞活力。

DT2216对BCL-XL降解的药效学研究[1]
MOLT-4异种移植瘤的建立方法如下所述，在雌性CB-17 SCID-beige小鼠中。当肿瘤体积约为600 mm³时，荷瘤小鼠接受单次注射载体或DT2216（15 mg/kg/腹腔注射）治疗。在图4b图例所示的每个时间点，分别从载体组和DT2216治疗组中各处死两只小鼠，并收集肿瘤组织。提取肿瘤蛋白，并通过免疫印迹分析检测BCL-XL的降解情况。按照先前的方法，将这些肿瘤的一部分用于 DT2216 分析。

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体内血小板毒性试验[1]
单次给予 DT2216 或 ABT263[1]
对 5-6 周龄的雌性 CB-17 SCID-beige 小鼠进行单次腹腔注射 DT2216（7.5、15 和 25 mpk）或单次口服 ABT263（25、50 和 100 mpk）治疗。如图 4c 图例所示，在不同时间点，通过颌下静脉丛途径从每只小鼠采集约 50 μL 血液，置于 EDTA 抗凝管中，并使用 HEMAVET 950FS 全自动血液分析仪进行血小板计数。[1]

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每日给予 ABT263 或每周一次给予 DT2216[1]
雌性 CB-17 SCID-beige 小鼠接受 ABT263（50 mpk/天/口服）或 DT2216（15 mpk/周/腹腔注射）治疗。在每次注射 ABT263 后 6 小时（0.25 天），从每只小鼠采集约 50 μL 血液；或者在每周一次注射 DT2216 后 0.25 天、1.25 天、2.25 天、3.25 天、4.25 天、5.25 天、6.25 天、7.25 天、8.25 天、9.25 天、10.25 天、11.25 天、12.25 天、17.25 天和 24.25 天，从每只小鼠采集血液。使用 HEMAVET 950FS 血小板计数仪进行血小板计数。MOLT-4 T-ALL 异种移植小鼠模型[1]
为了检测 DT2216 对 MOLT-4 T-ALL 异种移植瘤生长的影响，收集 MOLT-4 T-ALL 细胞，并将其悬浮于常规 RPMI 培养基中，与 Matrigel 基质胶（1:1）混合。将悬浮于 100 μL RPMI 培养基-Matrigel 基质胶混合物中的细胞（5 × 10⁶ 个细胞）皮下注射到 CB-17 SCID 小鼠的右侧腹部。每日监测肿瘤生长情况，每周使用游标卡尺或数字卡尺测量两次肿瘤大小。肿瘤体积采用公式 [(L × W²) × 0.5] 计算，其中 L 为长度（毫米），W 为宽度（毫米）。当平均肿瘤体积达到 150–200 mm³ 时开始治疗。动物被随机分为若干组（n = 6–8），每组初始平均肿瘤体积基本相等。小鼠每周称重两次，并根据治疗开始前各组小鼠的平均体重进行治疗。用于腹腔注射的DT2216和ABT263配制于50% PHOSAL 50 PG、45% MIGLYOL® 810 N和5%聚山梨醇酯80中。DT2216和ABT263以15 mg/kg/周的剂量，通过腹腔注射给药，每次注射100 μL溶剂（扩展数据图8）。用于口服的ABT263配制于10%乙醇、30% PEG 400和60% PHOSAL 50 PG中（图4）。对照组小鼠腹腔注射100 μL溶剂。当小鼠肿瘤最大体积达到机构关于啮齿动物肿瘤终点的政策所规定的“人道终点”时，对小鼠实施安乐死。此外，为避免小鼠遭受过度疼痛或痛苦，若肿瘤出现溃疡或小鼠出现任何健康问题，也对其进行安乐死。小鼠采用二氧化碳窒息法实施安乐死，随后进行颈椎脱臼，并采集包括肿瘤在内的各种组织进行进一步分析。

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H146 SCLC 异种移植模型[1]
为测试 DT2216 单独或与 ABT199 联合用药对 H146 SCLC 异种移植瘤生长的影响，将 5 × 10⁶ 个 H146 SCLC 细胞悬浮于常规 RPMI 培养基中，与 Matrigel 混合，并按照先前描述的方法皮下植入雌性 CB-17 SCID 小鼠的右侧腹部。监测肿瘤生长情况，测量肿瘤大小，并按照上述方法测定肿瘤体积。如图 5c 所示，细胞植入四周后开始治疗。动物被随机分为四组：载体组、DT2216 15 mpk/周（腹腔注射）组、ABT263 15 mpk/周（腹腔注射）组、ABT199 50 mpk/天（口服）组以及 DT2216 + ABT199 联合治疗组。DT2216 和 ABT263 的配制方法如上所述。ABT199 的口服制剂由 60% PHOSAL 50 PG、30% 聚乙二醇 (PEG) 400 和 10% 乙醇配制而成。所有动物均按照机构规定实施安乐死，并采集各种组织样本。称量肿瘤重量，并通过免疫印迹法检测 BCL-XL、BCL-2 和 MCL-1 的表达。

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MDA-MB-231 乳腺癌异种移植模型[1]
为了检测 DT2216 联合多西他赛对 MDA-MB-231 乳腺癌异种移植瘤生长的影响，将 5 × 10⁶ 个 MDA-MB-231 细胞悬浮于常规 RPMI 培养基中，与 Matrigel 混合，皮下植入雌性 NOD-SCID 小鼠右侧腹部。当平均肿瘤体积达到约 130 mm³ 时，将动物随机分为载体组、DT2216 组（15 mpk/q4d/ip）、多西他赛组（7.5 mpk/q14d/iv）和 DT2216 + 多西他赛组。多西他赛溶解于 5% DMSO + 30% PEG 300 + 5% Tween 80 + 60% dH2O 中。该溶液经过滤除菌，得到澄清溶液用于静脉注射。DT2216 在开始给予多西他赛前两天给药，如图 6c 所示。

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T-ALL PDX 模型[1]
为了建立 T-ALL PDX 小鼠模型，将 8 周龄 NSG 小鼠在细胞接种前 24 小时进行亚致死剂量照射（0.25 Gy）。将 PDX 细胞（1 × 10⁶）悬浮于 PBS 中，并通过尾静脉注射到小鼠体内。注射后 10 天，通过骨髓穿刺样本（CUL76 和 D115 T-ALL）或外周血（332X-Luci）中人源和鼠源抗 CD45 抗体的共染色来确定肿瘤移植情况。将小鼠随机分为不同组。CUL76 PDX 分别接受 DT2216（15 mpk/q4d/ip）、ABT199（100 mpk/day/po）、化疗（长春新碱 0.15 mpk + 地塞米松 5 mpk + L-天冬酰胺酶 1000 单位/kg，ip，每周一次）、DT2216 和 ABT199 或化疗的组合治疗，或 ABT199 加化疗的组合治疗，如图 6f 所示。 D115 和 332X-Luci PDX 模型分别接受 DT2216、化疗或 DT2216 与化疗联合治疗，具体方法见扩展数据图 10。每周检测小鼠外周血或骨髓穿刺液中的白血病细胞（hCD45+），监测疾病进展，并观察其生存情况。
DT2216 的体内动物研究在小鼠异种移植瘤模型中进行。荷瘤小鼠经口服或腹腔注射给药，剂量根据药代动力学研究确定。监测肿瘤生长抑制情况。通过蛋白质印迹法证实肿瘤组织中 BCL-XL 的降解。

DT2216（CAS：2365172-42-3）的分子量为787.33 g/mol，分子式为C38H40ClN7O6S2。外观：固体粉末。纯度：≥98%。溶解性：DMSO。储存条件：-20℃。该化合物是一种高效且选择性的BCL-XL降解剂。

DT2216 是一种研究用化合物，尚未获准用于人体治疗。临床前研究表明，其安全性良好。作为一种 BCL-XL 降解剂，它可能对依赖 BCL-XL 生存的正常细胞产生影响。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程。

[1]. A selective BCL-XL PROTAC degrader achieves safe and potent antitumor activity. Nat Med. 2019 Dec;25(12):1938-1947.

[2]. DT2216—a Bcl-xL-specific degrader is highly active against Bcl-xL-dependent T cell lymphomas. J Hematol Oncol. 2020; 13: 95.

Bcl-XL蛋白水解靶向嵌合体DT2216是一种抗凋亡蛋白，即B细胞淋巴瘤超大蛋白（Bcl-XL）的靶向降解剂，采用蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC）技术制备，具有潜在的促凋亡、免疫调节和抗肿瘤活性。DT2216由Bcl-XL配体与Von Hippel-Lindau (VHL) E3连接酶配体连接而成。DT2216给药后，其Bcl-XL结合部分特异性地靶向并结合肿瘤微环境（TME）中肿瘤浸润性调节性T细胞（Tregs）表面表达的Bcl-XL以及Bcl-XL依赖性癌细胞（例如，某些Bcl-XL依赖性T细胞恶性肿瘤）。反过来，VHL E3连接酶配体被募集到内质网（ER），在那里Bcl-XL被泛素化。这导致Bcl-XL泛素化和蛋白酶体介导的降解。Bcl-XL的降解抑制其抗凋亡活性，恢复表达Bcl-XL的Treg细胞和Bcl-XL依赖性癌细胞的凋亡，并导致这些细胞耗竭。Treg细胞的减少可能激活抗肿瘤的CD8+介导的免疫反应，从而抑制肿瘤生长。Bcl-XL是Bcl-2家族的成员，在凋亡的负调控中起着至关重要的作用。它在肿瘤中的表达与Treg细胞存活率的提高相关。Treg细胞在癌症进展和肿瘤免疫抑制中发挥着关键作用。与其他 Bcl-XL 抑制剂相比，DT2216 不会引起血小板毒性，因为 VHL E3 连接酶在血小板中的表达量不高。
DT2216 是一种强效且选择性的 BCL-XL 降解剂，BCL-XL 是一种在多种癌症中过度表达的抗凋亡蛋白。它能诱导癌细胞凋亡，并在临床前模型中显示出抗肿瘤疗效。该药物尚未获得 FDA 批准，仅供研究使用。

C77H96CLF3N10O10S4

1542.3554

1540.58

C, 59.96; H, 6.27; Cl, 2.30; F, 3.70; N, 9.08; O, 10.37; S, 8.31

2365172-42-3

2365172-42-3;DT2216 HCl; DT2216NC; DT2216-isomer;

139331475

White to light yellow solid powder

12.8

321Ų

5

20

29

105

3130

5

CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCC(=O)N4CCN(CC4)CC[C@H](CSC5=CC=CC=C5)NC6=C(C=C(C=C6)S(=O)(=O)NC(=O)C7=CC=C(C=C7)N8CCN(CC8)CC9=C(CCC(C9)(C)C)C1=CC=C(C=C1)Cl)S(=O)(=O)C(F)(F)F)O

PXVFFBGSTYQHRO-REQIQPEASA-N

InChI=1S/C77H96ClF3N10O10S4/c1-51(53-18-20-55(21-19-53)70-52(2)82-50-103-70)83-73(96)66-44-61(92)48-91(66)74(97)71(75(3,4)5)85-68(93)16-12-9-13-17-69(94)90-42-36-87(37-43-90)35-33-59(49-102-62-14-10-8-11-15-62)84-65-31-30-63(45-67(65)104(98,99)77(79,80)81)105(100,101)86-72(95)56-24-28-60(29-25-56)89-40-38-88(39-41-89)47-57-46-76(6,7)34-32-64(57)54-22-26-58(78)27-23-54/h8,10-11,14-15,18-31,45,50-51,59,61,66,71,84,92H,9,12-13,16-17,32-44,46-49H2,1-7H3,(H,83,96)(H,85,93)(H,86,95)/t51-,59+,61+,66-,71+/m0/s1

(2S,4R)-1-[(2S)-2-[[7-[4-[(3R)-3-[4-[[4-[4-[[2-(4-chlorophenyl)-5,5-dimethylcyclohexen-1-yl]methyl]piperazin-1-yl]benzoyl]sulfamoyl]-2-(trifluoromethylsulfonyl)anilino]-4-phenylsulfanylbutyl]piperazin-1-yl]-7-oxoheptanoyl]amino]-3,3-dimethylbutanoyl]-4-hydroxy-N-[(1S)-1-[4-(4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)phenyl]ethyl]pyrrolidine-2-carboxamide

DT2216 HCl; DT-2216; DT 2216; DT2216; 2365172-42-3; DT-2216; (2s,4r)-1-((s)-2-(7-(4-((r)-3-((4-(N-(4-(4-((4'-chloro-4,4-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-[1,1'-biphenyl]-2-yl)methyl)piperazin-1-yl)benzoyl)sulfamoyl)-2-((trifluoromethyl)sulfonyl)phenyl)amino)-4-(phenylthio)butyl)piperazin-1-yl)-7-oxoheptanamido)-3,3-dimethylbutanoyl)-4-hydroxy-N-((s)-1-(4-(4-methylthiazol-5-yl)phenyl)ethyl)pyrrolidine-2-carboxamide; Y8JQ9V7JAJ; (2S,4R)-1-[(2S)-2-[[7-[4-[(3R)-3-[4-[[4-[4-[[2-(4-chlorophenyl)-5,5-dimethylcyclohexen-1-yl]methyl]piperazin-1-yl]benzoyl]sulfamoyl]-2-(trifluoromethylsulfonyl)anilino]-4-phenylsulfanylbutyl]piperazin-1-yl]-7-oxoheptanoyl]amino]-3,3-dimethylbutanoyl]-4-hydroxy-N-[(1S)-1-[4-(4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)phenyl]ethyl]pyrrolidine-2-carboxamide; UNII-Y8JQ9V7JAJ; CHEMBL4745523; DT2216

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~100 mg/mL (~64.8 mM)
Ethanol: ~100 mg/mL (~64.8 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。