| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor, also known as ErbB1/HER1) Tyrosine Kinase. Gefitinib D8 is an anilinoquinazoline derivative that acts as a reversible, competitive ATP-binding inhibitor of the EGFR tyrosine kinase. By blocking the ATP-binding pocket in the intracellular domain of EGFR, it prevents receptor autophosphorylation and the subsequent activation of downstream signaling pathways (Ras-MAPK, PI3K-Akt, and JAK-STAT). This inhibits cell proliferation, angiogenesis, and induces apoptosis in EGFR-dependent cancer cells.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
吉非替尼在无细胞实验中抑制 EGFR 酪氨酸激酶,在 NR6wtEGFR 细胞(过表达野生型 EGFR 的细胞)中的 IC50 值为 2-37 nM。它对 EGFR 的选择性高于其他 ErbB 受体(ErbB2/HER2)。它也是 ABCG2 (BCRP) 外排转运蛋白的抑制剂,IC50 ≈ 3 uM(微摩尔浓度)。吉非替尼可诱导携带 EGFR 激活突变(19 号外显子缺失、L858R)的非小细胞肺癌 (NSCLC) 细胞系(例如 PC9、HCC827)发生 G1 期细胞周期阻滞和细胞凋亡。在 BT-474 人乳腺癌异种移植模型中,口服吉非替尼(200 mg/kg)可显著抑制肿瘤生长。在类风湿性关节炎小鼠模型中,吉非替尼可减轻关节炎症和损伤。吉非替尼 D8 是生物分析的内部标准,未在功能测定中进行体外或体内活性测试。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
EGFR激酶活性采用均相时间分辨荧光法(HTRF)或基于ELISA的检测方法进行测定。将重组人EGFR激酶结构域(0.5-5 nM)与不同浓度的吉非替尼D8(0.1-1000 nM)在含有10-100 uM ATP的反应缓冲液(50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、2 mM MnCl2、1 mM DTT、0.01% BSA)中于30℃孵育30-60分钟。加入生物素标记的肽底物(例如,生物素标记的聚-GAT)启动反应。用EDTA终止反应后,将反应混合物转移至链霉亲和素包被的微孔板中。磷酸化检测采用与Eu3+-隐蔽物(TR-FRET供体)偶联的抗磷酸酪氨酸抗体和荧光标记的受体(例如XL665)。分别在665 nm和620 nm处测量荧光强度,并计算其比值(665/620)。测定IC50值。
|
| 酶活实验 |
不适用(吉非替尼D8是分析检测的参考标准,而非基于细胞的疗效研究中的测试药物)。然而,对于未标记的母体药物:将NR6wtEGFR细胞(野生型EGFR过表达)或A431人表皮样癌细胞(EGFR依赖性)接种于96孔板中(5 × 103个细胞/孔),培养基为含1% FBS的DMEM。经一夜血清饥饿后,用不同浓度的吉非替尼(未标记)(0.1-1000 nM)处理细胞60分钟,然后用EGF(10-100 ng/mL)刺激5-15分钟。裂解细胞,并使用磷酸化EGFR特异性试剂盒(R&D Systems)通过ELISA定量EGFR磷酸化(pEGFR,Tyr1068)。计算pEGFR抑制的IC50值。 D8 标记版本不用于细胞检测。
|
| 细胞实验 |
不适用(吉非替尼D8未用于动物疗效研究)。在小鼠药代动力学研究中,为了验证内标,对雌性CD-1小鼠(20-25 g,每个时间点n=3)口服吉非替尼(10-100 mg/kg),吉非替尼制剂溶于0.5%甲基纤维素或DMSO/PEG300/Tween 80中。分别于给药后0.5、1、2、4、8和24小时通过心脏穿刺采集血样。用含有吉非替尼D8作为内标的乙腈沉淀血浆蛋白。将上清液注入LC-MS/MS系统,并根据峰面积比计算吉非替尼浓度。计算药代动力学参数(Cmax、Tmax、AUC、t½)。
|
| 动物实验 |
吉非替尼D8是一种用于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量分析的稳定同位素内标(SIL-IS)。吉非替尼在人体内的口服生物利用度约为50-60%。它与蛋白质高度结合(约90%),主要与白蛋白和α1-酸性糖蛋白结合。吉非替尼主要通过CYP3A4、CYP2D6和CYP2C19代谢为多种代谢物(例如,O-去甲基吉非替尼)。其末端消除半衰期约为48小时,因此可以每日一次给药。D8标记的内标可校正基质效应和萃取损失。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
吉非替尼D8是研究标准品,不可用于人体。其母体药物吉非替尼(易瑞沙)带有黑框警告,提示可能引起肝毒性和间质性肺病(ILD)(已有死亡病例报告)。常见不良反应(≥20%):腹泻(87%)、皮疹(痤疮样皮疹,75%)、皮肤干燥、恶心、呕吐、厌食和口腔炎。较少见的不良反应:眼毒性(结膜炎、睑缘炎)、脱发和乏力。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
吉非替尼(易瑞沙®)是首个获批用于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的EGFR-TKI(2003年获FDA批准,后限制使用)。吉非替尼D8是一种研究用内标,用于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)生物分析,以进行吉非替尼在药物制剂中的药代动力学(PK)研究、生物等效性试验、治疗药物监测(TDM)和质量控制(QC)。它还可用于同时定量分析吉非替尼及其代谢物。
|
| 参考文献 |
|
| 分子式 |
C₂₂H₁₆D₈CLFN₄O₃
|
|---|---|
| 分子量 |
454.95
|
| 精确质量 |
454.202
|
| CAS号 |
857091-32-8
|
| 相关CAS号 |
Gefitinib;184475-35-2
|
| PubChem CID |
49849312
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4.286
|
| tPSA |
68.74
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
545
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
[2H]C1(C(OC(C(N1CCCOC2=C(C=C3C(=C2)C(=NC=N3)NC4=CC(=C(C=C4)F)Cl)OC)([2H])[2H])([2H])[2H])([2H])[2H])[2H]
|
| InChi Key |
XGALLCVXEZPNRQ-IHGLQNJRSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H24ClFN4O3/c1-29-20-13-19-16(12-21(20)31-8-2-5-28-6-9-30-10-7-28)22(26-14-25-19)27-15-3-4-18(24)17(23)11-15/h3-4,11-14H,2,5-10H2,1H3,(H,25,26,27)/i6D2,7D2,9D2,10D2
|
| 化学名 |
N-(3-chloro-4-fluorophenyl)-7-methoxy-6-[3-(2,2,3,3,5,5,6,6-octadeuteriomorpholin-4-yl)propoxy]quinazolin-4-amine
|
| 别名 |
Gefitinib D8 Gefitinib D8
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1980 mL | 10.9902 mL | 21.9804 mL | |
| 5 mM | 0.4396 mL | 2.1980 mL | 4.3961 mL | |
| 10 mM | 0.2198 mL | 1.0990 mL | 2.1980 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。