Gefitinib D8

别名: Gefitinib D8 Gefitinib D8 [ 2H8 ] - 吉非替尼标准品;吉非替尼 d8
目录号: V40119 纯度: ≥98%
Gefitinib-d8 是 Gefitinib 的氘标记形式。
Gefitinib D8 CAS号: 857091-32-8
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
Other Sizes

Other Forms of Gefitinib D8:

  • Gefitinib impurity 1
  • Gefitinib impurity 5 (gefitinib impurity 5)
  • Gefitinib impurity 2 (gefitinib impurity 1)
  • Mc-Val-Cit-PAB-Gefitinib chloride
  • Gefitinib N-oxide hydrochloride
  • 吉非替尼
  • Gefitinib (ZD 1839)
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
吉非替尼-d8 是吉非替尼的氘标记形式。吉非替尼是一种强效的表皮生长因子受体 (EGFR) 抑制剂(拮抗剂),在 NR6wtEGFR 细胞中的 IC50 值为 2-37 nM。
吉非替尼D8是首个表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)吉非替尼(易瑞沙)的稳定氘标记同位素类似物。它含有八个氘原子,可用作参考标准和内标,用于通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)在药代动力学、生物等效性和药物代谢研究中对吉非替尼进行精确定量。它是药物研发和质量控制的重要工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor, also known as ErbB1/HER1) Tyrosine Kinase. Gefitinib D8 is an anilinoquinazoline derivative that acts as a reversible, competitive ATP-binding inhibitor of the EGFR tyrosine kinase. By blocking the ATP-binding pocket in the intracellular domain of EGFR, it prevents receptor autophosphorylation and the subsequent activation of downstream signaling pathways (Ras-MAPK, PI3K-Akt, and JAK-STAT). This inhibits cell proliferation, angiogenesis, and induces apoptosis in EGFR-dependent cancer cells.
体外研究 (In Vitro)
吉非替尼在无细胞实验中抑制 EGFR 酪氨酸激酶,在 NR6wtEGFR 细胞(过表达野生型 EGFR 的细胞)中的 IC50 值为 2-37 nM。它对 EGFR 的选择性高于其他 ErbB 受体(ErbB2/HER2)。它也是 ABCG2 (BCRP) 外排转运蛋白的抑制剂,IC50 ≈ 3 uM(微摩尔浓度)。吉非替尼可诱导携带 EGFR 激活突变(19 号外显子缺失、L858R)的非小细胞肺癌 (NSCLC) 细胞系(例如 PC9、HCC827)发生 G1 期细胞周期阻滞和细胞凋亡。在 BT-474 人乳腺癌异种移植模型中,口服吉非替尼(200 mg/kg)可显著抑制肿瘤生长。在类风湿性关节炎小鼠模型中,吉非替尼可减轻关节炎症和损伤。吉非替尼 D8 是生物分析的内部标准,未在功能测定中进行体外或体内活性测试。
体内研究 (In Vivo)
EGFR激酶活性采用均相时间分辨荧光法(HTRF)或基于ELISA的检测方法进行测定。将重组人EGFR激酶结构域(0.5-5 nM)与不同浓度的吉非替尼D8(0.1-1000 nM)在含有10-100 uM ATP的反应缓冲液(50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、2 mM MnCl2、1 mM DTT、0.01% BSA)中于30℃孵育30-60分钟。加入生物素标记的肽底物(例如,生物素标记的聚-GAT)启动反应。用EDTA终止反应后,将反应混合物转移至链霉亲和素包被的微孔板中。磷酸化检测采用与Eu3+-隐蔽物(TR-FRET供体)偶联的抗磷酸酪氨酸抗体和荧光标记的受体(例如XL665)。分别在665 nm和620 nm处测量荧光强度,并计算其比值(665/620)。测定IC50值。
酶活实验
不适用(吉非替尼D8是分析检测的参考标准,而非基于细胞的疗效研究中的测试药物)。然而,对于未标记的母体药物:将NR6wtEGFR细胞(野生型EGFR过表达)或A431人表皮样癌细胞(EGFR依赖性)接种于96孔板中(5 × 103个细胞/孔),培养基为含1% FBS的DMEM。经一夜血清饥饿后,用不同浓度的吉非替尼(未标记)(0.1-1000 nM)处理细胞60分钟,然后用EGF(10-100 ng/mL)刺激5-15分钟。裂解细胞,并使用磷酸化EGFR特异性试剂盒(R&D Systems)通过ELISA定量EGFR磷酸化(pEGFR,Tyr1068)。计算pEGFR抑制的IC50值。 D8 标记版本不用于细胞检测。
细胞实验
不适用(吉非替尼D8未用于动物疗效研究)。在小鼠药代动力学研究中,为了验证内标,对雌性CD-1小鼠(20-25 g,每个时间点n=3)口服吉非替尼(10-100 mg/kg),吉非替尼制剂溶于0.5%甲基纤维素或DMSO/PEG300/Tween 80中。分别于给药后0.5、1、2、4、8和24小时通过心脏穿刺采集血样。用含有吉非替尼D8作为内标的乙腈沉淀血浆蛋白。将上清液注入LC-MS/MS系统,并根据峰面积比计算吉非替尼浓度。计算药代动力学参数(Cmax、Tmax、AUC、t½)。
动物实验
吉非替尼D8是一种用于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量分析的稳定同位素内标(SIL-IS)。吉非替尼在人体内的口服生物利用度约为50-60%。它与蛋白质高度结合(约90%),主要与白蛋白和α1-酸性糖蛋白结合。吉非替尼主要通过CYP3A4、CYP2D6和CYP2C19代谢为多种代谢物(例如,O-去甲基吉非替尼)。其末端消除半衰期约为48小时,因此可以每日一次给药。D8标记的内标可校正基质效应和萃取损失。
药代性质 (ADME/PK)
吉非替尼D8是研究标准品,不可用于人体。其母体药物吉非替尼(易瑞沙)带有黑框警告,提示可能引起肝毒性和间质性肺病(ILD)(已有死亡病例报告)。常见不良反应(≥20%):腹泻(87%)、皮疹(痤疮样皮疹,75%)、皮肤干燥、恶心、呕吐、厌食和口腔炎。较少见的不良反应:眼毒性(结膜炎、睑缘炎)、脱发和乏力。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
吉非替尼(易瑞沙®)是首个获批用于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的EGFR-TKI(2003年获FDA批准,后限制使用)。吉非替尼D8是一种研究用内标,用于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)生物分析,以进行吉非替尼在药物制剂中的药代动力学(PK)研究、生物等效性试验、治疗药物监测(TDM)和质量控制(QC)。它还可用于同时定量分析吉非替尼及其代谢物。
参考文献

[1]. Differential response to gefitinib of cells expressing normal EGFR and the mutant EGFRvIII. Br J Cancer. 2005 Oct 17;93(8):915-23.

[2]. The tyrosine kinase inhibitor ZD1839 ("Iressa") inhibits HER2-driven signaling and suppresses the growth of HER2-overexpressing tumor cells. Cancer Res. 2001 Oct 1;61(19):7184-8.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C₂₂H₁₆D₈CLFN₄O₃
分子量
454.95
精确质量
454.202
CAS号
857091-32-8
相关CAS号
Gefitinib;184475-35-2
PubChem CID
49849312
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
4.286
tPSA
68.74
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
545
定义原子立体中心数目
0
SMILES
[2H]C1(C(OC(C(N1CCCOC2=C(C=C3C(=C2)C(=NC=N3)NC4=CC(=C(C=C4)F)Cl)OC)([2H])[2H])([2H])[2H])([2H])[2H])[2H]
InChi Key
XGALLCVXEZPNRQ-IHGLQNJRSA-N
InChi Code
InChI=1S/C22H24ClFN4O3/c1-29-20-13-19-16(12-21(20)31-8-2-5-28-6-9-30-10-7-28)22(26-14-25-19)27-15-3-4-18(24)17(23)11-15/h3-4,11-14H,2,5-10H2,1H3,(H,25,26,27)/i6D2,7D2,9D2,10D2
化学名
N-(3-chloro-4-fluorophenyl)-7-methoxy-6-[3-(2,2,3,3,5,5,6,6-octadeuteriomorpholin-4-yl)propoxy]quinazolin-4-amine
别名
Gefitinib D8 Gefitinib D8
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1980 mL 10.9902 mL 21.9804 mL
5 mM 0.4396 mL 2.1980 mL 4.3961 mL
10 mM 0.2198 mL 1.0990 mL 2.1980 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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