| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
LDHA/B
GNE-140 racemate targets lactate dehydrogenase A (LDHA), the enzyme that catalyzes the conversion of pyruvate to lactate in the final step of glycolysis. LDHA is a key glycolytic enzyme that is often overexpressed in aggressive cancers and is considered a marker of the Warburg effect. The racemic mixture contains both (R)- and (S)-enantiomers of GNE-140, which inhibit LDHA activity. LDHA plays a critical role in maintaining NAD+/NADH balance and supporting the high glycolytic flux characteristic of many cancer cells. Inhibition of LDHA by GNE-140 disrupts this metabolic pathway and leads to alterations in cellular energy metabolism. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
“瓦博格效应”是指糖酵解增强导致葡萄糖消耗增加，从而将癌细胞与健康细胞区分开来。乳酸脱氢酶A (LDHA) 被认为是将丙酮酸转化为乳酸的主要酶，它是一种关键的糖酵解酶，也是侵袭性癌症的标志物[1]。GNE-140 外消旋体能有效抑制 LDHA 的酶活性。在 MIA PaCa-2 人胰腺癌细胞中，GNE-140 在抑制 LDHA 后迅速影响整体代谢，但细胞死亡仅在持续抑制 LDHA 两天后才会发生。利用氧化磷酸化 (OXPHOS) 而非糖酵解的胰腺癌细胞系对 GNE-140 具有固有耐药性，但这种耐药性可被 OXPHOS 抑制剂苯乙双胍逆转。获得性耐药性是由AMPK-mTOR-S6K信号通路的激活驱动的，该通路激活会导致氧化磷酸化（OXPHOS）增强，而靶向该通路的抑制剂可以预防这种耐药性。该化合物能有效干扰糖酵解代谢，并诱导敏感癌细胞的代谢重编程。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠体内，(R)-GNE-140（5 mg/kg）表现出较高的生物利用度。在之前的枪模拟实验中，(R)-GNE-140在50至200 mg/kg剂量下显示出更高的暴露量。体内研究表明，GNE-140抑制LDHA可以抑制肿瘤生长。将GNE-140等LDHA抑制剂与靶向线粒体功能或AMPK-S6K信号通路的化合物联合使用，可以拓展LDHA抑制剂的临床应用范围，使其不局限于糖酵解依赖性肿瘤，并降低耐药性的产生。在异种移植模型中，GNE-140的疗效受肿瘤代谢表型的影响，其中OXPHOS依赖性肿瘤表现出内在耐药性。该化合物已被用于研究LDHA在肿瘤生长中的作用，并探索克服糖酵解靶向治疗耐药性的联合治疗策略。包括具体肿瘤生长抑制率在内的详细体内疗效数据已在相关文献中描述。
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| 酶活实验 |
体外药物处理实验。[1]
所有细胞系均来自我们内部的组织培养细胞库（原始来源为ATCC）。细胞系经短串联重复序列（STR）鉴定，并在重新扩增后进行基因分型。细胞培养于添加10%胎牛血清（FBS）的RPMI 1640培养基中。将细胞以最佳接种密度接种于384孔板中，培养基为RPMI 1640，含5% FBS、100 μg/ml青霉素和100 U/ml链霉素。每个细胞系的最佳接种密度均经过优化，以确保实验结束时细胞汇合度达到75-80%。次日，采用6点剂量递增方案，用化合物29处理细胞。72小时后，使用CellTiter-Glo®发光细胞活力检测试剂盒评估细胞活力。采用四参数逻辑曲线拟合计算绝对抑制浓度 (IC50) 值。 GNE-140 外消旋体的体外酶/受体结合（非细胞）测定通常使用生化测定法测量 LDHA 酶活性。将重组人 LDHA 酶与不同浓度的 GNE-140 外消旋体（通常为纳摩尔至微摩尔浓度）在底物丙酮酸和辅因子 NADH 存在下孵育。通过测量 340 nm 处吸光度的降低来监测酶促反应，因为丙酮酸转化为乳酸的过程中 NADH 被消耗。通过将剂量反应曲线拟合到抑制数据来确定 IC50 值。将化合物溶解于 DMSO 中，并用测定缓冲液稀释至所需最终浓度，所有孔中的 DMSO 浓度保持恒定。每次测定均包含适当的阳性对照（已知的 LDHA 抑制剂）和阴性对照（DMSO 溶剂）。 |
| 细胞实验 |
GNE-140 处理可模拟 LS174T 和 B16 细胞系中 LDHA/B 双基因敲除的表型[2]。最近，Boudreau 等人证实，特异性 LDHA 和 LDHB 抑制剂 GNE-140 能够抑制高糖酵解胰腺癌细胞系（如 MiaPaca2）的生长。因此，我们很想知道这种抑制剂是否能够迅速重新激活氧化磷酸化 (OXPHOS)，并维持野生型 (WT) LS174T 和 B16 细胞系的活力和生长。我们用不同浓度的 GNE-140 处理 WT 和 LDHA/B 双敲除 (LDHA/B-DKO) 细胞，结果表明，已知可抑制 LDHA 和 LDHB 活性的 10 μM 浓度可降低 WT 细胞的生长，但对本文报道的两种 LDHA/B-DKO 细胞系没有影响。这项为期 9 至 12 天的长期实验证明，在所用浓度下，该化合物没有脱靶效应。此外，我们利用Seahorse生物分析仪分析了GNE-140短期处理野生型细胞的代谢后果。如图8 E-H所示，10 μM GNE-140处理1小时即可模拟LDHA/B-DKO细胞的表型，表现为糖酵解抑制和氧化磷酸化（OXPHOS）重新激活。因此，LDHA/B-DKO细胞的生长表型并非由基因敲除两步过程中的长期生长选择所致。这一基于遗传学和LDHA及LDHB特异性药理学敲除的发现，有力地证明了在常氧条件下，Warburg效应对于体外肿瘤生长并非必需。
GNE-140外消旋体的体外细胞实验采用人胰腺癌细胞系，例如MIA PaCa-2，这些细胞系具有高度糖酵解活性，且对LDHA抑制敏感。细胞在添加了胎牛血清和抗生素的适宜培养基中培养。处理前，将细胞接种于多孔板中，并使其过夜贴壁。次日，用不同浓度的GNE-140外消旋体（通常为0.1-100 μM）或溶剂对照（DMSO）处理细胞，处理时间点分别为24、48或72小时。采用MTT、CellTiter-Glo或Seahorse细胞外代谢通量分析等方法评估细胞代谢活性，以测量耗氧率（OCR）和细胞外酸化率（ECAR）。定量分析细胞活力和增殖情况，并评估LDHA抑制对糖酵解和氧化磷酸化（OXPHOS）的影响。 |
| 动物实验 |
小鼠药代动力学研究[1] 本研究评估了化合物29 ((R)-GNE-140)在雌性CD-1小鼠（n=3）中单次静脉注射（IV）1.0 mg/kg和口服（PO）5 mg/kg的溶菌混悬液后的药代动力学。静脉注射所用溶剂为10/50/40 EtOH/PEG400/50 mM柠檬酸盐pH 3 (v/v, 10/50/40)，口服所用溶剂为0.5%甲基纤维素：0.2%吐温水溶液（MCT）。静脉注射组分别于给药后0.033、0.25、1、2、4和6小时采集血样。口服组分别于给药后0.25、0.5、1、2、4和6小时采集血样。在50、100和200 mg/kg的高剂量口服药代动力学研究中，分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6和8小时采集血样。血样采集后29分钟内离心，并收集血浆。血浆样本储存在约-70°C，直至采用液相色谱/串联质谱（LCMS/MS）法分析化合物浓度。药代动力学参数采用WinNonlin软件的非房室模型方法测定。GNE-140外消旋体的体内动物实验通常使用携带人源肿瘤异种移植瘤的免疫缺陷小鼠进行。将MIA PaCa-2人胰腺癌细胞或其他癌细胞系皮下植入裸鼠或SCID小鼠的侧腹部。当肿瘤达到预定大小（例如100-200 mm³）时，将动物随机分为治疗组和对照组。 GNE-140可通过灌胃或腹腔注射给药，剂量和给药方案各不相同。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积，并监测体重以评估耐受性。研究结束时，收集肿瘤组织用于分析LDHA活性、代谢标志物和信号通路蛋白（例如AMPK、mTOR、S6K磷酸化）。此外，还进行了与苯乙双胍或AMPK-S6K通路抑制剂的联合研究，以评估其协同作用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
公开资料中缺乏关于GNE-140外消旋体的详细药代动力学(PK)参数的充分记载。作为一种分子量为499.04的小分子抑制剂，该化合物预计具有中等的口服生物利用度和良好的组织分布。GNE-140外消旋体可溶于DMSO和其他有机溶剂，便于制剂配制。体内给药时，该化合物通常配制于PEG300、Tween 80或羧甲基纤维素(CMC)等载体中，以确保其具有足够的溶解度和稳定性。为保证长期稳定性，该化合物应储存于-20°C的干燥避光环境中。包括半衰期、清除率、分布容积和最大浓度(Cmax)在内的详细PK参数需要从原始文献中进一步研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
公开资料中关于GNE-140外消旋体的全面毒理学数据并不多见。作为一种研究级化合物，GNE-140外消旋体仅供实验室研究用途，尚未获准用于人体治疗。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程，包括使用适当的个人防护装备并在通风良好的区域工作。动物研究表明，在所测试的剂量范围内，GNE-140总体耐受性良好，初步研究未观察到明显的毒性。然而，目前的检索结果中没有全面的毒理学分析（例如，LD50、最大耐受剂量、器官特异性毒性），需要查阅原始文献或安全数据表。
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| 参考文献 |
[1]. ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901.
[2]. Double genetic disruption of lactate dehydrogenases A and B is required to ablate the “Warburg effect” restricting tumor growth to oxidative metabolism. J Biol Chem. 2018 Oct 12; 293(41): 15947–15961. [3]. Nat Chem Biol.2016 Oct;12(10):779-86; |
| 其他信息 |
一系列三取代羟基内酰胺被鉴定为人类乳酸脱氢酶A的强效酶促和细胞抑制剂。利用基于结构的设计和物理性质优化，发现了几种在MiaPaca2细胞系中对乳酸具有IC50值小于10 μM的抑制剂。经过对该系列化合物的优化，获得了化合物29，它是一种强效的细胞活性分子（MiaPaca2 IC50 = 0.67 μM），并且在小鼠口服给药后也显示出良好的暴露量。[1]
GNE-140外消旋体是一种用于研究LDHA抑制和肿瘤代谢的研究化合物。该化合物已被用于证明LDHA抑制会破坏糖酵解代谢并诱导癌细胞的代谢重编程。发现依赖氧化磷酸化（OXPHOS）的癌细胞对GNE-140具有内在耐药性，而这种耐药性可通过将LDHA抑制剂与OXPHOS抑制剂或AMPK-S6K通路抑制剂联合使用来克服，这一发现对糖酵解靶向疗法的临床开发具有重要意义。GNE-140外消旋体目前尚未进入临床试验，也未获准用于治疗；它仍然是一种用于临床前癌症代谢研究的试验性化合物。该化合物可从多家化学品供应商处获得，用于研究用途。 |
| 分子式 |
C25H23CLN2O3S2
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|---|---|
| 分子量 |
499.044722795486
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| 精确质量 |
498.083
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| 元素分析 |
C, 60.17; H, 4.65; Cl, 7.10; N, 5.61; O, 9.62; S, 12.85
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| CAS号 |
1809794-70-4
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| 相关CAS号 |
(R)-GNE-140;2003234-63-5;(S)-GNE-140;2003234-64-6
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| PubChem CID |
118384502
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.8
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| tPSA |
115Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
739
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1COCCN1C2=CC=C(C=C2)C3(CC(=O)C(C(=O)N3)SC4=CC=CC=C4Cl)C5=CSC=C5
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| InChi Key |
SUFXXEIVBZJOAP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23ClN2O3S2/c26-20-3-1-2-4-22(20)33-23-21(29)15-25(27-24(23)30,18-9-14-32-16-18)17-5-7-19(8-6-17)28-10-12-31-13-11-28/h1-9,14,16,29H,10-13,15H2,(H,27,30)
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| 化学名 |
3-((2-Chlorophenyl)thio)-4-hydroxy-6-(4-morpholinophenyl)-6-(thiophen-3-yl)-5,6-dihydropyridin-2(1H)-one
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| 别名 |
GNE-140 racemic; GNE-140; GNE-140 racemic; 1809794-70-4; CHEMBL4436150; 3-((2-Chlorophenyl)thio)-4-hydroxy-6-(4-morpholinophenyl)-6-(thiophen-3-yl)-5,6-dihydropyridin-2(1H)-one; 5-(2-chlorophenyl)sulfanyl-4-hydroxy-2-(4-morpholin-4-ylphenyl)-2-thiophen-3-yl-1,3-dihydropyridin-6-one; 3-[(2-chlorophenyl)sulfanyl]-4-hydroxy-6-[4-(morpholin-4-yl)phenyl]-6-(thiophen-3-yl)-1,2,5,6-tetrahydropyridin-2-one; R-GNE-140; (2~{r})-5-(2-Chlorophenyl)sulfanyl-2-(4-Morpholin-4-Ylphenyl)-4-Oxidanyl-2-Thiophen-3-Yl-1,3-Dihydropyridin-6-One; GNE 140; GNE140.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~100.19 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0038 mL | 10.0192 mL | 20.0385 mL | |
| 5 mM | 0.4008 mL | 2.0038 mL | 4.0077 mL | |
| 10 mM | 0.2004 mL | 1.0019 mL | 2.0038 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Overlay of previously disclosed X-ray structures of LDHA/diketone-containing inhibitor complexes 4QO7 (cyan) and 4QO8 (white).Hydrogen bonds from 4QO7 are shown as yellow dashed lines.ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901. |
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 Compound9(cyan) cocrystallized with LDHA (white) [PDB: 5IXS]. The NADH cofactor is shown in green sticks, the crystallographic water as a red sphere, and hydrogen bonds are yellow dashed lines.ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901. |
 Overlay of the crystal structures29(white) [PDB: 4ZVV] and30(cyan) [PDB: 5IXY] bound to LDHA. Hydrogen bonds are shown as yellow dashed lines.ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901. |
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