| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Lactate dehydrogenase A (LDHA)
S-GNE-140 targets lactate dehydrogenase A (LDHA), the same enzyme targeted by the racemic GNE-140 mixture and its R-enantiomer. However, S-GNE-140 is the less active enantiomer, exhibiting significantly lower inhibitory activity against LDHA compared to the R-enantiomer. The compound binds to the active site of human LDH isozymes, but its enantiomeric configuration reduces its binding affinity and inhibitory potency. S-GNE-140 is therefore used as a control compound to distinguish enantiomer-specific effects of LDH inhibition from non-specific effects in cellular and biochemical assays. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
由于糖酵解增强，葡萄糖消耗增加，这种现象被称为“瓦博格效应”，它使癌细胞与健康细胞区分开来。乳酸脱氢酶A (LDHA) 是一种与侵袭性癌症密切相关的重要糖酵解酶，它也被认为是丙酮酸转化为乳酸过程中的主要酶。与活性R-对映体相比，S-GNE-140 对 LDHA 的体外抑制活性显著降低。虽然 S-GNE-140 的确切 IC50 值不像活性对映体那样被广泛报道，但已确定 S-GNE-140 是 GNE-140 的活性较低的对映体。该化合物仍保留一定的 LDHA 抑制能力，但其效力降低，因此适合作为研究 LDHA 抑制代谢效应实验中的阴性对照。在 MIA PaCa-2 人类胰腺癌细胞和其他细胞系中，使用 S-GNE-140 来控制脱靶效应，并验证观察到的代谢变化是否特指活性对映体对 LDHA 的抑制。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠体内，(R)-GNE-140（5 mg/kg）表现出较高的生物利用度。在之前的枪模拟实验中，(R)-GNE-140在50至200 mg/kg剂量下显示出更高的暴露量。
S-GNE-140在体内研究中用作对照化合物，以区分LDHA抑制的特异性效应和非特异性效应。在肿瘤异种移植模型中，S-GNE-140与活性R-对映体或外消旋混合物一起给药，以验证观察到的抗肿瘤作用是否特异性地归因于LDHA抑制。该化合物还用于研究LDHA在肿瘤生长中的作用，并作为低活性对照。S-GNE-140的给药途径与活性对映体相似（灌胃或腹腔注射），并将其对肿瘤生长、代谢和信号通路的影响与活性化合物进行比较，以确定靶点特异性。 |
| 酶活实验 |
体外药物处理实验。[1] 所有细胞系均来自我们内部的组织培养细胞库（原始来源为ATCC）。细胞系经短串联重复序列（STR）鉴定，并在重新扩增后进行基因分型。细胞培养于添加10%胎牛血清（FBS）的RPMI 1640培养基中。将细胞以最佳接种密度接种于384孔板中，培养基为RPMI 1640，含5% FBS、100 μg/ml青霉素和100 U/ml链霉素。每个细胞系的最佳接种密度均经过优化，以确保实验结束时细胞汇合度达到75-80%。次日，采用6点剂量递增方案，用化合物29处理细胞。72小时后，使用CellTiter-Glo®发光细胞活力检测试剂盒评估细胞活力。采用四参数逻辑曲线拟合计算绝对抑制浓度 (IC) 值。
S-GNE-140 的体外酶/受体结合（非细胞）测定采用与外消旋混合物和 R-对映体相同的生化 LDHA 活性测定方法。将重组人 LDHA 酶与不同浓度的 S-GNE-140（通常为纳摩尔至微摩尔浓度）在丙酮酸底物和 NADH 辅因子存在下孵育。通过测量 340 nm 处吸光度的降低来监测酶促反应，因为 NADH 正在被消耗。测定 S-GNE-140 的 IC50 值，并与活性 R-对映体的 IC50 值进行比较，以确认其效力较低。将该化合物溶解于 DMSO 中，并用测定缓冲液稀释至所需最终浓度，所有孔中的 DMSO 浓度保持恒定。每次检测运行中都包括阳性对照（活性 LDHA 抑制剂）和阴性对照（DMSO 溶剂）。 |
| 细胞实验 |
GNE-140 处理可模拟 LS174T 和 B16 细胞系中 LDHA/B 双基因敲除的表型[2]。最近，Boudreau 等人证实，特异性 LDHA 和 LDHB 抑制剂 GNE-140 能够抑制高糖酵解胰腺癌细胞系（如 MiaPaca2）的生长。因此，我们很想知道这种抑制剂是否能够迅速重新激活氧化磷酸化 (OXPHOS)，并维持野生型 (WT) LS174T 和 B16 细胞系的活力和生长。我们用不同浓度的 GNE-140 处理 WT 和 LDHA/B 双敲除 (LDHA/B-DKO) 细胞，结果表明，已知可抑制 LDHA 和 LDHB 活性的 10 μM 浓度可降低 WT 细胞的生长，但对本文报道的两种 LDHA/B-DKO 细胞系没有影响。这项为期 9 至 12 天的长期实验证明，在所用浓度下，该化合物没有脱靶效应。此外，我们利用Seahorse生物分析仪分析了GNE-140短期处理野生型细胞的代谢后果。如图8 E-H所示，10 μM GNE-140处理1小时即可模拟LDHA/B-DKO细胞的表型，表现为糖酵解抑制和氧化磷酸化（OXPHOS）重新激活。因此，LDHA/B-DKO细胞的生长表型并非由基因敲除两步过程中的长期生长选择所致。这一基于遗传学和LDHA及LDHB特异性药理学敲除的发现，有力地证明在常氧条件下，Warburg效应对于体外肿瘤生长并非必需。
S-GNE-140的体外细胞实验采用与活性对映体相同的细胞系和实验方案，通常使用MIA PaCa-2人胰腺癌细胞。将细胞培养于适宜的培养基中，并用不同浓度的 S-GNE-140 或溶剂对照（DMSO）处理特定时间点。采用 MTT、CellTiter-Glo 或 Seahorse 细胞外代谢通量分析等方法评估细胞代谢活性。将 S-GNE-140 对细胞活力、糖酵解和氧化磷酸化的影响与活性对映体的影响进行比较，以确认活性化合物引起的代谢变化是特异性地由 LDHA 抑制所致。S-GNE-140 作为关键对照，用于排除化合物骨架的非特异性效应。 |
| 动物实验 |
小鼠药代动力学研究[1] 本研究评估了化合物29 ((R)-GNE-140)在雌性CD-1小鼠（n=3）中单次静脉注射（IV）1.0 mg/kg和口服（PO）5 mg/kg的溶菌混悬液后的药代动力学。静脉注射所用溶剂为10/50/40 EtOH/PEG400/50 mM柠檬酸盐pH 3 (v/v, 10/50/40)，口服所用溶剂为0.5%甲基纤维素：0.2%吐温水溶液（MCT）。静脉注射组分别于给药后0.033、0.25、1、2、4和6小时采集血样。口服组分别于给药后0.25、0.5、1、2、4和6小时采集血样。在50、100和200 mg/kg的高剂量口服药代动力学研究中，分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6和8小时采集血样。血样采集后29分钟内离心，并收集血浆。血浆样本储存在约-70°C，直至采用液相色谱/串联质谱（LCMS/MS）法分析化合物浓度。药代动力学参数采用WinNonlin软件的非房室模型方法测定。
S-GNE-140的体内动物实验与使用活性R-对映体或外消旋混合物的研究平行进行。携带人源肿瘤异种移植瘤（例如MIA PaCa-2胰腺肿瘤）的免疫缺陷小鼠被随机分为治疗组，分别接受S-GNE-140、活性对映体或载体对照。 S-GNE-140 通过灌胃或腹腔注射给药，剂量与活性化合物的剂量相当。每周测量两次肿瘤体积，并监测体重。在研究终点，收集肿瘤组织用于分析 LDHA 活性、代谢标志物和信号通路蛋白。与活性对映体相比，S-GNE-140 缺乏显著的抗肿瘤疗效，证实观察到的效应是特异性地由 LDHA 抑制引起的。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
公开资料中缺乏关于S-GNE-140详细药代动力学(PK)参数的详细记录。作为GNE-140活性较低的对映异构体，S-GNE-140预计具有与外消旋混合物和R-对映异构体相似的理化性质，包括分子量499.04和中等亲脂性。该化合物可溶于DMSO和其他有机溶剂，用于制剂配制。体内给药时，S-GNE-140通常配制成PEG300、Tween 80或羧甲基纤维素(CMC)等载体。为保证长期稳定性，该化合物应储存在-20°C的干燥避光环境中。目前的检索结果未提供包括半衰期、清除率和生物利用度在内的详细PK参数，需要查阅原始文献。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
公开资料中缺乏关于S-GNE-140的全面毒理学数据。作为一种研究级化合物，S-GNE-140仅供实验室研究用途，尚未获准用于人体治疗。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程。在动物研究中，预计S-GNE-140在对照实验常用剂量下具有良好的耐受性，但目前的检索结果未能提供全面的毒理学分析数据（例如，LD50、最大耐受剂量）。处理该化合物时应使用适当的个人防护装备，并遵守机构的化学研究安全指南。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
一系列三取代羟基内酰胺被鉴定为人类乳酸脱氢酶A的强效酶促和细胞抑制剂。利用基于结构的设计和物理性质优化，发现了几种在MiaPaca2细胞系中对乳酸具有IC50值小于10 μM的抑制剂。经过对该系列化合物的优化，获得了化合物29，它是一种强效的细胞活性分子（MiaPaca2 IC50 = 0.67 μM），并且在小鼠口服给药后也显示出良好的暴露量。[1]
S-GNE-140是一种研究化合物，主要用作LDHA抑制和肿瘤代谢研究中的阴性对照或低活性对照。它是LDHA抑制剂GNE-140的S-对映体，与R-对映体相比，其抑制活性显著降低。该化合物对于验证GNE-140观察到的代谢和抗肿瘤作用是否特异性地归因于LDHA抑制而非脱靶效应具有重要价值。 S-GNE-140目前尚未进入临床试验阶段，也未获准用于治疗用途；它仍是一种用于临床前研究的试验性化合物。该化合物可从多家化学品供应商处获得，用于研究目的。其主要用途是进行对映体选择性研究，以及作为糖酵解靶向抗癌研究中的对照。 |
| 分子式 |
C25H23CLN2O3S2
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|---|---|
| 分子量 |
499.044722795486
|
| 精确质量 |
498.083
|
| 元素分析 |
C, 60.17; H, 4.65; Cl, 7.10; N, 5.61; O, 9.62; S, 12.85
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| CAS号 |
2003234-64-6
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| 相关CAS号 |
GNE-140 racemate;1802977-61-2;(R)-GNE-140;2003234-63-5
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| PubChem CID |
131801110
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| 外观&性状 |
White to gray solid
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| LogP |
4.8
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| tPSA |
115Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
739
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C1COCCN1C2=CC=C(C=C2)[C@@]3(CC(=C(C(=O)N3)SC4=CC=CC=C4Cl)O)C5=CSC=C5
|
| InChi Key |
SUFXXEIVBZJOAP-RUZDIDTESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23ClN2O3S2/c26-20-3-1-2-4-22(20)33-23-21(29)15-25(27-24(23)30,18-9-14-32-16-18)17-5-7-19(8-6-17)28-10-12-31-13-11-28/h1-9,14,16,29H,10-13,15H2,(H,27,30)/t25-/m1/s1
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| 化学名 |
(S)-3-((2-Chlorophenyl)thio)-4-hydroxy-6-(4-morpholinophenyl)-6-(thiophen-3-yl)-5,6-dihydropyridin-2(1H)-one
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| 别名 |
S-GNE-140; (S)-GNE-140; (S)-GNE-140; 2003234-64-6; CHEMBL4589484; (2S)-5-(2-Chlorophenyl)sulfanyl-4-hydroxy-2-(4-morpholin-4-ylphenyl)-2-thiophen-3-yl-1,3-dihydropyridin-6-one; GNE 140; GNE-140.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~14.43 mg/mL (~28.92 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0038 mL | 10.0192 mL | 20.0385 mL | |
| 5 mM | 0.4008 mL | 2.0038 mL | 4.0077 mL | |
| 10 mM | 0.2004 mL | 1.0019 mL | 2.0038 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Overlay of previously disclosed X-ray structures of LDHA/diketone-containing inhibitor complexes 4QO7 (cyan) and 4QO8 (white).Hydrogen bonds from 4QO7 are shown as yellow dashed lines.ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901. |
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 Compound9(cyan) cocrystallized with LDHA (white) [PDB: 5IXS]. The NADH cofactor is shown in green sticks, the crystallographic water as a red sphere, and hydrogen bonds are yellow dashed lines.ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901. |
 Overlay of the crystal structures29(white) [PDB: 4ZVV] and30(cyan) [PDB: 5IXY] bound to LDHA. Hydrogen bonds are shown as yellow dashed lines.ACS Med Chem Lett.2016 Aug 26;7(10):896-901. |
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