| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HIF-PHD
HIF prolyl hydroxylase (PHD) enzymes (PHD1, PHD2, PHD3). GSK360A is an orally active HIF-PHD inhibitor. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK360A 是一种强效（纳摩尔级）的 HIF-PHD 抑制剂（PHD1>PHD2=PHD3），能够激活多种细胞类型（包括新生大鼠心室肌细胞和 H9C2 细胞）中的 HIF-1α 通路。[1] GSK360A 可增加促红细胞生成素 (EPO)、血红素加氧酶-1 (HO1) 和葡萄糖转运蛋白 1 (Glut1) 的转录水平，这些基因均为 HIF1α 的靶基因，并促进 OGD 后神经元和少突胶质细胞的存活。[2] GSK360A 以 2-OG 竞争性方式抑制所有三种 HIF-PHD 亚型（PHD1、PHD2 和 PHD3），IC50 值分别为 10 nM、100 nM 和 126 nM。 GSK360A 对 PHD2 的抑制 IC50 值为 100 nM，而罗沙司他 (FG-4592) 对同一酶的抑制 IC50 值则显著更高，为 591.4 nM。GSK360A 通过稳定细胞内 HIF-1 并上调 HIF-1α 靶基因的转录，在常氧条件下促进心肌细胞线粒体有氧糖酵解。GSK360A 可激活 HIF-1α 通路。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在已建立的心力衰竭模型中，GSK360A（30 mg/kg，灌胃）可改善死亡率、血管生成和长期心室功能[1]。体内研究表明，在已建立的心室功能障碍模型中，GSK360A（30 mg/kg，灌胃）可改善长期心室功能、重塑和血管生成。它还能保护心肌梗死（MI）后衰竭的心脏。GSK360A在血浆（7734 ng/ml）、肾脏（血浆浓度的45-52%）和脑组织（血浆浓度的1-4%）中均能快速达到高浓度，并可使肾脏EPO mRNA水平升高80倍，脑组织VEGF mRNA水平升高2倍。该化合物具有口服活性。研究人员进行了药代动力学和药效学研究，包括在口服30 mg/kg GSK360A后5小时和24小时测定血浆、肾脏和脑组织中的GSK360A浓度。 GSK360A 可减轻中风后脑损伤以及感觉、运动和认知行为缺陷。
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| 酶活实验 |
白细胞计数和血浆EPO测定[2]
从大鼠采集血液，并转移至含有EDTA的Eppendorf管中。使用Hemavet 1500血液分析仪测定新鲜血液中的白细胞计数。血浆制备方法为：将血液以1000 g离心15分钟，并将血浆上清液储存于-80℃冰箱中备用。血浆EPO采用Luminex微珠多重ELISA法测定，并使用Bio-Plex Manager软件进行定量，具体方法如前所述。[2] 使用重组PHD亚型（PHD1、PHD2、PHD3）和底物（例如HIF-1α肽）进行体外酶活性测定，以评估HIF-PHD抑制情况。2-酮戊二酸的消耗量可通过偶联酶法测定，或通过检测琥珀酸或CO2的释放量来测定。 HIF-α羟基化可通过质谱或抗体法检测羟基化的HIF-1α来测定。IC50值通过非线性回归分析，根据剂量反应曲线计算得出。选择性通过针对相关的2-OG依赖性双加氧酶进行测试来评估。 |
| 细胞实验 |
氧糖剥夺 (OGD) 模型和细胞活力检测[2]
从胚胎大鼠脑中分离培养第 17 天的原代皮层神经元，并从出生后 0-2 天的新生大鼠脑中分离培养少突胶质细胞 (OL)，通过细胞特异性神经元 (MAP2) 或少突胶质细胞 (Rip) 标记物确认细胞纯度 (>85%) (Sun et al., 2010)。将体外培养 10 天 (DIV) 的神经元和 5-DIV 的少突胶质细胞在无葡萄糖脱氧培养基中用 GSK360A (3 和 30μM) 预处理 30 分钟，然后转移至预先用 5% CO2 和 95% N2 混合气体通入 37°C 的厌氧培养箱中，使氧气浓度达到 1% 2 小时。将培养基更换为常规细胞培养基，并放回5% CO2培养箱中。使用细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 检测神经元和少突胶质细胞 (OL) 的存活率，每个细胞均进行至少三次独立实验。 在心肌细胞、内皮细胞或其他HIF反应性细胞中评估细胞活性。用不同浓度（通常为0.001-100 μM）的GSK360A处理细胞，处理时间适当（HIF稳定化4-24小时，基因表达24-72小时）。通过Western blot检测HIF-1α蛋白水平（以内参进行标准化）。通过qRT-PCR检测HIF靶基因（VEGF、GLUT1、EPO、PDK1、BNIP3）的表达。使用Seahorse分析仪测量耗氧率 (OCR) 和细胞外酸化率 (ECAR) 来评估线粒体有氧糖酵解。可进行使用[U-13C]-葡萄糖或[U-13C]-谷氨酰胺的代谢通量分析。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性Lewis大鼠心室功能障碍模型[1]
剂量：30 mg/kg 给药途径：po（灌胃） 实验结果：雄性大鼠循环中促红细胞生成素和血红蛋白水平以及心脏和骨骼肌中的血氧饱和度增加。酶-1表达增加。 GSK360A通过脑室内（ICV，12μg/5μg/10 g体重）、鼻内（IN，30或60μg/10 g）或腹腔内（IP，100~500μg/10 g）给药，如前所述（Bao等，2010；Yang等，2013a； 2013b；2013c；Zhou 等，2017）。将 GSK360A 粉末溶解于 30% 羟丙基-β-环糊精 (HBC) 溶液中，最终浓度为 2.5 μg/μg。在缺氧缺血 (HI) 后 30 分钟进行脑室内 (ICV) 或腹腔 (IP) 给药，并在 HI 后 30 分钟和 60 分钟分别进行两次脑内 (IN-GSK360A) 给药。脑室内注射 5 μg 生理盐水或 GSK360A，注射速度为 1 μg/min，使用 Hamilton 注射器，注射部位为右半球，方法如前所述 (Yang 等，2009)。立体定位坐标为：λ 点前 2.0 mm，右侧 1.5 mm，脑表面以下 2.0 mm。采用Rice-Vannucci模型建立新生儿缺氧缺血（HI）模型，实验对象为7日龄（P7）Wistar大鼠，具体方法见文献（Yang et al., 2009）。简而言之，将雌雄幼鼠均用2%异氟烷混合压缩空气麻醉，然后结扎右侧颈总动脉。1小时恢复期后，将幼鼠置于浸没于37℃水浴中的玻璃容器内，暴露于10%氧气（90%氮气平衡）90分钟。缺氧诱导后，将幼鼠放回母鼠身边进行恢复。C57BL/6小鼠购自Charles River Laboratories，用于HIF1α免疫印迹和组织染色实验（图1、图2C-E、图5A）。 ODD-荧光素酶（HIF1α-Luc）小鼠购自杰克逊实验室（库存号：006206），取其脑组织，使用双荧光素酶®报告基因检测系统进行荧光素酶活性测定。采集P7大鼠的全血，使用Hemavet 1500血液分析仪（1500 R系列）进行全血细胞计数。所有实验程序均经机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准，并按照美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》进行。实验的进行和报告均符合ARRIVE指南[2]。体内疗效研究采用心肌梗死（MI）、心力衰竭和卒中动物模型。GSK360A以30 mg/kg的剂量口服给药。通过超声心动图（射血分数、短轴缩短率）评估心室功能。通过测量梗死面积、心室壁厚度和纤维化程度（Masson三色染色）来评估心脏重塑。血管生成情况通过CD31免疫组化进行评估。药效学标志物，包括HIF-1α稳定性、EPO mRNA（肾脏）、VEGF mRNA（脑）和其他HIF靶基因，通过qRT-PCR或Western blot在组织样本中进行检测。药代动力学和器官分布通过LC-MS/MS测定血浆、肾脏和脑组织中化合物的浓度来确定。脑损伤和行为缺陷在卒中模型中进行评估。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
GSK360A 的分子式为 C20H17F3N4O3，分子量为 418.37 g/mol。CAS 编号：931399-19-8。它是一种口服有效的 HIF-PHD 抑制剂。纯度：通常经 HPLC 测定 ≥98%。该化合物可溶于 DMSO，为长期稳定保存，应避光防潮，并置于 -20°C 保存。详细的药代动力学参数，包括半衰期、口服生物利用度、分布容积和血浆蛋白结合率，可从相关文献中获取。GSK360A 在血浆中可迅速达到高浓度（7734 ng/ml）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
GSK360A 的安全数据表明，它是一种仅供实验室使用的研究化合物。作为一种 HIF-PHD 抑制剂，它可能对红细胞生成、血管生成和代谢产生影响。包括急性毒性、器官毒性、遗传毒性和生殖毒性在内的具体毒理学特征尚未得到广泛报道。操作过程中应遵循标准的实验室安全规范，包括使用个人防护装备和保持良好的通风。该化合物仅供研究使用，未经相关监管机构批准，不得用于人体治疗。有关详细的安全信息，请参阅材料安全数据表 (MSDS)。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
缺氧诱导因子-1α (HIF1α) 是细胞适应缺氧和氧化应激的关键调节因子。脯氨酰-4-羟化酶 (P4H) 抑制剂的最新进展为稳定 HIF1α 提供了强有力的临床工具。然而，既往研究尚未明确 HIF1α 是诱导还是抵抗新生儿缺氧缺血性 (HI) 脑损伤。我们假设全身性和脑靶向性 HIF1α 稳定化可能产生不同的效果。为了验证这一假设，我们比较了强效 P4H 抑制剂 GSK360A 在体外氧糖剥夺 (OGD) 模型和体内新生儿 HI 模型中的作用，分别采用脑室内 (ICV)、腹腔内 (IP) 和鼻内 (IN) 给药途径。我们发现，GSK360A 可提高促红细胞生成素 (EPO)、血红素加氧酶-1 (HO1) 和葡萄糖转运蛋白 1 (Glut1) 的转录水平，这些基因均为 HIF1α 的靶基因，并能促进缺氧-葡萄糖缺乏 (OGD) 后神经元和少突胶质细胞的存活。新生儿缺氧缺血 (HI) 损伤可使同侧半球的 HIF1α 水平稳定长达 24 小时。HI 后脑室内 (ICV) 或鼻内 (IN) 给药 GSK360A 可提高 HIF1α 靶基因的转录水平并减轻脑损伤。相反，腹腔注射GSK360A未能减轻缺氧缺血性脑损伤，但高剂量注射反而增加了死亡风险，这可能与肾脏和血浆中促红细胞生成素（EPO）水平升高、白细胞增多以及脑内血管内皮生长因子（VEGF）mRNA高表达有关。这些结果表明，靶向脑的HIF1α稳定化可能是治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤的潜在方法，而全身性脯氨酰4-羟化酶（PHD）抑制可能引起不良反应。[2]
背景：缺氧诱导因子（HIF）是一类转录因子，其活性受HIF-脯氨酰4-羟化酶（PHD）调控，以响应氧张力的变化。HIF一旦被激活，便在血管生成、红细胞生成、增殖、细胞存活、炎症和能量代谢中发挥重要作用。我们假设新型口服活性HIF-PHD抑制剂GSK360A能够促进局部和全身HIF-1α信号传导，并在心肌梗死（MI）后保护衰竭的心脏。[1] 方法和结果：GSK360A是一种强效（纳摩尔级）HIF-PHD（PHD1>PHD2=PHD3）抑制剂，可激活多种细胞类型中的HIF-1α通路，包括新生大鼠心室肌细胞和H9C2细胞。雄性大鼠口服GSK360A（30 mg/kg/d）后，循环中促红细胞生成素和血红蛋白水平持续升高，心脏和骨骼肌中血红素加氧酶-1的表达也增加。在左前降支冠状动脉结扎诱导的收缩功能障碍性心力衰竭大鼠模型中，连续28天使用GSK360A治疗可预防射血分数进行性下降、心室扩张和肺重量增加，且疗效可持续长达3个月，而接受载体治疗的动物则未观察到这些症状。此外，GSK360A治疗组梗死周围区域的微血管密度显著增加（>2倍）。该治疗耐受性良好（GSK360A组的生存率为89%，安慰剂组为82%）。[1] 结论：在已建立的心室功能障碍模型中，心肌梗死后长期使用选择性HIF PHD抑制剂（GSK360A）治疗，可通过稳定HIF-1α信号通路发挥全身和局部作用，改善长期心室功能、重塑和血管生成。这些结果表明，HIF-PHD抑制剂可能适用于治疗心肌梗死后重塑和心力衰竭。[1] GSK360A是一种用于研究HIF-PHD生物学和心脏保护作用的研究工具化合物，尚未获准用于临床。该化合物已被研究其通过激活HIF-1α通路来保护心肌梗死后衰竭心脏的潜力。GSK360A还可以减轻卒中后脑损伤，并改善感觉、运动和认知行为缺陷。参考文献：GSK360A (GSK1120360A) 是一种口服有效的HIF-脯氨酰4-羟化酶 (HIF-PHD) 抑制剂，它以2-酮戊二酸竞争性方式高效靶向所有三种HIF-PHD亚型（IC50为10-120 nM）。该化合物能够稳定 HIF-1α 并上调 HIF 靶基因，使其成为研究 HIF 信号在缺血、心脏保护和神经保护中的作用的宝贵工具。 |
| 分子式 |
C17H17FN2O5
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|---|---|
| 分子量 |
348.3304
|
| 精确质量 |
348.112
|
| 元素分析 |
C, 58.62; H, 4.92; F, 5.45; N, 8.04; O, 22.97
|
| CAS号 |
931399-19-8
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| PubChem CID |
54685147
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| 外观&性状 |
Typically exists as white to off-white solids at room temperature
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| LogP |
2.035
|
| tPSA |
112.12
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
616
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1CC1CCN2C3=C(C=C(C=C3)F)C(=C(C2=O)C(=O)NCC(=O)O)O
|
| InChi Key |
TYHRZQVUPPODPT-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C17H17FN2O5/c18-10-3-4-12-11(7-10)15(23)14(16(24)19-8-13(21)22)17(25)20(12)6-5-9-1-2-9/h3-4,7,9,23H,1-2,5-6,8H2,(H,19,24)(H,21,22)
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| 化学名 |
{[1-(2-Cyclopropyl-ethyl)-6-fluoro-4-hydroxy-2-oxo-1,2-dihydro-quinoline-3-carbonyl]-amino}-acetic acid
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| 别名 |
GSK-360A; GSK 360A; GSK360A
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8708 mL | 14.3542 mL | 28.7084 mL | |
| 5 mM | 0.5742 mL | 2.8708 mL | 5.7417 mL | |
| 10 mM | 0.2871 mL | 1.4354 mL | 2.8708 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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