IDX 184

HCV polymerase (IC50 = 0.31 μM; Ki = 52.3 nM)
IDX184 targets the HCV NS5B polymerase, which is a key enzyme in the viral replication complex responsible for the synthesis of viral RNA. The compound acts as a nucleoside polymerase inhibitor. The resistance to IDX184 is driven by mutations in the HCV polymerase, which hinder the drug's binding. IDX184 inhibits HCV polymerase with an IC50 of 0.31 μM and a Ki of 52.3 nM.

前药IDX184靶向肝脏，含有核苷酸2'-MeG-MP。IDX184是一种肝脏靶向药物，可抑制丙型肝炎病毒核苷酸聚合酶[1]。与母体核苷相比，IDX184是一种第二代口服生物利用度高的核苷酸前药，旨在提高抗HCV的疗效和安全性。在HCV复制子测试中，IDX184在所有修饰核苷（2'或4'；EC50=4-6 μM）中效力最高（EC50=0.3-0.45）。它对感染JFH-1的病毒也有效（EC50=0.06-0.11 μM）。在所研究的细胞系中，IDX184 未引起任何毒性（CC50>100μM）[2]。
在无细胞酶活性测定中，IDX184 能有效抑制 HCV 聚合酶，IC50 为 0.31 μM，Ki 为 52.3 nM。该化合物在所有测试的细胞系中均无毒性（CC50 > 100 μM），表明其具有良好的选择性。IDX184 是核苷酸 2'-MeG-MP 的肝脏靶向前药。

IDX184 是一种核苷酸前药，旨在增强肝脏中活性三磷酸 2'-甲基鸟苷 (2'-MeG) 的生成，2'-MeG 是一种强效且特异性的丙型肝炎病毒 (HCV) 聚合酶抑制剂。在本研究中，将 8 名健康受试者按 6:2 的比例随机分组（活性药物组/安慰剂组），并依次给予 5、10、25、50、75 和 100 mg 的单次递增口服剂量的 IDX184。给药后 120 小时内进行血浆和尿液药代动力学采样。吸收后，IDX184 迅速从血浆中清除，平均半衰期 (t_1/2) 约为 1 小时，而血浆中 2'-MeG 的浓度则逐渐升高。与肝脏靶向给药策略一致，IDX184 和 2'-MeG 的血浆暴露量较低，且与剂量相关：IDX184 的平均最大浓度范围为 1.1 至 17 ng/ml，2'-MeG 的平均最大浓度范围为 1.7 至 19 ng/ml，相应的平均曲线下面积范围分别为 1.2 至 22.7 ng·h/ml 和 17.3 至 334 ng·h/ml。给药 24 小时后，25 至 100 mg 剂量组的平均 2'-MeG 血浆浓度为 0.6 至 3 ng/ml。25 mg 及以上剂量组的平均 2'-MeG 半衰期为 18 至 43 小时。未代谢的 IDX184 和 2'-MeG 的平均累积尿排泄量分别为给药剂量的 0.2% 和 12% 至 20%。 IDX184 安全性良好，耐受性良好；未观察到严重不良事件 (SAE)、剂量依赖性不良事件 (AE) 或剂量限制性毒性。不良事件和实验室异常的发生率较低，且在接受 IDX184 或安慰剂的受试者之间相似。所有不良事件均为轻度至中度，并在研究结束时消退。良好的安全性和药代动力学特征支持对 IDX184 在 HCV 感染患者中进行进一步的临床评估 [1]。
IDX184 可有效抑制细胞培养中的 HCV 复制。作为一种靶向肝脏的核苷酸前药，它具有抗 HCV 活性。它具有口服生物利用度，可与聚乙二醇干扰素-α2a 和利巴韦林联合用于慢性丙型肝炎的一线治疗。该化合物已在临床前模型中显示出对 HCV 复制的强效抑制作用。

IDX184 的主要体外检测方法是使用纯化的 HCV NS5B 聚合酶的无细胞聚合酶活性测定。将该酶与模板引物和核苷酸底物在化合物存在下进行孵育。通过测量放射性标记核苷酸掺入正在延伸的 RNA 链的情况来确定 IC50 值。Ki 值则根据抑制动力学确定。该检测方法直接测量化合物抑制病毒聚合酶酶活性的能力。

IDX184 的体外细胞实验包括用该化合物处理 HCV 复制子细胞系或 HCV 感染细胞。病毒复制通过实时 PCR 定量 HCV RNA 水平或检测报告基因的表达来评估。CC50（半数细胞毒性浓度）使用 MTT 或 CellTiter-Glo 等标准细胞活力检测方法测定。选择性指数计算为 CC50 与 IC50 的比值。

在接受 IDX184 10 mg/kg/天单药治疗 4 天的 HCV 感染黑猩猩中，治疗结束时的病毒学应答与 2′-MeG 暴露量显著相关，但与 IDX184 暴露量无关。2′-MeG 谷浓度在 2 至 8 ng/ml 范围内与 HCV RNA 水平降低 1 至 4 个 log10 相关 (6, 7)。在本研究中，单次给予 50 至 100 mg IDX184 后 24 小时，血浆 2′-MeG 浓度维持在较高水平，即仍高于 2 ng/ml。预计每日一次重复给药后，稳态谷浓度约为 10 ng/ml（数据未显示）。鉴于在黑猩猩中已建立的药代动力学/药效学 (PK/PD) 关系，可以预期在丙型肝炎病毒 (HCV) 感染患者中使用 IDX184 治疗会产生剂量依赖性的病毒学反应 [1]。
已在 HCV 感染小鼠模型或表达 HCV 复制组分的转基因小鼠中开展了 IDX184 的体内动物实验。该化合物通常口服给药，并在血清和肝组织中检测其对病毒载量的影响。测定药代动力学参数，例如 Cmax、Tmax 和半衰期。通过测量肝脏和血浆中活性代谢物的浓度来评估其肝脏靶向特性。

血浆药代动力学。[1]
IDX184 是一种前药，可在肝脏中代谢为核苷 2′-MeG 的单磷酸酯。监测了母体药物 IDX184 及其核苷代谢物 2′-MeG 的血浆浓度。图 2 显示了单次口服 5 至 100 mg 递增剂量 IDX184 后，IDX184（左）和 2′-MeG（右）的平均（± 标准差 [SD]）血浆浓度-时间曲线。表 2 列出了药代动力学参数。健康受试者空腹单次口服 IDX184 后，药物迅速吸收，大多数受试者的达峰时间 (Tmax) 与首次采样时间一致，队列中位数为 0.25 至 0.49 小时，与给药剂量无关。IDX184 的血浆暴露量较低，且与给药剂量成正比。随着剂量从 5 mg 增加到 100 mg，队列平均 Cmax 和 AUC0-∞ 分别从 1.12 ng/ml 变化到 17.3 ng/ml，以及从 1.19 ng·h/ml 变化到 22.7 ng·h/ml。通过对暴露量和剂量的对数转换参数进行回归分析，评估了 IDX184 在研究剂量范围内的药代动力学剂量比例性。 Cmax（b = 0.98；95% CI = 0.76 至 1.21）和 AUC0-∞（b = 1.01；95% CI = 0.85 至 1.17）的模型斜率估计值接近 1。IDX184 的血浆动力学特征显示其具有陡峭的清除相，血浆浓度迅速下降至定量限 (0.1 ng/ml) 以下，且所有剂量组的平均半衰期 (t1/2) 均较短但稳定，范围为 0.58 至 1.06 小时。无论 IDX184 的剂量如何，队列标准化平均清除率 (CL/F) 和分布容积 (Vd/F) 的范围分别为 49.0 至 92.1 L/h/kg 和 67.8 至 122 L/kg。IDX184 从血浆中的快速消除伴随着 2′-MeG 的逐渐出现。与母体药物类似，2′-MeG 的血浆浓度也较低，所有剂量组的平均达峰时间 (Tmax) 为 4.00 至 6.00 小时。在 5 至 50 mg 的剂量范围内，2′-MeG 的平均 Cmax 和平均 C24 值分别增加了十倍，从 1.74 ng/ml 增至 18.6 ng/ml，以及从 0.25 ng/ml 增至 2.88 ng/ml。然而，在更高剂量下，这些参数的剂量依赖性关系减弱（表 2）。剂量比例分析得到的斜率（b 值，95% 置信区间）为：Cmax 0.76（0.60 至 0.92），C24 0.84（0.65 至 1.03）。在 IDX184 剂量为 50 至 100 mg 时，2′-MeG 的平均 Cmax 和平均 C24 值分别为 14.6 至 18.6 ng/ml 和 2.23 至 2.88 ng/ml。相反，2′-MeG 的平均 AUC0-∞ 随剂量增加而增加 20 倍，从 17.3 ng·h/ml 增至 334 ng·h/ml，且在研究的剂量范围内，这些值与剂量呈正比关系（b = 1.04；95% CI = 0.88 至 1.19）。2′-MeG 的平均消除半衰期 (t1/2) 取决于观察到的消除相（浓度 > LOQ），在剂量高达 10 mg 时为 5.42 至 12.2 小时，在剂量 ≥ 25 mg 时为 18.0 至 42.5 小时。
基于摩尔浓度，IDX184 与 2′-MeG 的 AUC0-∞ 比值在各组间均值较低（<4%），且与剂量无关，表明在所研究的剂量范围内，IDX184 的生物转化几乎完全且未饱和。

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尿排泄。[1]
在给药后 120 小时内，监测所有受试者尿液中母体药物 IDX184 及其核苷代谢物 2′-MeG 的排泄情况。除一个样本外，其余样本仅在给药后 12 小时内检测到 IDX184；在该样本中，给药后 24 小时内均检测到 IDX184。IDX184 的累积尿排泄量随剂量增加而增加，但在所有组中均保持较低水平，仅占给药剂量的 0.2%（表 3）。相比之下，在给药后120小时的尿液收集期内，所有尿液样本中均可定量检测到2′-MeG。总体而言，2′-MeG的累积尿排泄量随剂量增加而增加（表3）。2′-MeG的累积尿排泄量高于IDX184，按摩尔计，占给药剂量的12%至20%。2′-MeG的累积尿排泄量在48至72小时之间接近峰值，超过一半的2′-MeG总排泄量在最初24小时内回收。肾清除率 (CLR) 与给药剂量无关，且各组间保持一致，IDX184 的平均值为 123 至 177 ml/min，2′-MeG 的平均值为 271 至 322 ml/min。
IDX184 的分子量为 626.62，分子式为 C25H35N6O9PS。它具有口服生物利用度，是一种靶向肝脏的核苷酸前药。该化合物旨在将活性核苷酸单磷酸特异性递送至肝脏，并在肝脏中转化为活性三磷酸形式。这种肝脏靶向策略可提高疗效并减少全身副作用。该前药经代谢后释放活性核苷酸 2′-MeG-MP。

安全性和耐受性。[1]
单次给药IDX184耐受性良好。未发生严重不良事件（SAE）或剂量限制性毒性。最常见的不良事件（AE）是头晕，IDX184组36例受试者中有2例（5.6%）出现头晕，安慰剂组12例受试者中有3例（25%）出现头晕。安慰剂组和活性药物组均观察到其他较少见的不良事件，包括接触性皮炎、痛经、疲乏和头痛。所有报告的不良事件均为轻度或中度，并在研究结束时消退。各治疗组间不良事件模式无显著差异。所有治疗组的实验室参数均保持稳定。生命体征、体格检查结果或心电图参数均未观察到具有临床意义的变化。
IDX184在任何测试的细胞系中均无毒性（CC50 > 100 μM）。该化合物已在临床前研究中评估了其安全性。作为一种核苷类似物，其潜在毒性与线粒体毒性或对宿主聚合酶的影响有关，但IDX184在临床前评估中显示出良好的安全性。现有数据中未报告任何显著毒性。

[1]. Safety and Pharmacokinetics of IDX184, a Liver-Targeted Nucleotide Polymerase Inhibitor of Hepatitis C Virus, in Healthy Subjects. Antimicrob Agents Chemother. 2011 Jan;55(1):76-81.

[2]. IN VITRO ANTIVIRAL ACTIVITY AND PHARMACOLOGY OF IDX184, A NOVEL AND POTENT INHIBITOR OF HCV REPLICATION.

目前，由于伦理问题和技术挑战，尚无法直接评估人体内细胞内IDX184及其相关磷酸化形式2′-MeG的浓度。尽管本研究未获取肝脏活检标本，但仍可通过母体IDX184与2′-MeG血浆暴露量的比值来近似估算IDX184转化为2′-MeG-MP及其后续磷酸盐的程度。尽管剂量差异高达20倍，但不同剂量下IDX184与2′-MeG AUC0-∞的平均摩尔比（2.2%至3.8%）始终保持较低水平，表明转化接近完全，且在所研究的最高IDX184剂量下未达到饱和。母体IDX184及其代谢物2′-MeG均经尿液排泄。尽管未进行正式的统计分析，但尿液中这两种物质的回收率似乎与剂量相关。 IDX184 的尿排泄有限，而 2′-MeG 的累积尿排泄量相当可观，约占给药剂量的 12% 至 20%。肾清除率，尤其是 2′-MeG 的清除率，比正常肾小球滤过率高 80 至 120 ml/min，表明活性成分参与了肾清除。总之，本研究中，健康受试者单次口服 5 mg 至 100 mg IDX184 安全且耐受性良好。口服给药后，IDX184 和 2′-MeG 的血浆浓度较低，这与 IDX184 是一种肝脏靶向前药的事实相符。IDX184 良好的安全性和药代动力学特征支持对其在丙型肝炎病毒 (HCV) 感染患者中进行进一步的临床评估。 [1]
IDX184 是一种强效、口服生物利用度高、靶向肝脏的 HCV NS5B 聚合酶核苷酸前药抑制剂。它已与聚乙二醇干扰素-α2a 和利巴韦林联合用于治疗慢性丙型肝炎的研究。该化合物是核苷酸 2'-MeG-MP 的前药，设计用于靶向肝脏。HCV 聚合酶的突变是导致 IDX184 耐药性的主要原因。

C25H35N6O9PS

626.62

626.192

C, 47.92; H, 5.63; N, 13.41; O, 22.98; P, 4.94; S, 5.12

1036915-08-8

135565589

White to off-white solid powder

1.892

259.25

6

13

14

42

1060

4

FGHMGRXAHIXTBM-TWFJNEQDSA-N

InChI=1S/C25H35N6O9PS/c1-24(2,13-32)22(35)42-10-9-38-41(37,28-11-15-7-5-4-6-8-15)39-12-16-18(33)25(3,36)21(40-16)31-14-27-17-19(31)29-23(26)30-20(17)34/h4-8,14,16,18,21,32-33,36H,9-13H2,1-3H3,(H,28,37)(H3,26,29,30,34)/t16-,18-,21-,25-,41?/m1/s1

S-[2-[[(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3,4-dihydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-(benzylamino)phosphoryl]oxyethyl] 3-hydroxy-2,2-dimethylpropanethioate

IDX-184; IDX184; 1036915-08-8; Guanosine, 2'-C-methyl-, 5'-(2-((3-hydroxy-2,2-dimethyl-1-oxopropyl)thio)ethyl N-(phenylmethyl)phosphoramidate); 4W44B4S9OC; S-[2-[[(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3,4-dihydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-(benzylamino)phosphoryl]oxyethyl] 3-hydroxy-2,2-dimethylpropanethioate; UNII-4W44B4S9OC; SCHEMBL3132403; IDX 184

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~250 mg/mL (~398.97 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。