| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CRM1/chromosome region maintenance 1
CRM1 (chromosome region maintenance 1 protein, also called exportin 1/Xpo1); binds covalently to Cys528 in the NES-binding groove [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
KPT-251 与 CRM1 环中央凸面上的 NES 结合槽结合 [1]。KPT-251（作用 72 小时）可抑制黑色素瘤细胞的生长 [2]。KPT-251（1 μM；0-48 小时）可调节 p53、pRb、survivin 和 ERK 的磷酸化水平 [2]。KPT-251（0.1 和 1 μM；0-72 小时）可诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞 [2]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
KPT-251（75 mg/kg/天；即每周三次，持续五周）可显著提高小鼠的生存率，并成功抑制移植到 NSG 小鼠体内的 MV4-11 细胞的生长 [1]。在小鼠黑色素瘤异种移植模型中，KPT-251（50 mg/kg；口服；隔日一次，持续 21 天）可减少肿瘤的形成 [2]。
KPT-251（75 mg/kg）每周三次口服给药，持续五周，用于移植了表达荧光素酶的 MV4-11 人 AML 细胞的 NOD-SCID-IL2Rγnull (NSG) 小鼠，结果显示，通过生物发光成像 (BLI) 测量，白血病生长显著受到抑制，且治疗期间 BLI 信号未见增加，而载体对照组小鼠的 BLI 信号则显著增加；接受 KPT-251 治疗的小鼠生存期显著延长（Kaplan-Meier 分析，P<0.0001），白血病进展仅在停药后出现；治疗 35 天后对骨髓和脾脏进行组织病理学分析显示，KPT-251 治疗组小鼠的白血病细胞浸润水平极低，造血细胞形态和细胞密度正常，包括髓系、红系和巨核系发育中的细胞，而载体对照组小鼠则表现出广泛的白血病细胞浸润；KPT-251 治疗组小鼠的脾脏显示出明显的髓外造血。[1] |
| 酶活实验 |
解析了KPT-251与酿酒酵母CRM1（T539C突变模拟人Cys528）、酿酒酵母RanBP1和人RanGTP三元复合物的2.2 Å晶体结构。该复合物的结晶采用含有18% PEG3350、200 mM硝酸铵和100 mM Bis-Tris（pH 6.6）的储液，并添加20% (v/v)甘油进行低温保护。X射线衍射数据在先进光子源19ID光束线站收集。使用MolRep程序，以不含抑制剂的CRM1-Ran-RanBP1复合物结构（PDB 3M11）为搜索模型，通过分子置换法解析了该结构。模型构建和精修使用COOT和Refmac5程序完成，包括TLS精修。精细结构分析表明，KPT-251 与 CRM1 的 NES 结合槽结合，相互作用几乎完全是疏水的；三氟甲基苯基比 NES 侧链更深入地渗透到结合槽中。该结构已提交至 PDB，PDB ID 为 4GPT。[1]
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[2]
细胞类型： 黑色素瘤 BRAF WT (Mewo) 和突变细胞 (A375) 测试浓度： 1 μM 孵育时间： 4、8、24 和 48 小时 实验结果： 抑制细胞质 p53 降解，降低 survivin 水平，增加 ERK 磷酸化，BRAF WT 和突变体中 pRb 和 p-pRb 水平降低。 细胞周期分析[2] 细胞类型：Mewo 和 A375 细胞 测试浓度：1 μM 孵育时间：24、48 和 72 小时 实验结果：可观察到 S 期缩短以及 G1 和/或 G2 期细胞周期阻滞。 细胞凋亡分析[2] 细胞类型：Mel-Juso、SK-MEL-28、SK-MEL-5 和 A375 细胞 测试浓度：0.1 和 1 μM 孵育时间：24、48 和 72 小时 实验结果：在所测试的黑色素瘤细胞系中，caspase-3 和 caspase-7 的活性呈剂量和时间依赖性增加。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 7周龄雌性NOD-SCID-IL2Rcγnull (NSG)小鼠，通过尾静脉注射引入2 × 10⁶个表达荧光素酶的MV4-11细胞[1]
剂量： 75 mg/kg/天 给药途径： 灌胃，每周3次，持续5周 实验结果： 显著提高了小鼠的存活率，仅在停药后白血病才出现进展，阻止了白血病细胞浸润到小鼠骨髓和脾脏，并保护了正常的造血功能。 动物/疾病模型： 无胸腺裸鼠 Nu/Nu，黑色素瘤异种移植模型 [2] 剂量： 50 mg/kg 给药途径： 口服，隔日一次，持续 21 天 实验结果： 抑制肿瘤生长，增加 cleaved caspase-3 并降低 Ki67。 将 2×10^6 个表达荧光素酶的 MV4-11 人 AML 细胞经尾静脉注射到 7 周龄的 NOD-SCID-IL2Rγnull (NSG) 雌性小鼠体内。通过生物发光成像 (BLI) 证实白血病建立后，将小鼠随机分为两组，每组九只，分别灌胃给予载体对照（Pluronic F-68/PVP-K29/32）或 KPT-251（75 mg/kg/天，每周三次，持续 5 周）。治疗 4.5 周后进行血细胞计数。从治疗开始至濒死状态测量生存期，并采用 Kaplan-Meier 分析进行评估。取股骨和脾脏组织，用 10% 福尔马林固定，切片，石蜡包埋，苏木精-伊红染色，并在显微镜下观察。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
每周三次，每次 75 mg/kg 的 KPT-251 治疗持续 4.5 周，对正常造血细胞的毒性极低：与载体对照组相比，KPT-251 治疗组小鼠的白细胞计数 (P<0.19)、中性粒细胞计数 (P<0.62)、淋巴细胞计数 (P<0.75) 和网织红细胞百分比 (P<0.09) 均无显著差异；血小板计数 (P<0.0001) 和血细胞比容 (P<0.0096) 存在显著差异，但仍在正常范围内。治疗 35 天后进行的骨髓组织病理学检查显示，造血细胞形态和细胞密度（髓系、红系、巨核系）均正常，未见毒性迹象。这类CRM1抑制剂在小鼠体内的剂量限制性毒性是体重减轻，而通过补充热量可以缓解所给剂量下的体重减轻。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
靶向染色体区域维持蛋白1 (CRM1) 的药物具有治疗白血病的潜力，CRM1是核输出的主要介质。然而，现有的CRM1抑制剂效力不一，且具有广泛的细胞毒性。本文报道了一类新型小分子CRM1抑制剂的结构分析及其抗白血病活性。这些化合物被命名为选择性核输出抑制剂 (SINEs)，是利用分子建模技术筛选小型虚拟化合物库，寻找靶向CRM1核输出信号 (NES) 凹槽的抑制剂而开发的。CRM1-Ran-RanBP1复合物与KPT-251（该类抑制剂的代表分子）结合的2.2 Å晶体结构显示，该药物占据了CRM1凹槽中通常由NES占据的部分，但其作用范围更深入凹槽，从而阻断了CRM1介导的蛋白质输出。 SINE抑制剂具有强大的抗白血病活性，在纳摩尔浓度下即可诱导14种代表不同分子亚型的急性髓系白血病（AML）细胞系发生凋亡。当将KPT-251口服给予移植了人AML细胞的免疫缺陷小鼠时，该药物表现出强大的抗白血病活性，且对正常造血细胞的毒性可忽略不计。因此，KPT-SINE CRM1拮抗剂代表了一类值得在AML患者中进行进一步测试的新型药物。[1]
BRAF抑制剂治疗的耐药性使得开发基于BRAF抑制剂的联合疗法以克服原发性耐药并防止获得性耐药机制的出现变得迫切。CRM1受体介导黑色素瘤增殖、存活和耐药所需的关键蛋白的核输出。我们假设，通过抑制CRM1介导的核输出，可以改变这些蛋白的功能，从而降低黑色素瘤细胞的存活率并增强BRAF抑制剂的抗肿瘤作用。为了验证这一假设，我们使用选择性核输出抑制剂（SINE）类似物KPT-185、KPT-251、KPT-276和KPT-330来抑制CRM1。同时，我们使用类似物PLX-4720和PLX-4032作为BRAF抑制剂。我们在异种移植瘤模型和体外黑色素瘤模型中测试了这些化合物。体外实验表明，CRM1抑制可降低黑色素瘤细胞增殖，且该作用与BRAF突变状态无关；此外，CRM1抑制通过促进细胞周期阻滞和凋亡，协同增强了BRAF抑制剂对BRAF突变型黑色素瘤的抑制作用。在黑色素瘤异种移植瘤模型中，CRM1抑制剂可抑制肿瘤生长，且该作用与BRAF或NRAS状态无关；当与BRAF抑制剂联合使用时，CRM1抑制剂可诱导BRAF V600E突变型肿瘤完全消退。机制研究表明，CRM1抑制剂与p53稳定以及视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）和survivin的调控相关。此外，我们发现BRAF抑制剂可以消除与CRM1抑制剂相关的细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化，这可能有助于该联合疗法的协同作用。总之，CRM1抑制剂可以降低BRAF突变型和野生型黑色素瘤的生存率。CRM1抑制剂与BRAF抑制剂联合使用具有协同作用，并可诱导BRAF突变型黑色素瘤消退。[2] KPT-251是一种第二代选择性核输出抑制剂（SINE），它通过共价修饰Cys528不可逆地阻断CRM1。它是通过计算机分子建模筛选针对CRM1核输出信号（NES）槽而开发的。该化合物以噁二唑生物等排体取代不稳定的酯基，从而提高代谢稳定性和生物利用度。KPT-251 与 NES 结合槽结合，且抑制剂结合槽比 NES 结合槽更窄更深，表明其具有构象可塑性。三氟甲基苯基比 NES 侧链更深入地渗透到结合槽中，可能与货物蛋白竞争结合位点。KPT-330 与 KPT-251 结构密切相关，但具有更优异的药代动力学特性，目前已进入晚期癌症患者的 I 期临床试验。[1] |
| 分子式 |
C14H7F6N5O
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|---|---|
| 分子量 |
375.228702783585
|
| 精确质量 |
375.055
|
| 元素分析 |
C, 44.81; H, 1.88; F, 30.38; N, 18.66; O, 4.26
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| CAS号 |
1388841-50-6
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| PubChem CID |
57519758
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| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid powder
|
| LogP |
3.993
|
| tPSA |
69.63
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
491
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1=C(C=C(C=C1C(F)(F)F)C(F)(F)F)C2=NN(C=N2)/C=C\C3=NN=CO3
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| InChi Key |
LDFXTRYMMZGKIC-UPHRSURJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H7F6N5O/c15-13(16,17)9-3-8(4-10(5-9)14(18,19)20)12-21-6-25(24-12)2-1-11-23-22-7-26-11/h1-7H/b2-1-
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| 化学名 |
(Z)-2-{2-[3-(3,5-Bis-trifluoromethyl-phenyl)-[1,2,4]triazol-1-yl]-vinyl}-[1,3,4]oxadiazole
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| 别名 |
KPT-251; KPT251; (Z)-2-(2-(3-(3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl)-1H-1,2,4-triazol-1-yl)vinyl)-1,3,4-oxadiazole; KPT251; SCHEMBL11318201; KPT251?; LDFXTRYMMZGKIC-UPHRSURJSA-N; KPT 251
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6650 mL | 13.3252 mL | 26.6503 mL | |
| 5 mM | 0.5330 mL | 2.6650 mL | 5.3301 mL | |
| 10 mM | 0.2665 mL | 1.3325 mL | 2.6650 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
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