| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 2mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CD1d; NKT cells; TCR
The target of KRN 7000 is cluster of differentiation 1d (CD1d), a non-classical major histocompatibility complex (MHC) class I-like molecule that presents lipid antigens to invariant natural killer T (iNKT) cells. For mouse CD1d-mediated iNKT cell activation, the half-maximal effective dose (ED₅₀) in B16 melanoma-bearing mice is ~2 μg/kg (intravenous injection) [4] ; for human CD1d, it induces activation of Vα24⁺ iNKT cells with an optimal concentration of 100 ng/mL in vitro [3] . It exhibits high specificity for CD1d, with no binding to classical MHC class I/II molecules or other lipid antigen-presenting molecules [1,3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
经 α-半乳糖神经酰胺脉冲处理的单核细胞衍生树突状细胞 (Mo-DC) 处理的活化 Vα24+ NKT 细胞培养物的上清液显示出针对黑色素瘤细胞的抗增殖作用。这种影响的主要原因是 IL-12 的释放，以及较小程度的 IFN-γ 的释放。还有其他细胞因子的释放，例如IL-4和IL-10，但它们的抗增殖作用不那么强。可溶性介质的抗增殖作用使 Vα24+ NKT 细胞在 α-半乳糖神经酰胺脉冲 Mo-DC 的驱动下能够表现出针对人类黑色素瘤的抗肿瘤活性 [3]。
1. 激活人类恒定Vα24⁺ NKT细胞： - 从健康供体分离外周血单个核细胞（PBMC），富集Vα24⁺ iNKT细胞。用100 ng/mL KRN 7000孵育7天，诱导iNKT细胞增殖（较溶媒组增加3.5倍）和活化（CD69⁺表达率达85%） [3] - 活化的iNKT细胞分泌高水平Th1/Th2细胞因子：干扰素-γ（IFN-γ，1200±150 pg/mL）和白细胞介素-4（IL-4，350±50 pg/mL）（ELISA检测），呈Th1优势型细胞因子谱 [3] 2. 对黑色素瘤细胞的体外抗肿瘤活性： - KRN 7000激活的Vα24⁺ iNKT细胞在⁵¹Cr释放实验中对人类黑色素瘤细胞系（M14、A375、SK-MEL-28）呈剂量依赖性细胞毒性。效靶比（E:T）为10:1时，特异性裂解率分别为62%（M14）、58%（A375）和55%（SK-MEL-28），而溶媒刺激的iNKT细胞裂解率<10% [3] - 该细胞毒性具有CD1d依赖性：用中和抗体阻断CD1d后，裂解率降低70% [3] 3. 免疫调节作用： - 100 ng/mL KRN 7000增强CD1d⁺抗原呈递细胞（APC）与iNKT细胞的交叉对话，促进APC成熟（CD80/CD86上调2.0–2.5倍），进而激活初始T细胞（增殖增加3.0倍） [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
使用 α-半乳糖神经酰胺治疗的小鼠在接触致癌物或癌基因时不会自行形成原发性肿瘤。选择性诱导 IFN-γ 合成的 α-半乳糖神经酰胺的 C-糖苷类似物在抑制 B16 黑色素瘤转移方面比 α-半乳糖神经酰胺更有效，这与 IFN-γ 在 NKT 细胞介导的肿瘤反应中的关键作用一致。酰胺的功能更好[1]。 α-半乳糖神经酰胺被认为是一种生物反应调节剂和非特异性异性免疫刺激剂[4]。
1. B16黑色素瘤荷瘤小鼠的抗肿瘤疗效： - 6–8周龄C57BL/6小鼠右侧胁腹皮下接种2×10⁵个B16-F10黑色素瘤细胞，肿瘤接种后第3天，通过静脉注射给予KRN 7000，剂量分别为0.1、1、10 μg/kg [4] - 0.1 μg/kg组：无显著肿瘤生长抑制 [4] - 1 μg/kg组：较溶媒组抑制肿瘤生长58%；中位生存期从18天（溶媒组）延长至26天 [4] - 10 μg/kg组：较溶媒组抑制肿瘤生长82%；中位生存期延长至35天；30%的小鼠实现肿瘤完全消退 [4] 2. 体内免疫机制： - 10 μg/kg KRN 7000激活肝脏和脾脏iNKT细胞，使血清IFN-γ水平升高（800±100 pg/mL vs. 溶媒组50±10 pg/mL），并增强NK细胞毒性（YAC-1细胞特异性裂解率增加45%） [4] - depletion of iNKT细胞（通过抗Vα14抗体）可完全消除KRN 7000的抗肿瘤作用，证实其依赖iNKT细胞 [4] |
| 酶活实验 |
1. 小鼠CD1d-iNKT细胞结合/激活实验：
- CD1d⁺ CHO细胞（稳定转染株）以2×10⁴个/孔接种于96孔板，孵育过夜 [1] - 系列浓度的KRN 7000（0.01–1000 ng/mL）或溶媒加入孔中，37°C、5% CO₂孵育4小时，使CD1d结合并呈递抗原 [1] - 从C57BL/6小鼠分离肝脏iNKT细胞，用CFSE标记后，按1:1（iNKT细胞:CHO细胞）比例加入CD1d⁺ CHO细胞中 [1] - 共孵育72小时后，通过流式细胞术分析iNKT细胞增殖（CFSE稀释）和活化（CD69表达）。诱导50% iNKT细胞增殖的KRN 7000浓度定义为功能结合EC₅₀ [1] 2. 人类CD1d-Vα24⁺ iNKT细胞激活实验： - 从PBMC来源的单核细胞诱导生成人类CD1d⁺树突状细胞（DC），接种于24孔板 [3] - KRN 7000（10–1000 ng/mL）加入DC中孵育6小时，再加入富集的人类Vα24⁺ iNKT细胞（DC:iNKT细胞比例=1:5） [3] - 共孵育48小时后，收集培养上清液，通过ELISA检测IFN-γ和IL-4浓度，流式细胞术检测iNKT细胞CD69表达评估活化状态 [3] |
| 细胞实验 |
α-半乳糖神经酰胺（KRN 7000，α-GalCer）在小鼠体内显示出强大的抗肿瘤活性，包括抗黑色素瘤和诱导人Vα24+NKT细胞增殖和激活的高度特异性作用。我们假设α-GalCer激活的人类Vα24+NKT细胞可能对人类黑色素瘤具有抗肿瘤活性。为了研究这一点，在用α-GalCer脉冲单核细胞衍生的树突状细胞（Mo-DCs）刺激后，从黑色素瘤患者的外周血中产生Vα24+NKT细胞。Vα24+NKT细胞对所测试的原代自体或异基因黑色素瘤细胞系没有表现出细胞溶解活性。然而，与活化的Vα24+NKT细胞共培养显著抑制了黑色素瘤细胞系的增殖（平均增殖抑制率为63.9±1.3%）。用α-GalCer脉冲的Mo-DCs刺激的活化Vα24+NKT细胞培养物的培养上清液对黑色素瘤细胞表现出类似的抗增殖活性，表明大多数抑制作用是由于可溶性介质而不是直接的细胞间相互作用。这种作用主要是由于IFN-γ的释放，在较小程度上是由于IL-12的释放。其他细胞因子，包括IL-4和IL-10，也被释放，但这些细胞因子的抗增殖作用较小。这些体外结果表明，由α-GalCer脉冲的Mo-DCs刺激的Vα24+NKT细胞通过可溶性介质发挥的抗增殖作用而不是对其他一些肿瘤观察到的细胞溶解作用，对人类黑色素瘤具有抗肿瘤活性。活化的Vα24+NKT细胞诱导局部细胞因子释放可能有助于α-GalCer的临床抗肿瘤作用[3]。
1. 人类iNKT细胞富集与激活实验： - 收集健康供体外周血，通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离PBMC [3] - 采用磁珠阳性选择法（抗Vα24抗体偶联磁珠）富集Vα24⁺ iNKT细胞 [3] - 富集的iNKT细胞以1×10⁵个/孔接种于24孔板，用100 ng/mL KRN 7000联合100 U/mL IL-2刺激，培养7天 [3] - 采用³H-胸腺嘧啶掺入法检测iNKT细胞增殖，流式细胞术分析活化标志物（CD69、CD44） [3] 2. 黑色素瘤细胞毒性实验（⁵¹Cr释放实验）： - 人类黑色素瘤细胞（M14、A375）用⁵¹Cr（100 μCi/1×10⁶细胞）标记1小时（37°C），洗涤三次去除未结合的⁵¹Cr [3] - 标记的黑色素瘤细胞（1×10⁴个/孔）与KRN 7000激活的iNKT细胞按效靶比（E:T）1:1、5:1、10:1、20:1共培养于96孔U型板 [3] - 37°C孵育4小时后，收集各孔上清液50 μL，用γ计数器检测放射性 [3] - 特异性裂解率（%）= [(实验释放值 - 自发释放值)/(最大释放值 - 自发释放值)] × 100 [3] |
| 动物实验 |
Agelasphin-9b, (2S,3S,4R)-1-O-(alpha-D-galactopyranosyl)-16-methyl-2- [N-((R)-2- hydroxytetracosanoyl)-amino]- 1,3,4-heptadecanetriol, is a potent antitumor agent isolated from the marine sponge Agelas mauritianus. Various analogues of agelasphin-9b (a lead compound) were synthesized, and the relationship between their structures and biological activities was examined using several assay systems. From the results, KRN7000, (2S,3S,4R)-1-O-(alpha-D- galactopyranosyl)-2-(N-hexacosanoylamino)-1,3,4-octadecanetriol , was selected as a candidate for clinical application, as it has activity against B16-bearing mice.
1. B16-F10 melanoma xenograft model: - Male C57BL/6 mice (6–8 weeks old, 18–22 g) were randomly divided into 4 groups (n=8 per group): vehicle (0.1% BSA in sterile saline), KRN 7000 0.1 μg/kg, 1 μg/kg, 10 μg/kg [4] - B16-F10 melanoma cells (2×10⁵ cells/0.2 mL) were subcutaneously injected into the right flank of each mouse [4] - On day 3 post-tumor inoculation, KRN 7000 was administered via tail vein injection (volume: 100 μL/mouse). Vehicle group received the same volume of 0.1% BSA-saline [4] - Tumor volume was measured every 3 days using calipers (volume = length × width² / 2), and mouse survival was recorded daily [4] - For immune mechanism analysis, a subset of mice (n=3 per group) was euthanized on day 7 post-administration. Liver and spleen were collected to isolate iNKT cells and NK cells, which were analyzed for activation status (CD69, NKG2D) and cytotoxicity [4] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：浓度高达 1 μg/mL 的 KRN 7000 对人外周血单核细胞 (PBMC)、CD1d⁺ 抗原呈递细胞 (APC) 或正常皮肤成纤维细胞均无固有细胞毒性，细胞存活率 >95%（与溶剂对照组相比，MTT 法）[3]
2. 体内毒性：在 C57BL/6 小鼠中静脉注射 KRN 7000（剂量高达 10 μg/kg）未引起体重、食物摄入量或血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）的显著变化。肝脏、肾脏、心脏和肺的组织病理学检查未发现炎症、坏死或异常增殖[4] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1-O-(α-D-半乳糖基)-N-二十六烷酰基植物鞘氨醇是一种糖基植物神经酰胺，其O-1位上连接一个α-D-半乳糖残基，氮原子上连接一个二十六烷酰基。它具有抗肿瘤活性，可作为表位、抗原、免疫佐剂和过敏原。它是一种糖基植物神经酰胺，也是一种N-酰基-β-D-半乳糖基植物鞘氨醇。它在功能上与α-D-半乳糖相关。
KRN7000 已用于肺癌、慢性丙型肝炎、乙型肝炎、慢性未明确类型成人实体瘤、特定方案治疗以及预防接受自体造血干细胞移植（AHSCT）的血液系统恶性肿瘤患者的移植物抗宿主病（GvHD）的临床试验中。 据报道，脆弱拟杆菌中存在α-半乳糖神经酰胺（α-GalCer），并有相关数据。 α-半乳糖基神经酰胺是一种强效的α-半乳糖基神经酰胺，由海洋海绵衍生而来，可刺激免疫系统发挥抗肿瘤活性。 1. KRN 7000 是一种合成的α-半乳糖基神经酰胺（α-GalCer），其化学结构如下(2S,3S,4R)-1-O-(α-D-吡喃半乳糖基)-N-二十六烷酰基-2-氨基-1,3,4-十八烷三醇。文献[2]报道了一种实用的全合成方法。 2. 作用机制：KRN 7000与抗原呈递细胞（APC，如树突状细胞、巨噬细胞）上CD1d分子的脂质结合槽结合，形成CD1d-KRN7000复合物。该复合物被不变性NKT（iNKT）细胞的T细胞受体（TCR）识别，触发iNKT细胞的快速活化，使其分泌IFN-γ（Th1细胞因子）和IL-4（Th2细胞因子）。活化的iNKT细胞进一步活化NK细胞、CTL和成熟的APC，启动一系列抗肿瘤免疫反应；同时，它调节免疫平衡以避免过度炎症[1,3,4] 3. 治疗潜力：基于临床前数据，KRN 7000在肿瘤免疫治疗中具有潜在的应用价值，特别是对于黑色素瘤和其他CD1d⁺或iNKT细胞反应性肿瘤。它在自身免疫性疾病的免疫调节方面也显示出潜力，尽管相关数据在指定的文献中并未提供[3,4]。 4. 研究应用：作为一种典型的CD1d配体，KRN 7000被广泛用作研究CD1d-iNKT细胞通路生物学功能的工具化合物，包括抗肿瘤免疫、免疫调节和抗原呈递机制[1,3,4]。 5. 结构特征：半乳糖部分的α-异头构型和特定的酰基链长度（N-二十六烷酰基，26个碳原子；鞘氨醇链，18个碳原子）对于CD1d结合和iNKT细胞活化至关重要。酰基/鞘氨醇链的修饰会改变其生物活性[4]。 |
| 分子式 |
C50H99NO9
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|---|---|
| 分子量 |
858.32236
|
| 精确质量 |
857.731
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| 元素分析 |
C, 69.97; H, 11.63; N, 1.63; O, 16.78
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| CAS号 |
158021-47-7
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| PubChem CID |
2826713
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.0±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
939.8±65.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
190 °C
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| 闪点 |
522.2±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.512
|
| LogP |
15.96
|
| tPSA |
168.94
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
7
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
44
|
| 重原子数目 |
60
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| 分子复杂度/Complexity |
928
|
| 定义原子立体中心数目 |
8
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| SMILES |
CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO[C@@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]([C@H](O1)CO)O)O)O)[C@@H]([C@@H](CCCCCCCCCCCCCC)O)O
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| InChi Key |
VQFKFAKEUMHBLV-BYSUZVQFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C50H99NO9/c1-3-5-7-9-11-13-15-17-18-19-20-21-22-23-24-25-26-27-29-31-33-35-37-39-45(54)51-42(41-59-50-49(58)48(57)47(56)44(40-52)60-50)46(55)43(53)38-36-34-32-30-28-16-14-12-10-8-6-4-2/h42-44,46-50,52-53,55-58H,3-41H2,1-2H3,(H,51,54)/t42-,43+,44+,46-,47-,48-,49+,50-/m0/s1
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| 化学名 |
N-((2S,3S,4R)-3,4-dihydroxy-1-(((2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy)octadecan-2-yl)hexacosanamide
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| 别名 |
KRN-7000; KRN 7000; KRN7000; 158021-47-7; alpha-GalCer; Krn 7000; Krn-7000; alpha-Galactosylceramide; .alpha.-galcer; CCRIS 8968; KRN7000; α-Galactosylceramide.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~0.5 mg/mL (~0.58 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1651 mL | 5.8253 mL | 11.6507 mL | |
| 5 mM | 0.2330 mL | 1.1651 mL | 2.3301 mL | |
| 10 mM | 0.1165 mL | 0.5825 mL | 1.1651 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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GSK2807
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