Kynurenine

别名: DL-Kynurenine; 2-Amino-4-(2-aminophenyl)-4-oxobutanoic acid DL-犬尿氨酸; 犬尿素; DL-犬尿素;RAC-犬尿氨酸;犬尿氨酸; 2-氨基-4-(2-氨基苯基)-4-氧代丁酸; 2-氨基-3-(2-氨基苯甲酰基)丙酸
目录号: V13205 纯度: ≥98%
2-氨基-4-(2-氨基苯基)-4-氧代丁酸是一种内源性产生的代谢物。
Kynurenine CAS号: 343-65-7
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述
犬尿氨酸[也称为2-氨基-4-(2-氨基苯基)-4-氧代丁酸]是由必需氨基酸色氨酸通过色氨酸犬尿氨素途径内源性产生的代谢产物。它引起由KCNQ编码的电压依赖性K(+)通道激活引起的血管舒张和低血压。
生物活性&实验参考方法
靶点
Endogenous metabolite
体外研究 (In Vitro)
将色氨酸(Trp)转化为犬尿氨酸(Kyn)的主要酶有两种:色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)和吲哚胺2,3-双加氢酶(IDO)。在某些癌症中,Kyn的积累可以促进免疫抑制。在本研究中,我们研究了IDO和TDO在原代人肝细胞(PHH)和肿瘤HepG2细胞中对Trp向Kyn的降解。为了量化Trp降解和Kyn积累,使用反相高压液相色谱法,测定PHH和HepG2细胞培养基中Trp和Kyn的水平。通过用IFN-γ激活IDO和用1-甲基色氨酸(1-DL-MT)抑制IDO来研究IDO在Trp代谢中的作用。使用两种TDO抑制剂之一680C91或LM10研究TDO的作用。使用实时PCR来测量TDO和IDO的表达。Trp在PHH和HepG2细胞中都被降解,但在PHH细胞中降解更高。然而,Kyn在HepG2细胞的上清液中的积累更高。IFN-γ刺激IDO对Trp降解和Kyn积累没有显著影响,尽管它强烈上调了IDO的表达。1-DL-MT抑制IDO对Trp的降解也没有影响。相反,用680C91或LM10抑制TDO显著降低了Trp的降解。TDO的表达与Kyn在HepG2细胞培养基中的积累呈正相关,而IDO的表达则与Kyn的积累无关。此外,TDO在HepG2细胞中降解L-Trp而不降解D-Trp。Kyn是TDO在HepG2细胞中降解Trp的主要代谢产物。Kyn在HepG2细胞中的积累可能是肿瘤免疫抵抗的关键机制。两种TDO抑制剂680C91和LM10可用于肝癌的免疫治疗[1]。
体内研究 (In Vivo)
吲哚胺2,3-二加氧酶-1(IDO1)在许多炎症和癌症疾病中催化色氨酸-甘脲代谢。值得注意的是,心脏损伤后立即发生的急性炎症对新生儿心肌细胞增殖和心脏再生至关重要。然而,IDO1催化的色氨酸在心脏再生过程中的代谢在很大程度上尚未被探索。在这里,我们发现心尖新生小鼠心脏切除手术导致心脏IDO1表达和犬尿氨酸积累的快速和持续增加。Ido1基因的心脏缺失或Ido1的化学抑制会损害心脏再生。从机制上讲,犬尿氨酸升高通过激活细胞质芳基烃受体SRC-YAP/ERK途径触发心肌细胞增殖。此外,心肌细胞衍生的犬尿氨酸转运到内皮细胞,并通过促进芳烃受体核转位和增强血管内皮生长因子A的表达来刺激心脏血管生成。值得注意的是,Ahr缺失可阻止吲哚胺2,3-双加氧酶-犬尿氨酸相关的心脏再生。总之,增加吲哚胺2,3-双加氧酶衍生的犬尿氨酸水平通过作为心肌细胞增殖和心脏血管生成的内源性调节因子来促进心脏再生[2]。
细胞实验
如前所述培养HepG2细胞和PHH细胞。PHH和HepG2细胞在William培养基中培养,培养基中Trp浓度增加(60、120和240µmol/L)。在24小时、48小时和72小时检测培养的PHH和HepG2细胞上清液中的Trp和Kyn水平。在下一步中,我们还通过在含有更高量Trp(480µmol/L、960µmol/L和1920µmol/L)的William培养基中培养这些细胞72小时来研究HepG2细胞中Trp的最大降解。为了确定IDO是否是Trp分解的原因,我们用IFN-γ激活IDO,并用1-甲基色氨酸(1-DL-MT)抑制PHH和HepG2细胞中的IDO。在这些实验中,细胞在以下条件之一下培养72小时:不处理,用IFN-γ刺激,用IFN-γ+1-DL-MT处理,和单独用1-DL-MT处理。72小时后,测定上清液中Trp和Kyn的量。为了确定TDO是否是Trp分解的原因,我们用TDO抑制剂LM10和680C91培养细胞。在这些实验中,HepG2细胞在含有240µM Trp的培养基中用增加量的680C91(10、20、40和80µmol/L)和LM10(25、50和75µmol/L)处理72小时,然后测量上清液中的Trp和Kyn水平。为了研究哪种Trp异构体(L-Trp或D-Trp)被TDO降解,我们在含有60、120或240µM L-Trp的培养基中培养HepG2细胞72小时,并在72小时后测量Trp和Kyn水平[1]。
动物实验
小鼠[2]
所有涉及动物的实验程序均已获得佐治亚州立大学(GSU)机构动物护理和使用委员会的批准。心肌细胞(CM)特异性敲除Ido1(Ido1 mKO)小鼠是通过将floxed Ido1(Ido1 F/F)小鼠与肌钙蛋白T(Tnt)-Cre小鼠杂交而构建的。此外,通过将Ido1 F/F小鼠与Cdh5-Cre或Myh11-Cre小鼠杂交,获得了内皮细胞(EC)或血管平滑肌细胞(VSMC)中Ido1的缺失,并构建了Cdh5-Cre; Ido1 F/F(Ido1 ecKO)或Myh11-Cre; Ido1 F/F(Ido1 vsmcKO)转基因小鼠。Ido1 F/F小鼠的同窝仔鼠用作对照。转基因小鼠和野生型小鼠均为C57BL/6背景,购自Jackson Laboratory(美国缅因州巴港)。根据Jackson方案提取尾部活检DNA进行基因分型。所有小鼠均饲养于佐治亚州立大学温度可控的笼子中,光照周期为12小时光照/12小时黑暗,并可自由获取水和食物。
新生儿心脏心尖切除术[2]
新生小鼠心脏再生模型是通过心脏心尖切除术(AR)建立的,持续3-4周,具体方法见文献9。简而言之,出生后第1天(P1)或第6天(P6)的小鼠经冷冻麻醉3-5分钟。将弯钳伸入胸腔取出心脏。然后,用显微外科剪刀截断左心室心尖,直至心室腔暴露。用8-0缝线缝合小鼠胸腔,并进行保暖直至恢复。整个手术过程大约需要10分钟。假手术组不进行心尖切除。为了探究1-甲基-D-色氨酸(1MT)和犬尿氨酸(Kyn)在心脏再生中的作用,从出生后第1天(P1)起,每隔一天向野生型小鼠腹腔注射1MT(100 mg/kg)和Kyn(100 mg/kg),分别在出生后第2天(P2)和第6天(P6)进行主动脉根部重建手术(AR手术)。等体积的PBS作为溶剂对照。
参考文献
[1]. J Clin Med. 2022 Aug 16;11(16):4794.
[2]. Nat Commun. 2022 Oct 26;13(1):6371.
其他信息
犬尿氨酸是一种酮,是丙氨酸的一个甲基氢被2-氨基苯甲酰基取代后形成的。它是一种人体代谢产物。它是一种取代的苯胺、芳香酮和非蛋白源性α-氨基酸。它是犬尿氨酸酸的共轭酸。
据报道,犬尿氨酸存在于黑腹果蝇、斑点蝾螈和其他有相关数据的生物体中。
犬尿氨酸是一种酮和氨基酸衍生物,由色氨酸2,3-双加氧酶(TDO)或吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)介导的色氨酸氧化合成,具有多种生物学功能,包括血管舒张、免疫调节和神经调节活性。犬尿氨酸是烟酸的前体。此外,犬尿氨酸可进一步代谢为邻氨基苯甲酸、犬尿酸和3-羟基犬尿氨酸;犬尿氨酸的异常生成与神经系统疾病相关的认知缺陷和抑郁症状有关。犬尿氨酸在某些癌细胞类型中过度表达,因此可能作为评估癌症风险的生物标志物。
犬尿氨酸是必需氨基酸色氨酸通过色氨酸-犬尿氨酸途径代谢的产物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H12N2O3
分子量
208.2139
精确质量
208.084
元素分析
C, 57.69; H, 5.81; N, 13.45; O, 23.05
CAS号
343-65-7
PubChem CID
846
外观&性状
Light yellow to yellow solid
密度
1.3±0.1 g/cm3
沸点
466.6±45.0 °C at 760 mmHg
熔点
~235 °C (dec.)
闪点
236.0±28.7 °C
蒸汽压
0.0±1.2 mmHg at 25°C
折射率
1.626
LogP
1.09
tPSA
106.41
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
15
分子复杂度/Complexity
255
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O=C(C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1N([H])[H])C([H])([H])C([H])(C(=O)O[H])N([H])[H]
InChi Key
YGPSJZOEDVAXAB-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H12N2O3/c11-7-4-2-1-3-6(7)9(13)5-8(12)10(14)15/h1-4,8H,5,11-12H2,(H,14,15)
化学名
alpha-2-Diamino-gamma-oxobenzenebutyric acid
别名
DL-Kynurenine; 2-Amino-4-(2-aminophenyl)-4-oxobutanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.03.00
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
1M HCl : 20 mg/mL (~96.05 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.8028 mL 24.0142 mL 48.0284 mL
5 mM 0.9606 mL 4.8028 mL 9.6057 mL
10 mM 0.4803 mL 2.4014 mL 4.8028 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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