| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase (ACAT)
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| 体外研究 (In Vitro) |
Lecimibide (DuP 128)（10 μM，24 h）可以阻断 85% 的 HepG2 细胞的细胞酯化反应 [1]。
研究人员观察到，在HepG2细胞与ACAT抑制剂Lecimibide和CI-1011孵育后，胆固醇合成减少。这可能解释了在食用糖基化形式的柚皮素和橙皮素的大鼠中观察到的肝脏HMG-CoA还原酶活性降低。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在分别饲喂高脂肪和冷冻饲料 36% 和 31% 的猪中，Lecimibide (DuP 128)（静脉注射，2.2 mg/kg/天）显着降低总甘油三酯和极低密度脂蛋白 (VLDL) 甘油三酯浓度。总胆固醇、VLDL胆固醇、LDL胆固醇、HDL胆固醇和LDL apoB含量没有显着影响[2]。
为了进一步检验新合成的胆固醇酯调节肝脏载脂蛋白B（apoB）分泌到血浆中的假设，在7只对照小型猪和7只动物中静脉注射酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶（ACAT）抑制剂Lecimibide/DuP 128（2.2 mg/kg/天）21天后进行了apoB动力学研究。猪被喂食含有脂肪（34%的卡路里；多不饱和/单不饱和/饱和比，1:1:1）和胆固醇（400mg/天；0.1%；0.2mg/kcal）的猪饲料。DuP 128显著降低了总血浆甘油三酯和极低密度脂蛋白（VLDL）甘油三酯浓度，分别降低了36%和31%（P<0.05）。将自体131I-VLDL和125I-LDL同时注射到每头猪体内，并使用多室分析（SAAM II）分析载脂蛋白B动力学数据。VLDL载脂蛋白B库大小减少了26%（0.443对0.599 mg/kg；P<0。001），这完全是由于VLDL载脂蛋白B的产生或分泌速率降低了28%（1.831对2.548 mg/kg/h；P=0.006）。VLDL载脂蛋白B的分解代谢率（FCR）没有变化。低密度脂蛋白载脂蛋白库的大小和产生率不受DuP128治疗的影响。肝微粒体ACAT活性下降了51%（0.44比0.90 nmol/min/mg；P<0.001）。尽管预计肝脏游离胆固醇会增加，随后LDL受体表达和LDL载脂蛋白B FCR都会降低，但这并没有发生。Lecimibide/DuP128治疗使肝脏游离胆固醇浓度降低了12%（P=0.008），LDL载脂蛋白B FCR不受影响。此外，DuP 128治疗没有改变肝甘油三酯的浓度或二酰基甘油酰基转移酶的活性，表明DuP 128对肝甘油三酯代谢没有影响。在我们之前的研究中，对喂食低脂肪、无胆固醇饮食的小型猪进行DuP 128治疗，VLDL载脂蛋白B分泌减少了65%，导致血浆载脂蛋白b减少了60%。我们得出结论，在喂食高脂肪、含胆固醇饮食的小型猪中，Lecimibide对肝脏胆固醇酯合成的抑制作用降低了apoB分泌到血浆中，但与低脂、无胆固醇饮食相比，这种作用减弱了[2]。 |
| 酶活实验 |
脂质合成和CE水解[1]
如前所述，确定[1-14C]油酸或[1-14C]乙酸在细胞脂质中的掺入。通过薄层色谱法分离脂质物种后，测定CE、TG和磷脂（PL）中掺入的放射性。将[14C]油酸掺入CE用作全细胞ACAT活性的测量。在用[14C]油酸（在没有黄酮类化合物的情况下）预孵育24小时以标记细胞内CE池后，测定CE水解。随后在黄酮类化合物存在下孵育2-24小时。后一种孵育是在特定ACAT抑制剂Lecimibide（10μM）存在下进行的，以抑制胆固醇酯化。如上所述测定[14C]-油酸掺入细胞CE。 ACAT1和ACAT2活动[1] 在表达任一酶的AC29细胞中，确定了柚皮素和橙皮素对ACAT1和ACAT2活性的直接影响。在全细胞中，在柚皮素或橙皮素存在或不存在的情况下，在5小时内测量[14C]油酸掺入细胞CE的情况，基本如上所述。在进一步的实验中，从表达ACAT的AC29细胞中分离出微粒体。从平板上刮下细胞，在pH 7.4的含有0.1 M磷酸盐、0.25 M蔗糖、1 mM EDTA、1 mM苯甲基磺酰氟（PMSF）和0.5μg/ml亮肽的冰冷缓冲液中进行超声处理。按照Carr、Parks和Rudel的方法分离微粒体，并在-80°C下冷冻直至分析。根据Billheimer、Tavani和Nes的方法，在外源性胆固醇存在的情况下，使用25-75μg微粒体作为ACAT的来源，测定ACAT活性。将柚皮素和橙皮素溶解在DMSO（每次测定0.5%）中，并在37°C下与胆固醇/曲通WR-1339缓冲液一起加入15分钟，然后与放射性标记的底物孵育10分钟。将结果与使用10μM ACAT抑制剂Lecimibide/DuP 128和CI-1011获得的结果进行比较。此前，我们在HepG2细胞中证实，10μM的Lecimibide/DuP 128或CI-1011分别抑制了85%和61%的细胞酯化反应。此外，Cases等人报告称，在ACAT1和ACAT2杆状病毒感染的昆虫细胞膜中，CI-1011抑制ACAT2的IC50为2.5μM，抑制ACAT1的IC50为10μM。 |
| 动物实验 |
体重为22.3±0.7 kg的小型猪购自当地供应商。适应环境一周后，在脂蛋白周转研究开始前及研究期间，动物饲喂实验饲料21天。在周转研究开始前一周，通过手术将一根内径为1.96 mm的硅胶弹性体（Silastic）导管植入颈外静脉。使用异氟烷（USP）作为麻醉剂，氯胺酮（USP）作为术前麻醉剂。导管内充入7% EDTA-Na2溶液以保持通畅，便于在每次周转研究期间对未麻醉、未限制活动的动物进行样品注射和血液采样。每对猪进行研究，每对猪均为同窝同性猪。七只动物接受了 ACAT 抑制剂 Lecimibide/DuP 128，剂量为 50 mg/天，而七只对照动物仅接受了载体[2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
柑橘类黄酮，如柚皮苷和橙皮素，可在体内降低血浆胆固醇水平。然而，其潜在机制尚未完全阐明。本研究在人肝癌细胞系HepG2中检测了这些黄酮类化合物调节载脂蛋白B（apoB）分泌和细胞胆固醇稳态的能力。与柚皮苷（最高达82%，P < 0.00001）或橙皮素（最高达74%，P < 0.002）孵育24小时后，培养基中apoB的积累呈剂量依赖性下降。apoB分泌减少与细胞胆固醇酯含量降低相关。在黄酮类化合物浓度为200 μM时，胆固醇酯化作用呈剂量依赖性下降，最高达84%（P < 0.0001）。使用稳定转染ACAT1或ACAT2的CHO细胞进行检测发现，两种黄酮类化合物均未表现出对酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶（ACAT）任何形式的选择性抑制作用。然而，在HepG2细胞中，两种黄酮类化合物均能选择性地降低ACAT2 mRNA的表达（降低50%，P < 0.001），而对ACAT1 mRNA的表达无影响。此外，柚皮苷和橙皮素均能降低微粒体甘油三酯转移蛋白（MTP）的活性（降低20%至40%，P < 0.00004）和表达（降低30%至40%，P < 0.02）。两种黄酮类化合物均使低密度脂蛋白 (LDL) 受体 mRNA 水平升高 5 至 7 倍 (P < 0.02)，进而导致 (125)I-LDL 的摄取和降解增加 1.5 至 2 倍。我们得出结论，柚皮苷和橙皮素均能降低用于组装含载脂蛋白 B (apoB) 脂蛋白的脂质的可用性，这种作用是通过以下机制介导的：1) ACAT1 和 ACAT2 活性降低；2) ACAT2 表达选择性降低；以及 3) MTP 活性降低。这些机制与 LDL 受体表达增强共同解释了柑橘类黄酮的降胆固醇特性。[1]
VLDL apoB 生成减少并未转化为 VLDL apoB 向 LDL 的转化减少，也未转化为 LDL apoB 池大小的减少。 VLDL apoB 向 LDL apoB 的转化率以及 VLDL 通量转化为 LDL 的百分比均有所增加。如表 4 和图 1 所示，这似乎并非由 VLDL 颗粒组成或大小分布所致。肝脏 LDL 受体表达的降低与 VLDL 向 LDL 的转化率增加相关。然而，Lecimibide/DuP 128 治疗并未改变 LDL apoB 的通量转化率（主要由 LDL 受体表达决定）或 VLDL apoB 的通量转化率。Lecimibide/DuP 128 可能增加了脂蛋白脂肪酶和/或肝脂肪酶的活性，而这两种酶均调节 VLDL 的转化。然而，本研究并未测量这些酶的活性。 Lecimibide/DuP 128 对 LDL apoB 浓度无影响并非由于 LDL 清除率同时降低所致。理论上，ACAT 的抑制会导致肝脏游离胆固醇调节池的增加，从而降低肝脏 LDL 受体的表达。与我们之前的研究一致，DuP 128 对 LDL apoB 的 FCR 没有影响，并且 DuP 128 处理后肝脏游离胆固醇浓度降低而非升高。这与 ACAT 底物池与调节 LDL 受体表达的游离胆固醇池并非紧密偶联的观点相符 [2]。 |
| 分子式 |
C34H40F2N4OS
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|---|---|
| 分子量 |
590.77
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| 精确质量 |
590.289
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| 元素分析 |
C, 69.12; H, 6.82; F, 6.43; N, 9.48; O, 2.71; S, 5.43
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| CAS号 |
130804-35-2
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| PubChem CID |
71355
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.21g/cm3
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| 折射率 |
1.613
|
| LogP |
9.802
|
| tPSA |
89.81
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
16
|
| 重原子数目 |
42
|
| 分子复杂度/Complexity |
751
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CCCCCCCN(C(NC1=C(F)C=C(F)C=C1)=O)CCCCCSC2=NC(C3=CC=CC=C3)=C(N2)C4=CC=CC=C4
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| InChi Key |
TVXOXGBTADZYCZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C34H40F2N4OS/c1-2-3-4-5-13-22-40(34(41)37-30-21-20-28(35)25-29(30)36)23-14-8-15-24-42-33-38-31(26-16-9-6-10-17-26)32(39-33)27-18-11-7-12-19-27/h6-7,9-12,16-21,25H,2-5,8,13-15,22-24H2,1H3,(H,37,41)(H,38,39)
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| 化学名 |
3-(2,4-difluorophenyl)-1-[5-[(4,5-diphenyl-1H-imidazol-2-yl)sulfanyl]pentyl]-1-heptylurea
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| 别名 |
DuP-128; Lecimibide; 130804-35-2; DuP128; lecimibida; Lecimibide [USAN:INN]; Lecimibide (USAN); UNII-A7T248B302; LECIMIBIDE [INN]; DuP 128; Lecimibide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6927 mL | 8.4635 mL | 16.9271 mL | |
| 5 mM | 0.3385 mL | 1.6927 mL | 3.3854 mL | |
| 10 mM | 0.1693 mL | 0.8464 mL | 1.6927 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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