| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Orismilast is a selective inhibitor of phosphodiesterase 4 (PDE4). It demonstrates potent inhibition of PDE4B and PDE4D subtype splice variants, with IC₅₀ values for most isoforms below 10 nmol/L. The compound shows reduced potency for the PDE4A10 subtype (IC₅₀ = 52 nmol/L) and PDE4C2 subtype (IC₅₀ = 104 nmol/L) [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
Orismilast 可选择性抑制 PDE4，在 308 nmol/L 单一浓度下对 PDE4 的催化结构域显示出接近完全的抑制，而对其他 PDE 家族 (PDE1-3, PDE5-11) 的抑制作用显著较低 [1]。
在放射性 PDE4 谱分析试验中，orismilast 强效抑制多种剪接变体：PDE4B1 (IC₅₀ = 1 nmol/L)、PDE4B2 (IC₅₀ = 6 nmol/L)、PDE4B3 (IC₅₀ = 9 nmol/L)、PDE4D1 (IC₅₀ = 9 nmol/L)、PDE4D2 (IC₅₀ = 5 nmol/L)、PDE4D3 (IC₅₀ = 8 nmol/L)、PDE4D4 (IC₅₀ = 5 nmol/L)、PDE4D5 (IC₅₀ = 8 nmol/L)、PDE4D7 (IC₅₀ = 3 nmol/L)，而对 PDE4A10 (IC₅₀ = 52 nmol/L) 和 PDE4C2 (IC₅₀ = 104 nmol/L) 的抑制效力较弱 [1]。 在人全血试验中，orismilast 抑制 aCD3/aCD28 诱导的 TNFα 释放，IC₅₀ 值为 30 nmol/L [1]。 在人外周血单个核细胞 (PBMC) 试验中，orismilast 抑制 LPS 诱导的 TNFα 释放，IC₅₀ 值为 10 nmol/L [1]。 在使用人 PBMC 的细胞因子谱分析试验中，orismilast 显示出广泛的抗炎作用，抑制 Th1 细胞因子 (IFNγ 相对 IC₅₀ = 4 nmol/L，TNFα 相对 IC₅₀ = 2 nmol/L)、Th2 细胞因子 (IL-13 相对 IC₅₀ = 47 nmol/L，IL-4 相对 IC₅₀ = 124 nmol/L，IL-5 相对 IC₅₀ = 16 nmol/L)、Th17 细胞因子 (IL-17A 相对 IC₅₀ = 71 nmol/L，IL-22 相对 IC₅₀ = 57 nmol/L，IL-23 相对 IC₅₀ = 19 nmol/L) 和先天免疫细胞因子 (IL-1α 相对 IC₅₀ = 10 nmol/L，IL-1β IC₅₀ = 114 nmol/L) 的分泌。在浓度高达 10 μmol/L 时，IL-8 分泌未受抑制。在最高测试浓度 (10 μmol/L) 下，细胞活力未受影响 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在鼠慢性恶唑酮诱导的耳部炎症模型中，口服 orismilast 剂量为 10 mg/kg 和 30 mg/kg 时，随时间推移显著降低了耳厚度（与载体相比，两个剂量的 p 值均 < 0.0001）。30 mg/kg 口服 orismilast 的平均耳厚度减少与 2 mg/kg 地塞米松观察到的结果相当 (AUC = 3.4 天×mm 对比 2.7 天×mm) [1]。
在同一模型中，orismilast 在 10 mg/kg 和 30 mg/kg 剂量下均显著降低了耳组织中的炎症细胞因子浓度，包括 IL-1β、IL-4、IL-5、TNFα、mKC (IL-8 的鼠同源物) 和 IFNγ，与 2 mg/kg 地塞米松相比显示出相当或更大的降低。在治疗期间，orismilast 治疗对体重无影响 [1]。 |
| 酶活实验 |
PDE1-11 酶活性试验：使用固定化金属亲和色谱磷化学 (IMAP) 技术测量了 orismilast 对 PDE1 至 PDE11 的抑制活性，该技术基于纳米颗粒上固定化金属配位复合物对磷酸盐的高亲和力结合。试验使用单一浓度 308 nmol/L 的 orismilast 来确定抑制剂效力，结果以抑制百分比表示。对于 PDE6-AB，使用了放射性测定法代替 IMAP 技术 [1]。
PDE4 亚型谱分析放射性试验：采用基于 Thompson 和 Appleman 两步法并适应于 96 孔板形式的放射性测定法，来确定 orismilast 的 PDE4 抑制谱。通过使用杆状病毒表达系统在 S. frugiperda 昆虫细胞中进行克隆 cDNA 表达，获得了部分纯化的 PDE。研究了四种 PDE4 亚型的多个剪接变体。使用七点、半对数稀释系列的 orismilast 来确定每个剪接变体的 IC₅₀ 值。IC₅₀ 值在 GraphPad Prism 中使用四参数逻辑方程计算。标准抑制剂作为实验质量控制 [1]。 |
| 细胞实验 |
人全血 TNFα 分泌试验：将新鲜采集的肝素抗凝人外周血用 RPMI 培养基稀释，并补充抗 CD3、抗 CD28 和 IL-2。将溶于 DMSO 的 orismilast 与血液混合，使最终 DMSO 浓度为 0.1%，在 37°C、5% CO₂ 条件下孵育 24 小时。培养上清液中的 TNFα 水平通过 AlphaLISA 技术进行定量。血浆等分试样与受体微珠在室温下孵育 2 小时，然后加入供体微珠并继续孵育 3 小时。在 EnVision 检测系统上测量 TNFα 水平 [1]。
人 PBMC TNFα 分泌试验：通过密度梯度离心从血沉棕黄层中分离 PBMC，洗涤、冷冻，然后解冻并悬浮于含 0.1% BSA 的无血清试验培养基中。Orismilast 在 DMSO 中稀释，然后在试验培养基中进一步稀释，并转移到 384 孔组织培养板中。在 LPS 处理 (最终浓度 10 ng/mL) 的 PBMC 培养上清液中，于 37°C 孵育 18 小时后测量 TNFα 水平。通过 AlphaLISA 技术对 TNFα 水平进行定量 [1]。 人 PBMC 中细胞因子抑制谱分析：从血沉棕黄层中分离 PBMC，并重悬于 RPMI-10 培养基中。将细胞接种于白色 96 孔板中，用可溶性抗 CD3（用于检测 IFNγ、IL-13、IL-17A、IL-22、IL-4 和 IL-5）或 LPS（用于检测 IL-1α、IL-1β、IL-23、TNFα 和 IL-8）在最终浓度 1 μg/mL 下进行刺激。细胞与八点稀释系列的 orismilast 或 0.1% DMSO 在 37°C、5% CO₂ 条件下孵育 24 小时（IL-1β 为 72 小时）。使用 12-plex Luminex 方法分析上清液。根据供应商说明使用发光细胞活力试剂盒评估细胞活力，并在酶标仪上进行测量。使用 GraphPad Prism 中的非对称 5PL 曲线计算相对和绝对 IC₅₀ 值 [1]。 |
| 动物实验 |
小鼠慢性恶唑酮模型：雌性BALB/cABomTac小鼠在第7天右耳单次滴注10 μL恶唑酮（0.8%丙酮溶液）进行致敏。7天后，在第0、3、5、7、10、12、14、16、18和20天，对小鼠右耳重复滴注10 μL恶唑酮（0.4%丙酮溶液）。第10天，根据第10天测量的耳厚度，将44只小鼠随机分为三组，分别接受赋形剂、对照或口服奥利司他治疗。从第10天到第20天，小鼠分别口服给予赋形剂（甲基纤维素）（n=10）、10 mg/kg和30 mg/kg的奥瑞司特（每组n=10）或2 mg/kg的地塞米松（n=10）。另取4只小鼠作为未致敏、未治疗的对照组。分别于第10、12、14、17、19和21天使用千分尺测量耳廓厚度。在异氟烷麻醉下，于末次给药后2小时通过心脏穿刺采集一份药代动力学血样，以测定血清中奥瑞司特的浓度。血清经离心分离后，采用液相色谱-质谱联用技术进行浓度分析。另取右耳组织样本测定细胞因子浓度。称重后，将组织转移到含有蛋白酶抑制剂的冰冷无菌 0.9% NaCl 的冷冻管中，匀浆，离心。使用小鼠 Th1/Th2 组织试剂盒 [1] 进行细胞因子分析。
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| 参考文献 |
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| 分子式 |
C19H15CL2F2NO7S
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|---|---|
| 分子量 |
510.28
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| 精确质量 |
508.991
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| 元素分析 |
C, 44.72; H, 2.96; Cl, 13.89; F, 7.45; N, 2.74; O, 21.95; S, 6.28
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| CAS号 |
1353546-86-7
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| PubChem CID |
54765967
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
788.8±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
430.9±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.649
|
| LogP |
0.82
|
| tPSA |
113
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
788
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CS(=O)(=O)CCC12OC3=C(C=CC(=C3O2)OC(F)F)C(=O)CC4=C(C=[N+](C=C4Cl)[O-])Cl
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| InChi Key |
ZININGNRPUGNSL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H15Cl2F2NO7S/c20-12-8-24(26)9-13(21)11(12)7-14(25)10-1-2-15(29-18(22)23)17-16(10)30-19(31-17)3-5-32(27,28)6-4-19/h1-2,8-9,18H,3-7H2
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| 化学名 |
2-(3,5-dichloro-1-oxidopyridin-1-ium-4-yl)-1-[7-(difluoromethoxy)-1',1'-dioxospiro[1,3-benzodioxole-2,4'-thiane]-4-yl]ethanone
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| 别名 |
LEO32731; Orismilast; UNII-JH1CX8SG5V; LEO-32,731; JH1CX8SG5V; 1353546-86-7; Orismilast; LEO 32731; LEO-32731
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~195.97 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9597 mL | 9.7985 mL | 19.5971 mL | |
| 5 mM | 0.3919 mL | 1.9597 mL | 3.9194 mL | |
| 10 mM | 0.1960 mL | 0.9799 mL | 1.9597 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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