The primary role of Levomefolic acid (5-methyltetrahydrofolate) is as a methyl donor for homocysteine (Hcy) in its remethylation to methionine, a key step connecting the folate cycle and homocysteine metabolism. [2]

试剂 Glu406、Ile418、Lys417 和 Tyr453 与左旋甲基叶酸 (5-MTHF) 相互作用。Lys417 和 Tyr453 在 S1 与 ACE 的相互作用中具有重要的生理意义，并可能作为 S1 的潜在抑制剂，抑制 ACE2 与 SARS-CoV-2 病毒的相互作用 [1]。左旋甲基叶酸 (5-MTHF) (50 nM，72 小时) 可将人淋巴母细胞系 (LCL) 中的细胞内叶酸代谢活性提高 7 倍，是叶酸的 2 倍。这使其成为一种有效的叶酸补充剂[2]。

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在一项研究中，研究人员将人淋巴母细胞系 (LCL) 在无叶酸培养基中培养 7 天，然后用等摩尔浓度 (50 mM) 的叶酸 (FA) 或左旋甲基叶酸钙盐处理 72 小时，并测量了细胞内生物活性叶酸 (5-Me-THF) 的浓度。FA 处理使细胞内 5-Me-THF 浓度增加了近两倍（从 0.028 ± 0.010 ng/mg 蛋白增加到 0.054 ± 0.040 ng/mg 蛋白，p = 0.043）。相比之下，使用相同浓度的左旋甲基叶酸钙盐处理后，细胞内 5-甲基四氢叶酸 (5-Me-THF) 含量增加了七倍（从 0.028 ± 0.010 ng/mg 蛋白增加到 0.196 ± 0.137 ng/mg 蛋白，p < 0.0001）。这表明，在本体外模型中，左旋甲基叶酸比叶酸更能有效地提高细胞内具有生物活性的叶酸水平。[2]

细胞培养和处理：本研究使用由健康成年人新鲜淋巴细胞制备的人类淋巴母细胞系（LCL）。细胞培养于添加了10%胎牛血清、4 mM L-谷氨酰胺、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的RPMI 1640培养基中。实验中，首先将细胞在不含叶酸的RPMI 1640培养基（添加相同补充剂）中培养扩增7天，以诱导叶酸缺乏。随后，将叶酸耗竭的细胞分别用50 mM叶酸或50 mM左旋甲基叶酸钙盐处理72小时。处理后，收集1000万个细胞，用PBS洗涤，并在含有抗氧化剂（15 mg/mL DTT、100 μg/mL抗坏血酸和100 μg/mL柠檬酸）的MilliQ水中裂解，以确保分析物的稳定性。[2]

吸收、分布和排泄
L-甲基叶酸在近端小肠通过主动质子偶联叶酸转运蛋白 (PCFT) 吸收，该转运蛋白可转运氧化型和还原型叶酸。被动扩散也发生在近端和远端小肠。健康女性单次口服 906 nmol L-甲基叶酸后，血浆峰浓度平均为 39.4 nmol/L。它主要通过肾脏或粪便排泄。由于超过 99% 的组织叶酸以多聚谷氨酸的形式存在，因此只有少量排泄的 L-甲基叶酸以原形排出。一部分 L-甲基叶酸分泌到胆汁中。它以游离形式或与血浆蛋白松散结合的形式循环。代谢/代谢物 L-甲基叶酸在维生素B12依赖性酶蛋氨酸合成酶的作用下进一步转化为四氢叶酸（THF），然后通过叶酸多谷氨酸合成酶（FPG）高效转化为多谷氨酸。多谷氨酸形式的叶酸是参与叶酸依赖性反应的酶的更有效底物。

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生物半衰期
连续7天每日口服5毫克L-甲基叶酸后，平均消除半衰期约为3小时。

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左旋甲基叶酸被认为是叶酸的生物活性形式，也是血浆中的主要形式。它可以直接作为补充剂吸收，无需修饰，这与需要水解的多谷氨酸形式的膳食叶酸或需要酶促还原才能激活的叶酸不同。[2]

蛋白质结合

约56%与血浆蛋白结合。

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[1]. Virtual screening and molecular dynamics study of approved drugs as inhibitors of spike protein S1 domain and ACE2 interaction in SARS-CoV-2. J Mol Graph Model. 2020 Dec;101:107716.

[2]. Simultaneous quantification of intracellular concentrations of clinically important metabolites of folate-homocysteine cycle by LC-MS/MS. Anal Biochem. 2020 Sep 15;605:113830.

5-甲基四氢叶酸是5,6,7,8-四氢叶酸5位甲基取代的衍生物。它是人体代谢产物，功能上与5,6,7,8-四氢叶酸相关，是5-甲基四氢叶酸(2-)的共轭酸。5-甲基四氢叶酸是四氢叶酸的甲基化衍生物。L-甲基叶酸（INN）由亚甲基四氢叶酸还原酶以5,10-亚甲基四氢叶酸为底物生成，并由5-甲基四氢叶酸-同型半胱氨酸甲基转移酶（也称为蛋氨酸合成酶）催化同型半胱氨酸还原为蛋氨酸。 L-甲基叶酸是叶酸（维生素B9）的代谢产物，也是食物和血液循环中叶酸的主要活性形式，占人体血浆中总叶酸的98%。它能穿过包括血脑屏障在内的多种细胞膜，进入不同的组织，并在DNA合成、半胱氨酸循环和同型半胱氨酸的调节中发挥重要作用。在组织中，它能甲基化同型半胱氨酸生成蛋氨酸和四氢叶酸（THF）。L-甲基叶酸已被批准作为食品添加剂，并被认定为GRAS（公认安全）化合物。L-甲基叶酸以钙盐结晶形式（Metafolin®）上市，其稳定性足以用作膳食补充剂。由于L-甲基叶酸不太可能掩盖维生素B12缺乏的症状，因此比叶酸更适合作为补充剂。 5-甲基四氢叶酸是存在于大肠杆菌（K12菌株、MG1655菌株）中或由其产生的代谢产物。L-甲基叶酸是叶酸的类似物。已有关于L-甲基叶酸对人体影响的报道和数据。L-甲基叶酸是一种营养补充剂，含有维生素B9叶酸的生物活性形式——5-甲基四氢叶酸（L-甲基叶酸），具有潜在的抗肿瘤活性。服用后，L-甲基叶酸可提供甲基，从而提高某些促肿瘤基因启动子区域的DNA甲基化水平，逆转这些基因的低甲基化并使其失活。这可能导致肿瘤细胞增殖和肿瘤进展的减少。此外，服用L-甲基叶酸可能增强其他化疗药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用。与叶酸不同，L-甲基叶酸可以穿过血脑屏障，这可能对脑肿瘤的治疗有益。某些基因的DNA低甲基化会导致染色体不稳定，并促进肿瘤的发生和发展。
另见：5-甲基四氢叶酸（注：已移至此处）。

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药物适应症
用于治疗和预防叶酸缺乏症，以及作为叶酸拮抗剂的解毒剂。 L-甲基叶酸已添加到口服避孕药中，以降低服用该产品期间或之后不久受孕的孕妇因叶酸缺乏而导致神经管缺陷的风险。目前正在研究其作为心血管疾病治疗药物和抗抑郁药辅助疗法的用途。作用机制：L-甲基叶酸在同型半胱氨酸甲基化为蛋氨酸的过程中起着至关重要的作用，在维生素B12依赖性蛋氨酸合成酶催化的反应中作为甲基供体。同型半胱氨酸必须通过转硫途径进一步代谢，经由维生素B6依赖的过程转化为半胱氨酸、牛磺酸和谷胱甘肽，或重新甲基化为蛋氨酸。L-甲基叶酸重新甲基化同型半胱氨酸生成的蛋氨酸会进一步代谢为下游代谢物S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）。SAMe参与多种生化甲基供体反应，包括单胺类神经递质的合成。研究表明，血浆中高水平的同型半胱氨酸与动脉斑块形成增加相关。药效学方面，L-甲基叶酸是叶酸的活性代谢物，也是一碳代谢中的甲基供体。它调节重要的细胞功能，例如DNA生物合成、基因表达调控、氨基酸合成和代谢以及髓鞘合成和修复。作为唯一能够穿过血脑屏障的叶酸形式，左旋叶酸在多巴胺、血清素和去甲肾上腺素等单胺类神经递质的合成中发挥辅助因子的作用。左旋叶酸也参与红细胞生成。

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左旋甲基叶酸（5-甲基四氢叶酸，5-Me-THF）是血浆和细胞内主要的生物活性叶酸形式。它作为甲基供体，在同型半胱氨酸再甲基化为蛋氨酸的过程中发挥着关键作用，将叶酸循环与同型半胱氨酸代谢联系起来。它与叶酸一样，是应用最广泛的叶酸补充剂之一。与叶酸不同，叶酸必须经过一系列酶促反应转化为活性形式（首先转化为二氢叶酸，然后转化为四氢叶酸，最后代谢为5-甲基四氢叶酸），而左旋甲基叶酸本身就是活性形式，可被人体直接利用。本研究的体外实验结果支持这一观点，表明补充左旋甲基叶酸可显著提高细胞内活性叶酸水平，其效果远优于补充等摩尔浓度的叶酸。[2]

C20H25N7O6

459.46

459.186

31690-09-2

Levomefolic acid-13C,d3;1356019-94-7;Levomefolate calcium;151533-22-1;Levomefolic acid-13C5;2687960-08-1

135398561

Light yellow to yellow solid powder

1.6±0.1 g/cm3

1.733

-2.61

202.77

7

10

9

33

865

2

CN1[C@H](CNC2=C1C(=O)NC(=N2)N)CNC3=CC=C(C=C3)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O

ZNOVTXRBGFNYRX-STQMWFEESA-N

InChI=1S/C20H25N7O6/c1-27-12(9-23-16-15(27)18(31)26-20(21)25-16)8-22-11-4-2-10(3-5-11)17(30)24-13(19(32)33)6-7-14(28)29/h2-5,12-13,22H,6-9H2,1H3,(H,24,30)(H,28,29)(H,32,33)(H4,21,23,25,26,31)/t12-,13-/m0/s1

(2S)-2-[[4-[[(6S)-2-amino-5-methyl-4-oxo-3,6,7,8-tetrahydropteridin-6-yl]methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid

LMSR Levomefolinic acidLevomefolinic acid Metafolin BodyfolinNutrifolin Levomefolate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~2.08 mg/mL (~4.53 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。