LL-37

FPRL1 (formyl peptide receptor‑like 1)
Other: binds to apolipoprotein A‑I (in serum) [1][2][3]

LL-37 (40 μM) 在水中呈现无序结构；添加 15 mM HCO₃⁻、SO₄²⁻ 或 CF₃CO₂⁻ 可诱导其形成 α-螺旋构象（螺旋度约为 40%）。160 mM NaCl 可降低螺旋度。螺旋含量与对巨大芽孢杆菌和大肠杆菌的抗菌活性相关。LL-37 对大肠杆菌 D21 的 MIC 为 5 μM。在 13-25 μM 浓度下，LL-37 对克氏锥虫锥鞭毛体、MOLT T 细胞和外周血淋巴细胞具有细胞毒性（细胞活力下降至约 20-60%，具体数值取决于浓度）。LL-37 可诱导人单核细胞中 Ca²⁺ 内流（剂量依赖性）。在 RAW 264.7 巨噬细胞中，LL-37 (5 μg/ml) 可抑制 LPS 诱导的 TNF-α 释放。在 NIH3T3 成纤维细胞中，LL-37/CS 水凝胶 (10-100 ng/ml) 未显示细胞毒性。LL-37 (5 μg/ml) 可抑制金黄色葡萄球菌生长约 40%。在伤口组织中，LL-37 可上调 HIF-1α、VEGF-A 和 TGF-β1 的 mRNA 和蛋白表达，并下调 IL-6 和 TNF-α 的表达。[1][4] 在趋化性试验中，LL-37 (10⁻⁵ M 为最佳浓度) 可诱导人单核细胞（10 μM 时 CI 值约为 495）和中性粒细胞的迁移；棋盘格分析证实趋化作用而非趋动作用。LL-37 (10⁻⁵ M) 可诱导 FPRL1/293 细胞中 Ca²⁺ 内流。与 Su 肽（FPRL1 激动剂）的交叉脱敏实验证实了受体的使用。[2] LL-37 在 10 mM 磷酸钠、0.75% TSB 培养基中，于 37 °C 下 1 小时内可杀死伴放线放线杆菌 (ED₉₉ 8.2-11.6 μg/ml) 和噬二氧化碳菌属 (ED₉₉ 7.5-11.0 μg/ml)。戊酰胺-37（氨基化形式）显示出类似的功效。 ≥100 mM NaCl 可抑制杀伤作用（400‐600 mM 时可完全抑制），≥10% 人 AB 血清可抑制杀伤作用。[3]

皮下注射LL-37（20 μg）可加速小鼠深部组织压疮的愈合：第21天伤口面积缩小至79.78%，而对照组为33.05%。LL-37/CS水凝胶（含20 μg LL-37）在第21天伤口面积缩小至8.96%。组织学分析显示，第15天LL-37组的上皮厚度（42.90 μm）和毛细血管密度（每视野16条）均增加，而对照组为7.33条；第21天，LL-37组的毛细血管数量为26条，而对照组为13.33条。LL-37可上调VEGF-A、HIF-1α和TGF-β1的mRNA和蛋白水平，并下调IL-6和TNF-α的表达。 [4]
在血清抑制研究中，LL-37（1 μg/μl 水溶液，3 μl 上样）对大肠杆菌 D21 的抗菌活性在溶解于人血清后丧失；抑菌圈直径在水中为 10.5 mm，而在人血清中为 0 mm。猪血清可部分降低其活性。LL-37（50 μM）的细胞毒活性在 40% 人血清存在下从 81% 的细胞死亡率降低至 38%。[1]

细胞活力检测：将 LL-37 或 LL-37/CS 水凝胶接种于 96 孔板中，在 NIH3T3 细胞（1×10⁵ 个细胞/ml）上培养 24 或 48 小时；采用 CCK-8 法测定 450 nm 波长处的吸光度。[4]
巨噬细胞 TNF-α 释放：将 RAW 264.7 细胞（1×10⁵ 个）用 LPS（20 ng/ml）加 LL-37（5 μg/ml）或水凝胶处理 18 小时；采用 ELISA 分析上清液。[4]
抗菌活性检测：将金黄色葡萄球菌（1×10⁵ 个）与 LL-37（5 μg/ml）在 PBS 中于 37 °C 孵育 6 小时；将稀释液涂布于LB琼脂平板上，24小时后计数菌落。[4]
趋化性测定：48孔微趋化室；细胞（单核细胞/中性粒细胞1×10⁶/ml，T细胞5×10⁶/ml）溶于RPMI+1% BSA培养基；聚碳酸酯膜（5 μm）；孵育时间分别为：中性粒细胞60分钟，单核细胞90分钟，T细胞180分钟；计数每个高倍视野下的迁移细胞。[2]
Ca²⁺动员：细胞（10⁷/ml）用Fura-2（5 μM）在24℃下孵育30分钟；重悬于生理盐水缓冲液中；测量荧光比值（340/380 nm）。 [2]
杀菌试验：将细菌（1×10⁶/ml）接种于 10 mM 磷酸钠缓冲液（pH 7.0）、0.75% TSB 中；加入 LL-37，于 37 °C 孵育 1 小时；用 PBS+0.5% FBS 终止反应；使用螺旋涂布仪进行涂布；于 37 °C、5% CO₂ 条件下培养 48 小时后计数菌落形成单位 (CFU)。测定 ED₉₉。[3]

小鼠深部组织损伤模型：成年雄性C57BL/6小鼠（6-8周龄，约20 g）。剃除右后肢毛发。将磁铁（直径12 mm，厚度5 mm，2.4 g，磁力1000 G）置于臀浅肌区域，采用12小时加压/12小时自由活动模式。实验开始一天后，小鼠在磁铁作用下皮下注射LL-37（20 μg）、LL-37/CS水凝胶（20 μg LL-37）或单独的CS水凝胶至深部组织（每组n=6）。对照组仅接受磁铁刺激。分别于第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21天测量伤口面积；愈合率=（第X天伤口面积/第3天伤口面积）×100%。小鼠于第21天处死。[4]
抑菌圈试验：在含盐的LB肉汤或E培养基中加入1%琼脂糖；接种细菌（6×10⁴个细胞/ml）；将肽稀释系列（起始浓度为5 μg/μl，溶于水）加入孔（直径3 mm，体积3 μl）；30℃孵育过夜；测量抑菌圈直径。[1]
血清抑制试验：将LL-37溶于水、人血清或猪血清中，浓度为1 μg/μl；取3 μl加入孔中；试验方法同上。[1]

在无血清条件下，50 μM 的 LL-37 可导致 81% 的人外周血白细胞 (PBL) 失活；在 40% 人血清中，失活率为 38%。细胞毒性通过 FDA 染色和流式细胞术进行检测。[1]
LL-37 可被人血清抑制：溶于人血清后抗菌活性完全丧失（抑菌圈直径为 0 mm，而溶于水时为 10.5 mm）。猪血清可部分降低其活性。在人血浆中 20 小时后未观察到蛋白水解降解（HPLC 和质谱分析结果不变）。[1]
在杀菌试验中，10 μg/ml 的 LL-37 对伴放线放线杆菌 (A. actinomycetemcomitans) 的杀灭作用可被 10% 热灭活的 AB 型人血清完全抑制。Pentamide-37 对血清抑制的敏感性较低。[3]

[1]. Conformation-dependent antibacterial activity of the naturally occurring human peptide LL-37. J Biol Chem. 1998 Feb 6;273(6):3718-24.

[2]. LL-37, the neutrophil granule- and epithelial cell-derived cathelicidin, utilizes formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1) as a receptor to chemoattract human peripheral blood neutrophils, monocytes, and T cells. J Exp Med. 2000 Oct 2;192(7):1069-74.

[3]. Sensitivity of Actinobacillus actinomycetemcomitans and Capnocytophaga spp. to the bactericidal action of LL-37: a cathelicidin found in human leukocytes and epithelium. Oral Microbiol Immunol. 2000 Aug;15(4):226-31.

[4]. Chitosan hydrogel encapsulated with LL-37 peptide promotes deep tissue injury healing in a mouse model. Mil Med Res. 2020 Apr 22;7(1):20.

LL-37（CAS# 597562-32-8）是hCAP-18（目前已知的唯一人类cathelicidin）的成熟抗菌C端肽。它储存在中性粒细胞特异性颗粒中，并在炎症（例如银屑病）期间在角质形成细胞中诱导表达。该肽需要弹性蛋白酶的蛋白水解激活。阴离子（SO₄²⁻、HCO₃⁻）和寡聚化（推测为四聚体）可诱导其形成α螺旋构象。低pH值（<5）会使螺旋结构展开；高pH值（>13）则能保持螺旋结构。LL-37可与血清中的载脂蛋白A-I结合，从而抑制其抗菌和细胞毒活性。LL-37还可通过FPRL1发挥趋化作用，参与先天性和适应性免疫反应。在深部组织损伤模型中，LL-37/CS水凝胶通过抗炎和血管生成（HIF-1α/VEGF通路）促进伤口愈合。[1][2][3][4]

C205H341N61O52

4492.2785

4605.59

597562-32-8

137699680

Typically exists as solid at room temperature

1940

69

69

166

325

10700

39

CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N3CCC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CC4=CC=CC=C4)NC(=O)[C@H](CC5=CC=CC=C5)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N.C(=O)(C(F)(F)F)O

YCAOMMPDUJYSPT-YLLLKHBJSA-N

InChI=1S/C205H341N61O52.C2HF3O2/c1-20-114(16)162(262-180(298)128(66-40-46-86-211)236-177(295)135(74-78-155(274)275)244-171(289)125(63-37-43-83-208)242-193(311)149(107-268)259-175(293)126(64-38-44-84-209)235-172(290)129(67-47-87-226-201(216)217)241-186(304)142(98-119-55-29-24-30-56-119)253-188(306)144(100-121-59-33-26-34-60-121)254-190(308)146(102-158(280)281)234-154(273)104-231-168(286)138(94-109(6)7)249-167(285)122(212)93-108(4)5)195(313)232-105-153(272)233-123(61-35-41-81-206)169(287)243-136(75-79-156(276)277)178(296)252-141(97-118-53-27-23-28-54-118)185(303)239-124(62-36-42-82-207)170(288)237-131(69-49-89-228-203(220)221)182(300)264-164(116(18)22-3)198(316)260-160(112(12)13)196(314)247-134(73-77-151(213)270)176(294)238-132(70-50-90-229-204(222)223)181(299)263-163(115(17)21-2)197(315)246-127(65-39-45-85-210)173(291)257-147(103-159(282)283)191(309)255-143(99-120-57-31-25-32-58-120)187(305)250-139(95-110(8)9)184(302)240-130(68-48-88-227-202(218)219)174(292)256-145(101-152(214)271)189(307)251-140(96-111(10)11)192(310)261-161(113(14)15)200(318)266-92-52-72-150(266)194(312)245-133(71-51-91-230-205(224)225)183(301)265-165(117(19)269)199(317)248-137(76-80-157(278)279)179(297)258-148(106-267)166(215)284;3-2(4,5)1(6)7/h23-34,53-60,108-117,122-150,160-165,267-269H,20-22,35-52,61-107,206-212H2,1-19H3,(H2,213,270)(H2,214,271)(H2,215,284)(H,231,286)(H,232,313)(H,233,272)(H,234,273)(H,235,290)(H,236,295)(H,237,288)(H,238,294)(H,239,303)(H,240,302)(H,241,304)(H,242,311)(H,243,287)(H,244,289)(H,245,312)(H,246,315)(H,247,314)(H,248,317)(H,249,285)(H,250,305)(H,251,307)(H,252,296)(H,253,306)(H,254,308)(H,255,309)(H,256,292)(H,257,291)(H,258,297)(H,259,293)(H,260,316)(H,261,310)(H,262,298)(H,263,299)(H,264,300)(H,265,301)(H,274,275)(H,276,277)(H,278,279)(H,280,281)(H,282,283)(H4,216,217,226)(H4,218,219,227)(H4,220,221,228)(H4,222,223,229)(H4,224,225,230);(H,6,7)/t114-,115-,116-,117+,122-,123-,124-,125-,126-,127-,128-,129-,130-,131-,132-,133-,134-,135-,136-,137-,138-,139-,140-,141-,142-,143-,144-,145-,146-,147-,148-,149-,150-,160-,161-,162-,163-,164-,165-;/m0./s1

(4S)-5-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S,3S)-1-[[2-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-carboxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid;2,2,2-trifluoroacetic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。