| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The research investigates its anti-inflammatory effects on LPS-activated human neutrophils, involving modulation of surface markers (CD16, CD62L), cytokine expression (TNF-α, IL-6, IL-8), and nitric oxide (NO) production. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
与仅用LPS处理的细胞相比，用25 μM的米特拉菲林处理LPS激活的人原代中性粒细胞可显著降低亚硝酸盐的生成（降低54%，p < 0.05），接近NOS抑制剂L-NAME的处理水平。同时，iNOS mRNA的表达也显著下调（降低67%，p < 0.01）。[1] - 米特拉菲林显著下调LPS激活的中性粒细胞中促炎细胞因子的基因表达：IL-6降低83%（p < 0.05），IL-8降低37%（p < 0.05），TNF-α降低53%（p < 0.05）。 [1]
- 与基因表达数据一致，米特拉菲林显著降低了LPS激活的中性粒细胞中这些细胞因子的分泌：IL-6降低了62%（p < 0.05），IL-8降低了79%（p < 0.05），TNF-α降低了65%（p < 0.05）。[1] - 中性粒细胞表面标志物的流式细胞术分析显示，LPS激活几乎完全耗竭了CD16⁺CD62L⁺细胞群（降低了98%，p < 0.001），使细胞向活化表型转变。与米特拉菲林共同孵育可部分逆转这种效应，使 CD16⁺CD62L⁺ 细胞群占总中性粒细胞的比例增加至 10-15% (p < 0.05)，表明中性粒细胞表型向炎症反应较弱的方向转变。[1] |
| 细胞实验 |
细胞毒性试验（MTT）：将人中性粒细胞接种于96孔板（1×10⁵个细胞/孔），并用不同浓度的米特拉菲林（0、15、25、35、45、75、100 μM）孵育6小时和24小时。以星形孢菌素（1 nM）作为对照。采用MTT比色法测定细胞活力。IC₅₀（抑制细胞活力50%所需的浓度）在6小时时为50 μM，在24小时时为35 μM。选择25 μM作为无毒浓度用于后续实验。 [1]
- 中性粒细胞的分离和培养：采用葡聚糖沉降法和Ficoll-Histopaque梯度离心法从健康志愿者的外周静脉血中分离人中性粒细胞，随后进行低渗裂解去除红细胞。台盼蓝染色排除法纯度>97%。将细胞悬浮于含补充剂和1%热灭活胎牛血清的RPMI 1640培养基中，并以3×10⁶个细胞/mL的密度接种。[1] - 细胞刺激和处理：将中性粒细胞预先用或不用米特拉菲林（25 μM）处理30分钟，然后用LPS（0.1 μg/mL，来自大肠杆菌O55:B5）刺激6小时。 [1] - 亚硝酸盐/一氧化氮测定：将培养上清液与 Griess 试剂混合，室温孵育 15 分钟。使用酶标仪在 540 nm 波长处测定亚硝酸盐浓度（作为 NO 生成的指标）。结果根据亚硝酸钠标准曲线推算，并以仅用 LPS 处理的对照组的百分比表示。[1] - 流式细胞术检测表面标志物：将中性粒细胞（10⁶ 个细胞）与 FITC 标记的抗人 CD62L 抗体和 PE 标记的抗人 CD16 抗体室温孵育 15 分钟。用 FACS 裂解液裂解红细胞。使用 FACS Canto II 流式细胞仪测量荧光强度。中性粒细胞被定义为FSCʰⁱᵍʰSSCʰⁱᵍʰCD16ʰⁱᵍʰ细胞，并对每个样本中的10,000个细胞测量平均荧光强度（MFI）。[1] - RNA分离和qRT-PCR：使用Trisure试剂提取总RNA。将1 μg RNA反转录为cDNA。使用Brilliant SYBR Green QPCR Supermix和TNF-α、IL-6、IL-8以及管家基因（GAPDH、β-actin）的特异性引物进行实时PCR。采用2⁻⁽ΔΔCt⁾法计算mRNA的相对表达量。 [1] - ELISA法细胞因子定量：使用商业化的ELISA试剂盒，按照制造商的说明，测定细胞培养上清液中TNF-α、IL-6和IL-8的水平。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
采用 MTT 法评估了米特拉菲林对人原代中性粒细胞的细胞毒性。计算得到的 IC₅₀ 值在处理 6 小时后为 50 μM，在处理 24 小时后为 35 μM。确定 25 μM 的浓度无毒，并用于所有后续功能实验。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
米特拉菲林属于吲哚嗪类化合物。据报道，它存在于钩藤（Uncaria tomentosa）、四蕊头花（Cephalanthus tetrandrus）以及其他具有相关数据的生物体中。另见：钩藤（Uncaria tomentosa）（部分）；帽柱木（Mitragyna speciosa）叶（部分）。
米特拉菲林是钩藤（Uncaria tomentosa，猫爪藤）树皮中的主要五环吲哚生物碱，钩藤是一种传统民间医学中用于治疗炎症性疾病、关节炎和癌症的植物。[1] - 本研究表明，米特拉菲林可以调节原代人中性粒细胞的活化，使其向炎症反应较低的表型转变。这体现在 CD62L 脱落减少（导致 CD16⁺CD62L⁺ 细胞群增加）、一氧化氮生成减少（通过 iNOS 下调）以及关键促炎细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-8）的表达和分泌减少。[1] 研究结果表明，帽柱木碱 (Mitraphylline) 有助于发挥毛叶乌头提取物的抗炎特性。通过调节中性粒细胞活化并促进炎症减轻，帽柱木碱可能对中性粒细胞发挥关键作用的慢性炎症性疾病具有潜在的治疗价值。[1] |
| 分子式 |
C21H24N2O4
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|---|---|
| 分子量 |
368.4263
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| 精确质量 |
368.174
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| CAS号 |
509-80-8
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| PubChem CID |
94160
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.33 g/cm3
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| 沸点 |
555.2ºC
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| 熔点 |
258-267 °C
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| 闪点 |
289.6ºC
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| 折射率 |
1.635
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| LogP |
2.138
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| tPSA |
67.87
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
692
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| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
C[C@H]1[C@H]2CN3CC[C@]4([C@@H]3C[C@@H]2C(=CO1)C(=O)OC)C5=CC=CC=C5NC4=O
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| InChi Key |
JMIAZDVHNCCPDM-DAFCLMLCSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H24N2O4/c1-12-14-10-23-8-7-21(16-5-3-4-6-17(16)22-20(21)25)18(23)9-13(14)15(11-27-12)19(24)26-2/h3-6,11-14,18H,7-10H2,1-2H3,(H,22,25)/t12-,13-,14+,18-,21+/m0/s1
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| 化学名 |
methyl (1S,4aS,5aS,6R,10aR)-1-methyl-2'-oxospiro[1,4a,5,5a,7,8,10,10a-octahydropyrano[3,4-f]indolizine-6,3'-1H-indole]-4-carboxylate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~6.76 mg/mL (~18.35 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7142 mL | 13.5711 mL | 27.1422 mL | |
| 5 mM | 0.5428 mL | 2.7142 mL | 5.4284 mL | |
| 10 mM | 0.2714 mL | 1.3571 mL | 2.7142 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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