| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
NNRTI (nonnucleoside reverse transcriptase inhibitor); HIV-1 (IC50 = 0.23 nM for WT); 0.39 nM for Y181C; 0.40 nM for K103N
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）是治疗人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染的主要疗法。然而，NNRTIs的有效性可能会受到耐药突变的发展的阻碍，这些突变会赋予对同类药物的交叉耐药。已经作出了广泛的努力，以确定能够抑制流行的nnrti耐药病毒复制的新的nnrti。MK-4965是一种具有二芳基醚和茚唑基团的新型NNRTI。该化合物在亚纳摩尔浓度下对野生型（WT）、K103N和Y181C逆转录酶（RT）具有抑制作用。MK-4965对WT病毒和两种最常见的nnrti耐药病毒（携带K103N或Y181C突变的病毒）也有很强的抗性，在10%胎牛血清存在下，其95%有效浓度(EC(95)s) <30 nM。当MK-4965在50%的人血清中测试时，其抗病毒EC（95）降低了约4至6倍。此外，MK-4965与15种具有NNRTI耐药相关突变的病毒进行了评估，显示出优于依非韦伦的突变谱，但不优于依曲维林的突变谱。MK-4965对各种HIV-1亚型和含有核苷逆转录酶抑制剂或蛋白酶抑制剂耐药突变的病毒同样有效。一项双药联合研究表明，MK-4965的抗病毒活性与18种fda批准的药物均无拮抗作用，本研究反之亦然。综上所述，这些体外数据表明，MK-4965具有进一步开发用于治疗HIV-1感染的新型NNRTI所需的特性。[１]
|
| 酶活实验 |
HIV-1 RT生化试验。[1]
ECL RT生化分析是在先前描述的方案的基础上进行的。简单地说，将HIV-1 RT酶（10 pM）与抑制剂或二甲基亚砜（10%）联合在实验缓冲液（50 mM Tris-HCl, pH 7.8）中，然后在室温下孵育30分钟。通过添加生物素化模板引物底物（5 nM）和脱氧核苷三磷酸（0.6 μM的dATP， dGTP和dCTP）引发聚合反应；20nm钌烯化dUTP)。37℃下反应90 min，加入10 μl 1 N NaOH终止反应。得到的溶液在室温下再孵育30分钟，然后用10 μl的1n HCl中和。加入链霉亲和素包被磁珠（80 μg/ml）捕获产物和未反应底物。根据ECL M-384仪器测量的ECL信号确定产品的定量。 |
| 细胞实验 |
HIV多周期复制试验。[1]
MK-4965< strong> 在基因定义的WT HIV-1和三种突变的实验室病毒（K103N, Y181C，以及K103N和Y181C）的细胞培养多周期复制试验中进行了测试。用添加10%牛血清或50%人血清（HS）的细胞培养基进行抗病毒活性测定。MK-4965被稀释到合适的培养基中，在833 nM至0.32 nM的浓度范围内进行测试。 抗病毒试验用实验室HIV-1分离物、R8和MT-4人t淋巴样细胞的变体进行。细胞（2.5 × 105个细胞/孔）在没有抑制剂的情况下以低感染倍数用病毒储存液感染，并在37°C 5% CO2气氛中孵育。24小时后，将感染的细胞洗净，用新鲜培养基（含10% FBS的RPMI 1640或含50% AB HS的RPMI 1640）重悬，以每125 μl 5 × 104个细胞的速度接种于96孔细胞培养板中。MK-4965以连续三倍稀释加入井中。以NNRTIs的EFV、NVP和ETV作为比较物。细胞再孵育72小时，用Perkin-Elmer公司的Alphascreen试剂盒测定培养基中病毒核心p24抗原的产生水平，以评估单个培养孔中的病毒产量。95%抑制病毒的有效浓度（EC95）定义为相对于未经处理的对照培养物的产生水平抑制病毒p24抗原产生至少95%的试验化合物的最低浓度。 MK-4965和对照药物在测试浓度（见上）下，根据制造商的推荐，在37°C、5% CO2中孵育24、48或72小时后，使用Alamar蓝进行评估。MK-4965即使在远高于其EC95（细胞毒性EC50为2.8 μM）的浓度下，也没有表现出任何细胞毒性。 含患者分离株RT序列的HIV-1单周期复制试验 使用MK-4965和EFV对更广泛的临床nnrti耐药HIV-1分离株进行了单周期复制表型筛选试验，使用其临床诊断分析的一种变化。此外，还对9种HIV-1亚型和循环重组形式（CRFs）对NNRTIs的敏感性进行了评估。对含有PI或NRTI耐药突变的B枝病毒进行了检测，以确定这些突变是否对nnrti具有耐药性。用9个系列药物浓度评估RT抑制剂的活性。 结合研究。(i)一般情况。[1] 联合研究由SRI以两种药物联合的方式进行，其中MK-4965和上述18种fda批准的抗病毒药物，包括RAL和ETV。RBV和d4T作为阳性拮抗对照，因为d4T的抗病毒活性被RBV拮抗。 细胞计数仪定量，台盼蓝法测定细胞活力。在实验条件下，细胞存活率大于95%。对于每种组合的研究，MK-4965从100 nM开始，然后获得另外7个连续的半对数稀释。每次稀释的MK-4965与从10倍EC50开始的第二种抗hiv药物的五种稀释度联合进行测试，然后使用另外四种半对数稀释度进行测试。二甲亚砜的浓度<0.25%，这在之前所描述的分析中已被证明没有影响。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MK-4965 是一种 HIV-1 逆转录酶抑制剂。
总之，MK-4965 是一种新型非核苷类逆转录酶抑制剂 (NNRTI)，含有二芳醚和吲唑结构单元。它对含有 K103N 或 Y181C 突变的逆转录酶以及含有相同 RT 突变的病毒均表现出优异的活性。本研究中测试的所有 HIV 亚型对 MK-4965 的敏感性相似，且蛋白酶抑制剂 (PI) 和核苷类逆转录酶抑制剂 (NRTI) 耐药突变并未影响 MK-4965 的抗病毒活性。鉴于在联合用药研究中，MK-4965 与其他抗病毒药物之间未观察到拮抗作用，其体外特性表明 MK-4965 具有成为治疗 HIV-1 感染的新型 NNRTI 的巨大潜力。 |
| 分子式 |
C20H13CL2N5O2
|
|---|---|
| 分子量 |
426.257
|
| 精确质量 |
425.045
|
| 元素分析 |
C, 56.36; H, 3.07; Cl, 16.63; N, 16.43; O, 7.51
|
| CAS号 |
920035-77-4
|
| PubChem CID |
16045418
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| LogP |
5.019
|
| tPSA |
110.57
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
605
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
N#CC1=CC(OC2=CC(OCC3=NNC4=C3C=CC(N)=N4)=CC=C2Cl)=CC(Cl)=C1
|
| InChi Key |
KXDIHAQCVNNLIB-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H13Cl2N5O2/c21-12-5-11(9-23)6-14(7-12)29-18-8-13(1-3-16(18)22)28-10-17-15-2-4-19(24)25-20(15)27-26-17/h1-8H,10H2,(H3,24,25,26,27)
|
| 化学名 |
3-[5-[(6-amino-2H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl)methoxy]-2-chlorophenoxy]-5-chlorobenzonitrile
|
| 别名 |
MK-4965; MK 4965; MK-4965; 920035-77-4; 3-(5-((6-Amino-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl)methoxy)-2-chlorophenoxy)-5-chlorobenzonitrile; UNII-Z8856WDK9S; Z8856WDK9S; CHEMBL489586; 3-{5-[(6-amino-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl)methoxy]-2-chlorophenoxy}-5-chlorobenzonitrile; Benzonitrile, 3-(5-((6-amino-1H-pyrazolo(3,4-b)pyridin-3-yl)methoxy)-2-chlorophenoxy)-5-chloro-; MK4965
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3460 mL | 11.7299 mL | 23.4599 mL | |
| 5 mM | 0.4692 mL | 2.3460 mL | 4.6920 mL | |
| 10 mM | 0.2346 mL | 1.1730 mL | 2.3460 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
