| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
GPR55 ( IC50 = 221 nM )
ML-193 specifically targets GPR55, a G protein-coupled receptor that is activated by lysophosphatidylinositol (LPI) and other lipid mediators. By antagonizing GPR55, ML-193 blocks the receptor's signaling, which can modulate various downstream pathways, including ERK1/2 phosphorylation and β-arrestin trafficking. GPR55 has been implicated in cancer, neurological disorders, and inflammation, making it a target of significant research interest. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
ML-193（0.01-100 μM；预处理 15 分钟）的 IC50 为 0.22 μM，而 ML186（1 μM）可抑制 L-α-溶血磷脂酰肌醇 (LPI，10 μM) 诱导的 β-arrestin 转运[2]。
ML-193（0.01-10 μM；预处理 30 分钟）可降低 LPI 介导的 ERK1/2 磷酸化，在 U2OS 细胞中的 IC50 为 0.2 μM[2]。 ML-193（5 μM；预处理 30 分钟）可降低 GPR55 激动剂引起的 hNSC 增殖率增加[4]。 ML-193（5 μM；10 天）可降低 ML184 引起的 hNSC 分化增加[4]。 体外， ML-193 可抑制 LPI (10 μM) 和 ML186 (1 μM) 诱导的 β-arrestin 转运，IC50 值分别为 0.22 μM 和 0.12 μM。在 U2OS 细胞中，ML-193 可降低 LPI 介导的 ERK1/2 磷酸化水平，IC50 值为 0.2 μM。在 5 μM 浓度下，ML-193 可减弱 GPR55 激动剂诱导的人神经干细胞 (hNSC) 增殖和分化。此外，该化合物在 LPS 刺激的 BV2 小胶质细胞中也表现出抗炎作用，可降低促炎细胞因子和趋化因子的表达和释放。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
ML193（1 和 5 µg/只大鼠；纹状体内注射，注射速率为 1 μL/min）可改善帕金森病大鼠的运动协调性，并减轻感觉运动障碍和滑步[3]。
6-羟基多巴胺（6-OHDA）损伤大鼠在所有测试中均表现出行为障碍。纹状体内注射 LPI 可增加 6-OHDA 损伤大鼠在转棒上的停留时间，缩短移除标记物的潜伏期，但对滑步和运动活性无显著影响。纹状体内注射 ML193 也可增加 6-OHDA 损伤大鼠在转棒上的停留时间，缩短移除标记物的潜伏期，并减少滑步，尤其是在 1 µg/只大鼠的剂量下。结论：本研究提示纹状体 GPR55 参与运动功能的调控。然而，考虑到GPR55激动剂和拮抗剂的相似作用，可以得出结论，该受体在帕金森病实验模型中对运动障碍的控制起着调节作用。[3] 在体内，ML-193已在帕金森病大鼠模型中进行了研究。纹状体内注射ML-193（1和5 µg/只大鼠）可减轻帕金森病大鼠的感觉运动障碍和滑步，并提高其运动协调性。这些结果提示，GPR55拮抗剂可能具有治疗帕金森病运动障碍的潜力。 |
| 酶活实验 |
初筛[1]
检测结果需要与GPR55的孤儿状态无关。因此，我们选择了受体激活后β-arrestin介导的内吞作用这一特征明确的途径。在本实施例中，由GFP与β-arrestin蛋白融合而成的β-arrestin生物传感器在工程化的稳定细胞系中稳定表达，并将GPR55E克隆到该细胞系中。GPR55E是GPR55的C端修饰变体，具有更高的β-arrestin响应性和相似的药理学特性，用于初筛检测，在本探针报告中将简称为GPR55 Kapur等人。这种基于图像的高内涵筛选 (HCS) 方法是利用 GFP-β-arrestin 复合物结合的受体在细胞质中均匀分布，经质膜进入网格蛋白包被的细胞内小窝，最终进入囊泡的荧光重分布，这一过程发生在受体内吞过程中（见图 2 右侧）。配体（溶血磷脂酰肌醇衍生物）激活后，β-arrestin 蛋白与激活的受体结合，导致 GPR55 受体失活或“脱敏”。GPCR-β-arrestin 复合物内吞，配体被移除，受体被回收至细胞膜。荧光标记的 β-arrestin 的定位可以通过图像分析进行监测。Abood 博士发现，用未修饰的 GPR55 进行瞬时转染也会导致类似的功能性重分布（数据未显示）。初筛试验旨在鉴定能够抑制 GPR55 信号通路的化合物，该信号通路由 GPR55 激动剂溶血磷脂酰肌醇 (LPI) 的 EC80 浓度激活。值得注意的是，在 EC80 激动剂浓度下，受试化合物的计算 IC50 值可能比其实际结合亲和力 Ki 高 5-8 倍。 确认试验 使用初筛试验，对 MLSMR 重新提供的化合物溶液进行初步确认，确认其活性时采用单一化合物浓度 (10 μM)，并进行重复试验。对在 10 μM 浓度下确认具有活性的化合物进行 7 点剂量反应 (0.5 至 32 μM) 测试，以评估其效力。将高效化合物（IC50 < 5 μM）聚类成骨架，并对从筛选出的活性化合物及其市售类似物中选取的干粉化合物进行10点剂量反应（0.06至32 μM）测试。 二级检测：反筛选/选择性检测 由于GPR55被认为是一种假定的内源性大麻素受体，因此使用相同的基于图像的高内涵检测技术确定了其对其他内源性大麻素受体（CB1和CB2）的选择性。此外，由于GPR35和GPR55具有约30%的序列同一性，因此还评估了其对GPR35受体的选择性。除了提供选择性分析之外，这些检测还消除了由检测误差引起的假阳性结果，因为所有选择性检测均采用相同的检测技术。对干粉化合物进行了10点剂量反应（0.06至32 μM）选择性测定。 探针后表征三级测定（测定提供商）已鉴定的GPR55拮抗剂探针和选定的类似物通过在测定提供商及其合作者的实验室进行的两项测定进行进一步表征。pERK测定评估GPR55信号通路中的下游活性（可代表G蛋白依赖性信号或G蛋白非依赖性信号），而PKC β II易位测定评估G蛋白依赖性信号通路。 ML-193的体外受体结合测定包括使用放射性配体结合技术测量其与GPR55的亲和力。IC50值由竞争性结合曲线确定。功能测定，例如测量β-arrestin转运或ERK1/2磷酸化的抑制情况，用于确认其拮抗活性。 |
| 细胞实验 |
为了研究GPR55激活对hNSC增殖的影响，将细胞接种于层粘连蛋白包被的6孔板中。细胞过夜贴壁后，在低生长因子培养基（5%生长因子）中，分别用GPR55的内源性配体LPI（1 μM）或合成激动剂O-1602（1 μM）或ML184（1 μM）处理。使用低生长因子培养基是为了更好地模拟增殖能力较低的表型，同时保持细胞的“干性”。流式细胞术分析显示，48小时后巢蛋白阳性（nestin+）或Sox2+细胞群未见显著减少（数据未显示）。用选择性GPR55拮抗剂ML193（5 μM）处理的细胞，在加入激动剂前预处理30分钟。载体处理的细胞在5%生长因子培养基中加入0.1% DMSO。在分化研究中，细胞分别用载体、ML184 (1 μM)、ML193 (5 μM) 或 ML184 (1 μM) 和 ML193 (5 μM) 的组合处理，培养基为不含生长因子的 ReNcell 培养基。[4]
PKCβII 转位检测 GPR55 激活：将 HEK 293 细胞接种于 35 mm 玻璃孔 Matek 塑料培养皿中，使用标准磷酸钙转染方案，将含有 1.5 μg/ml PKCβII-GFP cDNA 或 PKC 质粒和 5 μg/ml 人 GPR55 cDNA 的 pCMV-Sport6 转染至细胞中。转染 24 小时后，使用表达 GPR55 和 PKCβII-GFP 的细胞。药物（例如ML193）处理后，细胞用温热的MEM培养基洗涤，并在37°C、5% CO2条件下培养30-45分钟。药物处理后，在室温下评估激动剂刺激的PKCβII-GFP重分布的抑制情况。[2] ML-193的细胞实验包括用该化合物处理表达GPR55的细胞，并测量信号通路的抑制情况。例如，用ML-193处理U2OS细胞，并测量LPI介导的ERK1/2磷酸化的抑制情况。此外，还评估了该化合物对神经干细胞增殖和分化的影响。 |
| 动物实验 |
雄性Wistar大鼠（200-250 g）通过注射6-羟基多巴胺（6-OHDA，10 µg/只）诱导实验性帕金森病[3]。
1和5 µg/只 以1 μL/min的速率注射到右侧纹状体[3]。 通过单侧纹状体内注射6-羟基多巴胺（6-OHDA，10 µg/只）诱导实验性帕金森病。内源性GPR55激动剂L-α-溶血磷脂酰肌醇（LPI，1和5 µg/只）和选择性GPR55拮抗剂ML193（1和5 µg/只）被注射到6-OHDA损伤大鼠的纹状体中。使用加速旋转杆和平衡木测试评估运动功能和平衡能力。分别通过粘性去除试验和旷场试验评估前肢的感觉运动功能和运动活性。[3] 已在帕金森病大鼠模型中进行了ML-193的体内动物实验。该化合物经纹状体内注射，并评估其对运动和感觉运动功能的影响。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
ML-193 的分子量为 527.59 g/mol，分子式为 C28H25N5O4S。它是一种固体，通常溶于 DMSO。为了长期保持其稳定性，该化合物应储存在 -20°C 下。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ML-193的毒性信息有限。作为一种研究级化合物，尚未发表全面的毒理学评估结果。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
N-[4-[(3,4-二甲基-5-异噁唑基)磺酰基]苯基]-6,8-二甲基-2-(2-吡啶基)-4-喹啉甲酰胺是一种芳香酰胺。
ML-193 是一种用于研究 GPR55 及其在各种疾病中作用的实验化合物。它尚未进入临床试验阶段。其作用机制涉及 GPR55 拮抗作用。 |
| 分子式 |
C28H25N5O4S
|
|---|---|
| 分子量 |
527.599
|
| 精确质量 |
527.162
|
| 元素分析 |
C, 63.74; H, 4.78; N, 13.27; O, 12.13; S, 6.08
|
| CAS号 |
713121-80-3
|
| PubChem CID |
1261822
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.670
|
| LogP |
4.63
|
| tPSA |
136Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
38
|
| 分子复杂度/Complexity |
921
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1=CC=C(C2=NC3C(=CC(=CC=3C(C(NC3=CC=C(S(NC4ON=C(C)C=4C)(=O)=O)C=C3)=O)=C2)C)C)N=C1
|
| InChi Key |
HTSLEZOTMYUPLU-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C28H25N5O4S/c1-16-13-17(2)26-22(14-16)23(15-25(31-26)24-7-5-6-12-29-24)27(34)30-20-8-10-21(11-9-20)38(35,36)33-28-18(3)19(4)32-37-28/h5-15,33H,1-4H3,(H,30,34)
|
| 化学名 |
N-[4-[(3,4-dimethyl-1,2-oxazol-5-yl)sulfamoyl]phenyl]-6,8-dimethyl-2-pyridin-2-ylquinoline-4-carboxamide
|
| 别名 |
CID 1261822; ML193; CID-1261822; CID1261822; MLS000862518; N-(4-(N-(3,4-Dimethylisoxazol-5-yl)sulfamoyl)phenyl)-6,8-dimethyl-2-(pyridin-2-yl)quinoline-4-carboxamide; N-[4-[(3,4-dimethyl-1,2-oxazol-5-yl)sulfamoyl]phenyl]-6,8-dimethyl-2-pyridin-2-ylquinoline-4-carboxamide; SMR000300559; ML 193; ML-193
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~33.3 mg/mL (~63.2 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8954 mL | 9.4769 mL | 18.9538 mL | |
| 5 mM | 0.3791 mL | 1.8954 mL | 3.7908 mL | |
| 10 mM | 0.1895 mL | 0.9477 mL | 1.8954 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
