| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GPR55 ( IC50 = 221 nM )
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| 体外研究 (In Vitro) |
ML-193(0.01-100 μM;预处理 15 分钟)抑制 L-α-溶血磷脂酰肌醇(LPI,10 μM)和 ML186 (1 μM) 诱导的 β-arrestin 运输,IC50 分别为 0.22 μM 和 0.12 μM[2 ]。 ML-193(0.01-10 μM;预处理 30 分钟)可降低 LPI 介导的 ERK1/2 磷酸化,在 U2OS 细胞中的 IC50 为 0.2 μM[2]。 ML-193(5 μM;预处理 30 分钟)可减弱 GPR55 激动剂诱导的 hNSC 增殖率增加[4]。 ML-193(5 μM;10 d)减弱 ML184 诱导的 hNSC 分化增加[4]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
ML193(1 和 5 µg/大鼠;纹状体内以 1 µL/min 的速率)可减轻 PD 大鼠的感觉运动缺陷和滑步,增强运动协调性[3]。动物模型:雄性 Wistar 大鼠(200-250 g)通过 6-羟基多巴胺(6-OHDA,10 µg/大鼠)诱导实验性帕金森病[3] 剂量:1 和 5 µg/大鼠 给药方法:以速率为 1 μL/min 结果:增加了旋转棒上的时间,减少了 6-OHDA 损伤大鼠中去除标签和滑动步骤的潜伏期。[3]
6-hydroxydopamine/6- ohda损伤大鼠在所有测试中行为受损。6- ohda损伤大鼠纹状体内给药LPI增加了旋转杆上的时间,减少了去除标签的潜伏期,但对滑动步和运动活动没有显著影响。纹状体内给药ML193也增加了6- ohda损伤大鼠在旋转杆上的时间,减少了去除标签和滑步的潜伏期,剂量以1µg/大鼠为主。 结论:本研究提示纹状体GPR55参与运动功能的控制。然而,考虑到GPR55激动剂和拮抗剂的相似作用,可以得出结论,该受体在帕金森实验模型中具有控制运动缺陷的调节作用。[3] |
| 酶活实验 |
Primary Screen[1]
读出需要独立于GPR55的孤儿状态。因此,我们选择了具有良好特征的β-阻滞蛋白介导的受体激活后内化途径。在具体实施例中,由GFP与β-抑制蛋白融合组成的β-抑制蛋白生物传感器在工程稳定细胞系中稳定表达,并将GPR55E克隆到该细胞系中。GPR55E是GPR55的c尾修饰变体,具有更强的β抑制蛋白反应性和类似的药理学作用,用于初级试验,在整个探针报告中称为GPR55 Kapur等人。这种基于图像的高含量屏幕(HCS)是基于GFP-β-抑制蛋白复合物结合受体在细胞质中的均匀分布,通过质膜进入网格蛋白包被的细胞内坑,然后在受体内化过程中进入囊泡的荧光再分布(见右图2)。在被配体结合(溶血磷脂肌醇衍生物)激活后,GPR55受体通过β-抑制蛋白与被激活的受体结合而失活或“脱敏”。GPCR-β-阻滞蛋白复合物内化,配体被移除,受体被循环回到细胞膜。荧光标记的β-抑制素的定位可以通过图像分析来监测。Abood博士发现,瞬时转染未修饰的GPR55会导致类似的功能重新分布(数据未显示)。初步筛选试验旨在鉴定抑制GPR55信号传导的化合物,该信号传导是由GPR55激动剂溶磷脂酰肌醇(LPI)的EC80浓度激活的。值得注意的是,在EC80激动剂浓度下,测试化合物的计算IC50可能比化合物的实际结合亲和力Ki高5-8倍。 Confirmation assays [1] 对MLSMR补充的化合物溶液进行初始命中确认,在单一化合物浓度(10 μM)下进行重复,使用主筛选试验来确认命中化合物的活性。以7点剂量(0.5 ~ 32 μM)对10 μM活性确定的化合物进行效价评价。将IC50 <5 μM的有效化合物聚集到支架中,对从hit及其市售类似物中选择的干粉化合物进行10点剂量反应(0.06 ~ 32 μM)。 Secondary Assays: Counterscreen / Selectivity assays[1] 由于GPR55被认为是一种假定的大麻素受体,因此使用相同的基于图像的高含量测定技术建立了对其他大麻素受体(CB1和CB2)的选择性。此外,对GPR35受体的选择性进行了评估,因为GPR35和GPR55具有约30%的同源性。除了提供选择性面板外,这些分析还消除了由分析伪影引起的假阳性,因为所有选择性分析都使用相同的分析技术。在10点剂量(0.06 ~ 32 μM)范围内对干粉化合物进行选择性测定。 Post Probe Characterization Tertiary Assays (Assay Provider)[1] 鉴定的GPR55拮抗剂探针和选定的类似物通过在检测提供者及其合作者的实验室进行的两次检测进一步表征。pERK检测评估GPR55信号通路的下游活性(可以代表g蛋白依赖的信号通路,也可以代表g蛋白独立的信号通路),而PKC β II易位检测评估g蛋白依赖的信号通路。 |
| 细胞实验 |
为了研究GPR55激活对hNSC增殖的影响,将细胞镀在层粘连蛋白包被的6孔板上。细胞粘附过夜,然后用LPI (1 μM), GPR55的内源性配体,或合成激动剂O - 1602 (1 μM)或ML184 (1 μM)在降低生长因子培养基(5%生长因子)中处理。减少生长因子培养基被用来更好地模拟低增殖表型,同时仍然保持“干性”状态。流式细胞术分析显示,48小时后巢蛋白+或Sox2+群体没有显著减少(数据未显示)。用GPR55选择性拮抗剂ML193 (5 μM)处理的细胞在加入激动剂之前预处理30 min。载体处理的细胞在5%的生长因子培养基中接受0.1%的DMSO。在不含生长因子的ReNcell培养基中,用ML184 (1 μM)、ML193 (5 μM)或ML184 (1 μM)和ML193 (5 μM)的组合处理细胞进行分化研究[4]。
活化HEK 293细胞于35 mm玻璃孔Matek塑料培养皿中,用175 μl含有1.5 μg/ml PKCβ ii - gfp cDNA或PKC质粒和5 μg/ml人GPR55 cDNA的溶液在pCMV-Sport6中瞬时转染,采用标准磷酸钙方案。转染24 h后利用表达GPR55和PKCβII-GFP的细胞。给药后,用温MEM清洗细胞,并在37°C 5% CO2中保存30-45分钟(例如ML193)。在室温下药物治疗后,评估激动剂刺激的PKCβII-GFP再分配的抑制作用。[2] |
| 动物实验 |
雄性Wistar大鼠(200-250 g)通过注射6-羟基多巴胺(6-OHDA,10 µg/只)诱导实验性帕金森病[3]。
1和5 µg/只 以1 μL/min的速率注射到右侧纹状体[3]。 通过单侧纹状体内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA,10 µg/只)诱导实验性帕金森病。内源性GPR55激动剂L-α-溶血磷脂酰肌醇(LPI,1和5 µg/只)和选择性GPR55拮抗剂ML193(1和5 µg/只)被注射到6-OHDA损伤大鼠的纹状体中。使用加速旋转杆和平衡木测试评估运动功能和平衡能力。分别通过粘合剂去除试验和开放场试验评估前肢的感觉运动功能和运动能力。[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
N-[4-[(3,4-二甲基-5-异噁唑基)磺酰基]苯基]-6,8-二甲基-2-(2-吡啶基)-4-喹啉甲酰胺是一种芳香酰胺。
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| 分子式 |
C28H25N5O4S
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|---|---|
| 分子量 |
527.599
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| 精确质量 |
527.162
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| 元素分析 |
C, 63.74; H, 4.78; N, 13.27; O, 12.13; S, 6.08
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| CAS号 |
713121-80-3
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| PubChem CID |
1261822
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.670
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| LogP |
4.63
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| tPSA |
136Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
921
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC=C(C2=NC3C(=CC(=CC=3C(C(NC3=CC=C(S(NC4ON=C(C)C=4C)(=O)=O)C=C3)=O)=C2)C)C)N=C1
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| InChi Key |
HTSLEZOTMYUPLU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H25N5O4S/c1-16-13-17(2)26-22(14-16)23(15-25(31-26)24-7-5-6-12-29-24)27(34)30-20-8-10-21(11-9-20)38(35,36)33-28-18(3)19(4)32-37-28/h5-15,33H,1-4H3,(H,30,34)
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| 化学名 |
N-[4-[(3,4-dimethyl-1,2-oxazol-5-yl)sulfamoyl]phenyl]-6,8-dimethyl-2-pyridin-2-ylquinoline-4-carboxamide
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| 别名 |
CID 1261822; ML193; CID-1261822; CID1261822; MLS000862518; N-(4-(N-(3,4-Dimethylisoxazol-5-yl)sulfamoyl)phenyl)-6,8-dimethyl-2-(pyridin-2-yl)quinoline-4-carboxamide; N-[4-[(3,4-dimethyl-1,2-oxazol-5-yl)sulfamoyl]phenyl]-6,8-dimethyl-2-pyridin-2-ylquinoline-4-carboxamide; SMR000300559; ML 193; ML-193
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~33.3 mg/mL (~63.2 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8954 mL | 9.4769 mL | 18.9538 mL | |
| 5 mM | 0.3791 mL | 1.8954 mL | 3.7908 mL | |
| 10 mM | 0.1895 mL | 0.9477 mL | 1.8954 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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