| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Retinoic acid receptor-related orphan receptor γt (RORγt) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
MRL-871 (3) 是一种RORγt的反向激动剂，它能稳定螺旋12处于一种不利于共激活因子结合的构象。 [1]
在TR-FRET共激活因子招募实验中，MRL-871 抑制RORγt配体结合域与SRC-1共激活因子肽段相互作用的半数抑制浓度（IC50）为 7.8 ± 0.5 nM。 [1] 在使用固定浓度的正构激动剂胆固醇（0、0.25 和 1.0 μM）进行的竞争性TR-FRET共激活因子招募实验中，随着胆固醇浓度的增加，MRL-871 的IC50值反而降低，显示出变构调节剂特有的协同结合行为。IC50值分别为：12.7 ± 0.6 nM（0 μM胆固醇）、9.4 ± 0.3 nM（0.25 μM胆固醇）和 7.8 ± 0.2 nM（1.0 μM胆固醇）。 [1] 在使用AlexaFluor647标记的MRL-871衍生物作为变构探针的HTRF配体结合实验中，MRL-871 能够竞争性替换该探针，其IC50值为 17.3 ± 1.4 nM。 [1] 在对PPARγ进行的TR-FRET共激活因子招募实验中，MRL-871 的IC50为 7.2 ± 0.8 μM，表明其存在一定的交叉反应性，但对RORγt的选择性是PPARγ的923倍。 [1] 在检测EL4细胞（小鼠淋巴母细胞）中IL-17a mRNA表达的细胞实验中，用10 μM MRL-871 处理24小时，与DMSO对照组相比，IL-17a mRNA的表达量显著降低了48倍。 [1] MRL-871 的ADME特性如下：在pH 7.4的水性缓冲液中孵育24小时后的化学稳定性为81%剩余；溶解度为39 μM；PAMPA通透性为23.7%；在人肝微粒体中的代谢稳定性（I相）固有清除率（CLint）< 0.1 μL/min/mg；II相代谢稳定性为100%剩余；血浆稳定性为47.1%剩余（1小时后）；血浆蛋白结合率为99.9%。 [1] 在 EL4 细胞中，MRL-871（化合物 3；10 μM，24 小时）使 IL-17a mRNA 表达显着降低 48 倍 [1]。 |
| 酶活实验 |
采用TR-FRET共激活因子招募实验评估RORγt反向激动剂活性。该实验使用100 nM的N端生物素化SRC-1 box2肽段和20 nM的His标签RORγt配体结合域，在含10 mM HEPES、150 mM NaCl、5 mM DTT、0.1% BSA（w/v）和0.1 mM CHAPS（pH 7.5）的缓冲液中进行。使用了铽标记的抗His抗体和D2标记的链霉亲和素。将溶于DMSO的化合物在384孔板中进行2倍梯度稀释，最终反应体积为10 μL，DMSO终浓度为2% v/v。室温孵育30分钟后离心，在激发波长340 nm、发射波长665 nm和620 nm处读取信号。 [1]
竞争性TR-FRET共激活因子招募实验的操作流程相似，区别在于缓冲液中加入了固定浓度的胆固醇（0 μM、0.25 μM、1.0 μM）。 [1] 采用HTRF配体结合实验，使用100 nM的AlexaFluor647标记的MRL-871衍生物作为变构探针和20 nM的His标签RORγt配体结合域，缓冲液同上。使用了铽标记的抗His抗体。实验在384孔板中进行，最终体积为10 μL。 [1] 对于PPARγ交叉反应性评估，采用TR-FRET共激活因子招募实验，使用100 nM的His标签PPARγ配体结合域，并在1 μM罗格列酮存在下预先激活受体。 [1] |
| 细胞实验 |
EL4细胞在含10% FBS的DMEM培养基中培养。细胞接种到12孔板24小时后，用10 μM测试化合物（来自10 mM DMSO储备液）或DMSO处理24小时，然后用50 ng/mL的佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯（PMA）和1 μg/mL的离子霉素激活5小时。收集细胞，使用RNeasy试剂盒提取RNA，并使用cDNA合成试剂盒进行反转录。采用SYBR green技术，通过定量RT-PCR分析小鼠IL-17a和参考基因Gapdh的mRNA水平。IL-17a mRNA表达水平相对于Gapdh表达水平进行标准化，并以DMSO对照组为校准，使用2−ΔΔCT方法计算相对基因表达量。 [1]
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C22H12CLF3N2O3
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|---|---|
| 分子量 |
444.790494918823
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| 精确质量 |
444.048
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| 元素分析 |
C, 59.41; H, 2.72; Cl, 7.97; F, 12.81; N, 6.30; O, 10.79
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| CAS号 |
1392809-08-3
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| PubChem CID |
68159303
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
5.8
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| tPSA |
72.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
683
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1C(N1C2C=CC=CC=2C(C2C=CC(C(=O)O)=CC=2)=N1)=O
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| InChi Key |
DANLZOIRUUHIIX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H12ClF3N2O3/c23-16-6-3-5-15(22(24,25)26)18(16)20(29)28-17-7-2-1-4-14(17)19(27-28)12-8-10-13(11-9-12)21(30)31/h1-11H,(H,30,31)
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| 化学名 |
4-[1-[2-chloro-6-(trifluoromethyl)benzoyl]indazol-3-yl]benzoic acid
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| 别名 |
MRL871; MRL 871; 1392809-08-3; 4-(1-(2-chloro-6-(trifluoromethyl)benzoyl)-1H-indazol-3-yl)benzoic acid; 4-{1-[2-Chloro-6-(Trifluoromethyl)benzoyl]-1h-Indazol-3-Yl}benzoic Acid; Benzoic acid, 4-[1-[2-chloro-6-(trifluoromethyl)benzoyl]-1H-indazol-3-yl]-; MRL-871
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~25 mg/mL (~56.21 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2483 mL | 11.2413 mL | 22.4825 mL | |
| 5 mM | 0.4497 mL | 2.2483 mL | 4.4965 mL | |
| 10 mM | 0.2248 mL | 1.1241 mL | 2.2483 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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