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ω-Conotoxin GVIA

别名: ω-CgTx GVIA, ω-Conotoxin GVIA,Conus geographus; omega-Conotoxin G via; 106375-28-4; Omega conopeptide GVIA (Conus);SNX124;SNX-124;SNX 124; Omega-Conotoxin GVIA trifluoroacetate salt; Omega-Conotoxin G Via TFA; DA-59381; Q27162637; H-D-Cys(1)-Lys-Ser-D-aHyp-Gly-D-Ser-D-Ser-Cys(2)-Ser-aHyp-D-aThr-Ser-D-Tyr-Asn-Cys(3)-Cys(1)-Arg-D-Ser-Cys(2)-Asn-D-aHyp-Tyr-aThr-D-Lys-Arg-Cys(3)-Tyr-NH2 omega-芋螺毒素GVIA;Ω-芋螺毒素; omega-芋螺毒素 G VIA;Ω-CONOTOXIN GVIA | Ω-芋螺毒素
目录号: V34701 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
芋螺毒素 GVIA 是一种肽化合物，是一种神经毒素，可作为电压激活的 N 型 Ca2+ 通道和神经元突触释放的神经递质的有效拮抗剂。
ω-Conotoxin GVIA CAS号: 106375-28-4
产品类别: Peptides
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品描述

描述：ω-芋螺毒素GVIA是一种肽类化合物，属于神经毒素，可强效拮抗电压激活的N型Ca2+通道和神经元突触处的神经递质释放。其拮抗活性归因于13位的酪氨酸残基。不与二氢吡啶或维拉帕米结合位点结合。据报道，它还能抑制由P2X2/X3受体介导的ATP诱导的内向电流（P2X3受体的IC50为21.2 nM，P2X2/X3异源寡聚受体的IC50为3.84 µM）。


ω-芋螺毒素GVIA是一种N型钙通道拮抗剂。

本研究利用该装置来研究 N 型 Ca²⁺ 通道是否参与了尿张素 II (UII) 微量注射到麻醉大鼠延髓腹外侧区 (RVLM) 对交感血管舒缩张力的影响。[1]
生物活性&实验参考方法
靶点
N-type Ca2+ channel
N-type calcium channel (N-type Ca²⁺ channel). [1]
体外研究 (In Vitro)
ω-芋螺毒素GVIA（50 nM，50 nL）可抑制尿张素II（UII）的作用[1]。
体内研究 (In Vivo)
本研究旨在揭示尿张素II (UII) 对延髓腹外侧前部 (RVLM) 交感血管舒缩张力的影响。将不同浓度的UII（0.3、3 和 30 nmol/L，50 nL）微量注射到RVLM中。测量血压 (BP)、心率 (HR) 和肾交感神经活动 (RSNA) 以确定交感血管舒缩张力。在药物微量注射到RVLM后，同时记录BP、HR和RSNA。将UII（0.3、3 和 30 nmol/L，50 nL）微量注射到RVLM中显著升高了BP、HR和RSNA。预先使用UII受体GPR14的强效拮抗剂BIM23127（300 nmol/L，50 nL）处理可消除UII的作用。预先微量注射ERK抑制剂PD98059（25 μmol/L，50 nL）可显著抑制UII的作用。预先注射N型Ca2+通道抑制剂ω-芋螺毒素GVIA（50 nmol/L，50 nL）也可抑制UII的作用。本研究表明，将UII微量注射到延髓腹外侧区（RVLM）可显著增强交感神经血管舒缩张力，该作用由GPR14/ERK/N型Ca2+通道通路介导。UII可能成为自主神经系统调节，特别是高血压治疗的新型靶点。[1] 通过对天然分子丙氨酸取代类似物的结构、结合以及体外和体内功能研究，已阐明了N型钙通道阻滞剂ω-芋螺毒素GVIA（GVIA）的结构-功能关系。序列中所有非桥接位置均被丙氨酸取代。大多数情况下，通过1H NMR光谱分析表明，类似物在水溶液中的结构与天然结构相似。在某些情况下观察到的微小构象变化通过二维NMR进行表征。在三种功能测定（大鼠离体输精管、右心房和肠系膜动脉的交感神经刺激）以及大鼠脑膜结合测定中，Lys2和Tyr13被丙氨酸取代导致效力降低超过两个数量级。其他几个残基（特别是Arg17、Tyr22和Lys24）被丙氨酸取代导致功能测定中的效力显著降低（<100倍），但在结合测定中未观察到此现象。类似物的效力在不同的功能测定中具有很强的相关性，但在功能测定和结合测定之间则无相关性。因此，本研究采用的生理相关检测表明，GVIA 对 N 型钙通道的高亲和力是由于通道结合位点与毒素在除先前鉴定的 Lys2 和 Tyr13 之外的更多位点发生相互作用所致 [2]。在麻醉的雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，单独向延髓腹外侧区 (RVLM) 微量注射 ω-芋螺毒素 GVIA (200 nmol/L，50 nL) 不会影响平均动脉压 (MAP)、心率 (HR) 或肾交感神经活动 (RSNA)。预先注射 ω-芋螺毒素 GVIA (200 nmol/L，50 nL) 可显著减弱随后向 RVLM 微量注射 UII (3 nmol/L，50 nL) 引起的 MAP、HR 和 RSNA 的升高。经ω-芋螺毒素GVIA预处理后，UII对平均动脉压（MAP）（88.03 ± 4.20 mmHg，与对照组相比P > 0.05）、心率（HR）（323.17 ± 9.96 bpm，与对照组相比P > 0.05）或肾交感神经活动（RSNA）（104.26 ± 3.63%，与对照组相比P > 0.05）均无显著影响。ω-芋螺毒素GVIA完全阻断了UII的作用。[1]
酶活实验
结合实验[2]
大鼠脑组织粗膜的制备采用 Cruz 和 Olivera 的方法 (29)。将单个脑组织置于 Ultra-Turrax 匀浆器（Janke and Kunkel）中，加入 10 倍体积的缓冲液（0.32 M 蔗糖、5 mM HEPES-Tris，pH 7.4、0.1 mM 苯甲基磺酰氟），匀浆液在 4 °C 下以 1000 × g 离心 10 分钟。沉淀物用 10 倍体积的缓冲液重悬，再次离心。合并上清液，并在 4 °C 下以 17,000 × g 离心 60 分钟。沉淀物用 100 倍体积的缓冲液溶解，缓冲液中还含有 50 mg/L 溶菌酶。由此得到的膜来源于约 200 μg 组织/20 μL 匀浆液。将悬浮液分装成 3 ml 的等分试样，并储存于 −70 °C。
结合实验在底部带有 0.65 μm 滤膜的 96 孔微孔板中进行，采用 Cruz 和 Olivera 以及 Haack 等人的方法进行改进，Kim 等人也采用了该方法3。结合缓冲液包含 0.32 mM 蔗糖、5 mM HEPES-NaOH（pH 7.4）、0.1 mM 苯甲基磺酰氟、0.3% 牛血清白蛋白和 50 mg/L 溶菌酶。洗涤缓冲液包含 150 mM NaCl、5 mM HEPES-NaOH（pH 7.4）、1.5 mM CaCl2 和 0.1% 牛血清白蛋白。示踪剂溶液的制备方法如下：将 50 μCi 的 125I-[Tyr22]GVIA（杜邦 NEN 公司）溶解于 1 ml 水中，并分装成 50 μl 的小份，储存于 -15 °C。每次实验的示踪剂制备方法为：将一份小份（2.5 μCi）示踪剂稀释于 3.5 ml 结合缓冲液中，用于制备每个 96 孔微孔板的示踪剂。孵育混合物（总体积 100 μl/孔）包含 50 μl 含有置换配体的结合缓冲液、20 μl 膜制备物和 30 μl 稀释的 125I-[Tyr22]GVIA 示踪剂溶液，最终浓度为 0.13 nM。在 1 μM 未标记的 GVIA 存在下测定非特异性结合。实验在 4 °C 下孵育 90 分钟，并通过真空过滤终止反应。每个孔用 200 μl 洗涤缓冲液洗涤三次，然后在真空下干燥 10 分钟。将滤膜取下，用 γ 计数器计数。每个测量值在实验中重复四次，每个实验至少重复三次。
细胞实验
输精管[2]
\n将输精管置于5毫升器官浴槽中，每条组织的顶部连接到等长力传感器（Grass FT03），底部连接到可移动支架，并跨接铂刺激电极。输精管被施加约10毫牛顿的被动力拉伸，并每20秒用单次电场脉冲（100伏，持续时间0.2毫秒）进行刺激。由此产生的抽搐反应由交感神经介导，对胍乙啶（10微摩尔）或河豚毒素（0.1微摩尔）的抑制作用敏感，并记录在图表记录仪上。GVIA（0.3-10纳米）导致大鼠输精管对电刺激的抽搐反应幅度逐渐降低，且这种降低呈浓度依赖性。亚最大有效浓度的GVIA最初引起肌肉抽搐幅度迅速下降，随后在90分钟内持续缓慢下降。这种看似缓慢的平衡过程意味着，在不受到肌肉抽搐反应自发衰减干扰的情况下，无法构建毒素完全平衡的浓度-反应曲线。为了解决这个问题，我们采用了一种固定浓度递增间隔为20分钟的方案。通过将肽类物质以10倍浓度递增的方式添加到输精管灌注液中（起始浓度为1 nM），构建GVIA或其类似物的累积浓度-反应曲线。在每种组织中构建一条浓度-反应曲线。
\n肠系膜动脉[2]
\n在解剖显微镜下，小心地将一条动脉（位于进入肠道的动脉近端三级分支处）从周围的脂肪和结缔组织中分离出来，并将一段2毫米长的动脉段安装在Mulvany-Halpern型等长肌动描记仪的40微米金属丝上，加热至37℃。以大约四个步骤逐步径向拉伸动脉，并在每个步骤测量力并计算动脉周长，从而生成一条直径-力曲线，其中直径是指在每个拉伸水平下与血管周长相同的圆的直径。然后，将动脉直径设置为使用标准计算方法预测的100毫米汞柱扩张压力下直径的90%。在这些条件下建立的大鼠肠系膜动脉不会产生任何自发性主动收缩力。为最大程度激活动脉，应用去极化钾溶液约2分钟后冲洗干净。在哌唑嗪（0.1 μM）存在下，用共价拮抗剂苯乙胺（3 μM，5分钟）阻断突触前α2-肾上腺素能受体，以保护突触后α1-肾上腺素能受体。随后冲洗掉拮抗剂，并应用去甲肾上腺素（10 μM）以确认拮抗剂已被清除。此操作显著增强了交感神经刺激的反应幅度。肌动描记器的每个钳口均安装有铂电极，距离动脉约1 mm。用持续时间为0.25 ms、电压为30 V的单极电场脉冲刺激动脉壁内的交感神经，该刺激参数可使反应被河豚毒素阻断95%以上。我们之前已证实，胍乙啶可消除这些反应，因此这些反应是由交感神经介导的。刺激交感神经可产生收缩反应，其潜伏期短（<1 秒），并在刺激结束后迅速衰减。所有反应均以峰值力变化来测量。神经刺激以 25 Hz 的频率进行，每组刺激包含 75 个脉冲，共 3 组，组间间隔 60 秒，连续刺激组之间间隔 30 分钟。GVIA 或其类似物以累积方式施加，每次测试刺激前均接触 30 分钟。
\n右心房[2]
\n将右心房从心脏中分离出来，置于 37 °C 的 5 ml 器官浴槽中，浴槽底部放置有两根细铂电极，用于采集心房表面电图，另有一对电极用于电刺激。使用体表电图触发周期计，持续测量自发收缩率。在阿托品（1 μM）存在下，以消除副交感神经刺激的影响，测量由交感神经介导的心动过速反应，该反应由一组4个2 Hz的电场脉冲引起。在两次对照刺激中的第二次刺激后，立即施加递增浓度的GVIA或其类似物，药物在每次刺激前与组织接触30分钟。
动物实验
雄性哈兰·斯普拉格·道利大鼠经二氧化碳麻醉后断头处死，取出输精管、心脏和部分肠系膜肠段，置于盛有冰冷克氏液（成分：Na+ 144、K+ 5.9、Mg2+ 1.2、Ca2+ 2.5、HPO4− 1.2、Cl− 129、SO4− 1.2、HCO3− 25、葡萄糖 11、EDTA 0.026，通入 5% 二氧化碳/氧气混合气体）的培养皿中，以备进一步解剖[2]。
清醒兔实验。对新西兰白兔（雌雄不限，体重 2.5 ± 0.1 kg）进行局部麻醉（1% 盐酸利多卡因），分别在其中央耳动脉和耳缘静脉处插管，用于测量平均动脉压（MAP）和注射药物。瞬时血压信号触发心率计测量心率（HR）。瞬时动脉压、平均动脉压和心率均记录在Grass多导生理记录仪上。按照上述简要步骤操作后，将兔子固定在聚碳酸酯约束器中安静休息约40分钟。评估静脉注射选定的GVIA类似物对平均动脉压（MAP）、心率和压力反射的影响。压力反射的测量方法是：分别使用去氧肾上腺素和硝普钠诱发MAP交替的稳态升高和降低（基线±5–35 mmHg）。GVIA类似物的效价通过将其作用与10 μg/kg GVIA的作用进行比较来评估。GVIA类似物的初始给药剂量为3或10 μg/kg。监测平均动脉压 (MAP) 和心率 (HR) 60 分钟，如果其效果小于 10 μg/kg 静脉注射 GVIA 的效果，则增加类似物的剂量（累积半对数剂量递增）。在给予最高剂量肽后 60 分钟，重新评估压力反射曲线，并通过将压力感受器-心率反射曲线拟合到逻辑方程来获得反射参数（增益、位置和平台期）。[2] 将 ω-芋螺毒素 GVIA 溶解于生理盐水中。微量注射到延髓腹外侧区 (RVLM) 时，使用 50 nL 的体积。方案中使用的浓度为 50 nmol/L（如“方法”部分所述）或 200 nmol/L（如“结果”部分所述）。将药物单侧微量注射到麻醉的雄性Sprague-Dawley大鼠（300 ± 20 g）的左侧延髓腹外侧区（RVLM）中。注射时使用连接纳升注射器的单管玻璃微量移液管（尖端直径10–30 μm）。通过L-谷氨酸（2 nmol）引起的至少25 mmHg的升压反应来确定RVLM中的注射位点。待基线平均动脉压（MAP）、心率（HR）和肾交感神经活动（RSNA）稳定后，注射ω-芋螺毒素GVIA。注射ω-芋螺毒素GVIA十分钟后，将UII微量注射到RVLM中，以检测N型钙通道的参与情况。[1]
参考文献

[1]. Microinjection of urotensin II into the rostral ventrolateral medulla increases sympathetic vasomotor tone via the GPR14/ERK pathway in rats. Hypertens Res. 2020 Aug;43(8):765-771.
其他信息
ω-锥螺毒素GVIA是一种杂环多肽，由线性序列Cys-Lys-Ser-Hyp-Gly-Ser-Ser-Cys-Ser-Hyp-Thr-Ser-Tyr-Asn-Cys-Cys-Arg-Ser-Cys-Asn-Hyp-Tyr-Thr-Lys-Arg-Cys-Tyr-NH2组成，其中位于1-16、8-19和15-26位的半胱氨酸残基之间形成三个二硫键。该毒素是从以鱼为食的锥螺（Conus geographus）的毒液中分离得到的。它具有多种功能，包括毒液、神经毒素、钙通道阻滞剂和海洋代谢物。它是一种多肽、杂环肽、有机二硫化物和肽酰胺。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C120H182N38O43S6
分子量
3037.34787999999
精确质量
3035.15
CAS号
106375-28-4
相关CAS号
106375-28-4
PubChem CID
16133838
序列
Cys-Lys-Ser-{Hyp}-Gly-Ser-Ser-Cys-Ser-{Hyp}-Thr-Ser-Tyr-Asn-Cys-Cys-Arg-Ser-Cys-Asn-{Hyp}-Tyr-Thr-Lys-Arg-Cys-Tyr-NH2 (Disulfide bridge: Cys1-Cys16; Cys8-Cys19; Cys15-Cys26)
短序列
CKS-{Hyp}-GSSCS-{Hyp}-TSYNCCRSCN-{Hyp}-YTKRCY-NH2 (Disulfide bridge: Cys1-Cys16; Cys8-Cys19; Cys15-Cys26)
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.71
LogP
-15.8
tPSA
1496.38
氢键供体(HBD)数目
49
氢键受体(HBA)数目
54
可旋转键数目(RBC)
39
重原子数目
207
分子复杂度/Complexity
6820
定义原子立体中心数目
31
SMILES
C[C@@H](O)[C@H]1C(N[C@H](C(NC(C(N[C@H](C(N[C@H](C(N)=O)CC2=CC=C(O)C=C2)=O)CSSC[C@H]3C(N[C@H]4CSSC[C@H](N)C(NC(C(N[C@H](C(N5C[C@H](O)C[C@H]5C(NCC(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N6C[C@H](O)C[C@H]6C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N3)=O)CC(N)=O)=O)CC7=CC=C(O)C=C7)=O)CO)=O)[C@H](O)C)=O)=O)CO)=O)CSSC[C@H](NC([C@@H](NC([C@@H](NC4=O)CCCNC(N)=N)=O)CO)=O)C(N[C@H](C(N8C[C@H](O)C[C@H]8C(N[C@H](C(N1)=O)CC9=CC=C(O)C=C9)=O)=O)CC(N)=O)=O)=O)CO)=O)CO)=O)=O)=O)CO)=O)CCCCN)=O)=O)=O)CCCNC(N)=N)=O)CCCCN)=O
InChi Key
DQZTPPHJRQRQQ-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C120H182N38O43S6/c1-53(165)91-114(197)138-66(10-4-6-26-122)95(178)136-68(12-8-28-132-120(129)130)98(181)149-81(107(190)139-69(93(126)176)29-55-13-19-58(167)20-14-55)49-204-207-52-84-110(193)153-80-48-203-202-47-64(123)94(177)135-65(9-3-5-25-121)97(180)147-78(45-163)117(200)156-38-61(170)32-85(156)111(194)133-37-90(175)134-74(41-159)102(185)145-76(43-161)105(188)152-83(109(192)148-79(46-164)118(201)158-40-63(172)34-87(158)113(196)155-92(54(2)166)115(198)146-77(44-162)103(186)140-70(30-56-15-21-59(168)22-16-56)99(182)141-72(35-88(124)173)100(183)150-84)51-206-205-50-82(151-104(187)75(42-160)144-96(179)67(137-106(80)189)11-7-27-131-119(127)128)108(191)143-73(36-89(125)174)116(199)157-39-62(171)33-86(157)112(195)142-71(101(184)154-91)31-57-17-23-60(169)24-18-57/h13-24,53-54,61-87,91-92,159-172H,3-12,25-52,121-123H2,1-2H3,(H2,124,173)(H2,125,174)(H2,126,176)(H,133,194)(H,134,175)(H,135,177)(H,136,178)(H,137,189)(H,138,197)(H,139,190)(H,140,186)(H,141,182)(H,142,195)(H,143,191)(H,144,179)(H,145,185)(H,146,198)(H,147,180)(H,148,192)(H,149,181)(H,150,183)(H,151,187)(H,152,188)(H,153,193)(H,154,184)(H,155,196)(H4,127,128,131)(H4,129,130,132)
化学名
68-amino-36,71-bis(4-aminobutyl)-N-[1-amino-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]-22,51-bis(2-amino-2-oxoethyl)-33,60-bis(3-carbamimidamidopropyl)-8,47,78-trihydroxy-13,39-bis(1-hydroxyethyl)-4,16,57,74,86,89-hexakis(hydroxymethyl)-19,42-bis[(4-hydroxyphenyl)methyl]-2,5,11,14,17,20,23,32,35,38,41,44,50,53,56,59,62,69,72,75,81,84,87,90,97-pentacosaoxo-27,28,65,66,93,94-hexathia-3,6,12,15,18,21,24,31,34,37,40,43,49,52,55,58,61,70,73,76,82,85,88,91,96-pentacosazahexacyclo[52.37.4.225,63.06,10.045,49.076,80]heptanonacontane-30-carboxamide
别名
ω-CgTx GVIA, ω-Conotoxin GVIA,Conus geographus; omega-Conotoxin G via; 106375-28-4; Omega conopeptide GVIA (Conus);SNX124;SNX-124;SNX 124; Omega-Conotoxin GVIA trifluoroacetate salt; Omega-Conotoxin G Via TFA; DA-59381; Q27162637; H-D-Cys(1)-Lys-Ser-D-aHyp-Gly-D-Ser-D-Ser-Cys(2)-Ser-aHyp-D-aThr-Ser-D-Tyr-Asn-Cys(3)-Cys(1)-Arg-D-Ser-Cys(2)-Asn-D-aHyp-Tyr-aThr-D-Lys-Arg-Cys(3)-Tyr-NH2
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O: ~100 mg/mL (TFA salt)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.3292 mL 1.6462 mL 3.2923 mL
5 mM 0.0658 mL 0.3292 mL 0.6585 mL
10 mM 0.0329 mL 0.1646 mL 0.3292 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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