| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 HepG2 细胞中以浓度依赖的方式增强 ARE 驱动的荧光素酶活性；从 10 μM 开始观察到显著增加 [1]。
- 预处理 12 小时后，可阻止叔丁基过氧化氢 (t-BHP, 500 μM, 4 h) 诱导的 HepG2 细胞死亡（浓度依赖性）； 1 小时预处理未显示细胞保护作用 [1]。 - 降低 HepG2 细胞中由 t-BHP（500 μM，30 分钟）诱导的细胞内 ROS 生成 [1]。 - 诱导 HepG2 细胞中 Nrf2 的核积累（暴露 6 小时后观察到，呈浓度依赖性）[1]。 - 上调 HepG2 细胞中抗氧化酶的 mRNA 和蛋白水平：谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基 (GCLC)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚基 (GCLM) 和 NAD(P)H：醌氧化还原酶 1 (NQO1) [1]。 - 增加 HepG2 细胞内谷胱甘肽 (GSH) 含量（12 小时后约 5 倍）[1]。 - 增加 ERK 磷酸化（从在HepG2细胞中，PD98059（10 μM）对ERK的抑制作用可完全消除ARE-荧光素酶活性、核内Nrf2积累、GCLC/GCLM mRNA上调以及细胞保护作用[1]。 - PD98059抑制CaCo-2结肠癌细胞的生长，IC50 = 185.6 μM（MTT法，处理24小时后恢复24小时）[2]。 |
|---|---|
| 细胞实验 |
ARE-荧光素酶报告基因检测：将稳定转染了pGL4.37质粒（含有四个ARE拷贝）的HepG2细胞以2×10⁵个细胞/孔的密度接种于12孔板中。经一夜血清饥饿后，用棒节醇处理细胞12小时。用被动裂解缓冲液裂解细胞，并使用荧光素酶检测系统在发光仪上测定荧光素酶活性[1]。
- 细胞活力检测（MTT）：将HepG2细胞以5×10⁴个细胞/孔的密度接种于48孔板中。经一夜血清饥饿后，用棒节醇预处理细胞1小时或12小时，然后用500 μM叔丁基过氧化氢（t-BHP）处理4小时。在最后 1 小时加入 MTT (0.3 mg/mL)，将甲臜晶体溶解于 DMSO 中，并在 570 nm 处测量吸光度 [1]。 - 细胞内 ROS 测定：用 pachypodol 预处理 12 小时的 HepG2 细胞暴露于 500 μM t-BHP 30 分钟，然后与 10 μM CM-H₂DCFDA 孵育 25 分钟。用 4% 多聚甲醛固定细胞，并通过荧光显微镜观察；使用微孔板读数仪（激发波长 485 nm，发射波长 520 nm）定量荧光强度，并以蛋白质浓度进行标准化 [1]。 - 核提取和蛋白质印迹：将 HepG2 细胞以 5×10⁵ 个细胞/孔的密度接种于 6 孔板中。处理后，用低渗缓冲液裂解细胞，并提取核组分。蛋白质经SDS-PAGE分离后转移至硝酸纤维素膜，用5%脱脂奶粉封闭，与一抗（抗Nrf2、抗lamin A/C、抗α-微管蛋白、抗磷酸化ERK、抗ERK等）于4℃孵育过夜，然后与HRP标记的二抗孵育，最后用ECL化学发光法显色[1]。 - 实时PCR：使用Trizol试剂从HepG2细胞中提取总RNA，使用oligo-d(T)16引物和AMV逆转录酶将其逆转录为cDNA。使用 SYBR Green I Master mix 和针对 GCLC、GCLM、NQO1 和 GAPDH（内参）的引物，在 LightCycler 480 II 仪器上进行实时 PCR [1]。 - 细胞内 GSH 测定：将 HepG2 细胞沉淀重悬于冰冷的 5% 偏磷酸中，超声处理，离心，取上清液，使用商业 GSH 试剂盒进行比色测定；在 400 nm 处测量吸光度 [1]。 - CaCo-2 细胞毒性测定（基于 MTT 的 Promega CellTiter 96 非放射性细胞增殖测定）：将 CaCo-2 细胞以 8000 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，并孵育 48 小时。将培养基更换为含有终浓度分别为 0、0.5、1、2.5、5、10、15、20、25 和 30 μM 的棒孢菌素的新鲜培养基，并孵育 24 小时。移除培养基，用 PBS 洗涤细胞，加入新鲜培养基，继续孵育 24 小时。加入 15 μL MTT 染料溶液，孵育 4 小时，然后加入 100 μL 溶解/终止液，并过夜孵育。在 570 nm 处记录吸光度（参考波长为 650 nm）[2]。 |
| 动物实验 |
卤虫致死性试验：孵化卤虫卵。施用不同浓度的测试化合物（棒节醇）。24 小时后记录死亡率。采用概率单位分析法测定 LD50 值（435.8 μM）。使用 Abbott 公式校正死亡率百分比：P = (Pi - C) / (1 - C)，其中 P = 观察到的非零死亡率，C = 对照组死亡率 [2]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在HepG2细胞中，浓度为3–100 μM的棒足醇处理24小时未显示细胞毒性（MTT法）[1]。
- 卤虫致死性试验：LD50 = 435.8 μM（暴露24小时）[2]。 - CaCo-2结肠癌细胞：IC50 = 185.6 μM（处理24小时后恢复24小时）[2]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
棒花醇是一种三甲氧基黄酮类化合物，是槲皮素的衍生物，其3、7和3'位上的羟基被甲氧基取代。它已从四棱风车子（Combretum quadrangulare）和埃氏欧迪亚（Euodia elleryana）中分离得到。棒花醇是一种植物代谢产物和止吐剂。它是一种二羟基黄酮和三甲氧基黄酮类化合物，在功能上与槲皮素相关。据报道，在三叶野豌豆（Melicope triphylla）、半果野豌豆（Melicope semecarpifolia）和其他一些具有相关数据的生物体中均发现了棒足醇。
本研究首次评估了棒足醇在HepG2细胞中的抗氧化和细胞保护作用及其潜在的分子机制（ERK依赖性Nrf2激活）[1]。 棒足醇（5,4′-二羟基-3,7,3′-三甲氧基黄酮）是从广藿香（Pogostemon cablin Bentham）（甲醇提取物、正己烷馏分、离心分配色谱法）和花叶萼蕨（Calycopteris floribunda Lam.）（二氯甲烷-甲醇提取物、硅胶柱色谱法）中分离得到的[1,2]。 |
| 分子式 |
C18H16O7
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|---|---|
| 分子量 |
344.31
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| 精确质量 |
344.089
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| CAS号 |
33708-72-4
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| PubChem CID |
5281677
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
598.8±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
220.7±23.6 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.654
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| LogP |
2.56
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| tPSA |
98.36
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
532
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
KQFUXLQBMQGNRT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H16O7/c1-22-10-7-12(20)15-14(8-10)25-17(18(24-3)16(15)21)9-4-5-11(19)13(6-9)23-2/h4-8,19-20H,1-3H3
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| 化学名 |
5-hydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3,7-dimethoxy-4H-chromen-4-one
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| 别名 |
Pachypodol Ro-09-0179 Ro09-0179Ro 09-0179
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~290.43 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9044 mL | 14.5218 mL | 29.0436 mL | |
| 5 mM | 0.5809 mL | 2.9044 mL | 5.8087 mL | |
| 10 mM | 0.2904 mL | 1.4522 mL | 2.9044 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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