| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EGFR (IC50 = 0.45 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
当蛋白质与PD174265一起孵育时，质量没有增加，表明缺乏共价修饰。胰蛋白酶消化药物结合蛋白并通过液相色谱ESI串联质谱（MS/MS）分析，确定Cys-773是主要的相互作用位点（图3b）。检测到的唯一其他修饰残基是Cys-926；然而，这只是一个相对较小的组成部分。没有发现其他残留物，包括剩下的四个半胱氨酸，发生了改变。作为Cys-773是与PD 168393结合的特定氨基酸的额外证据，重组野生型人EGFr全细胞质结构域和一个点突变体（其中Cys-773被Ser（C773S）取代）在杆状病毒中表达，并从感染的昆虫细胞中纯化。野生型和突变型蛋白均表现出相当的TK活性，并在相似剂量下被PD 168393和PD174265>抑制[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
为了说明不可逆性的优点，表2显示了活细胞中靶调节的PD 168393（不可逆）和PD174265（可逆）之间的直接比较。PD 168393抑制A431人表皮样癌细胞中EGFr的自磷酸化，其效力是PD174265的9倍以上。在MDA-MB-453人乳腺癌细胞中，与heregulin介导的酪氨酸磷酸化相比，差异更大，其中PD 168393的效力是30倍以上。不可逆抑制的治疗优势在图6a中得到了非常显著的说明，该图显示了PD 168393和PD174265与裸鼠异种移植的A431人表皮样癌的体内活性的直接比较。PD 168393在维持每日一次腹膜内给药对肿瘤生长的抑制方面远远优于PD174265。PD 168393产生了115%的肿瘤生长抑制，在本实验中，这被定义为治疗肿瘤达到三倍体积的中位时间减去对照肿瘤达到三分体积的中位数时间，以治疗持续时间（15天）的百分比表示<相比之下，PD174265仅产生13%的肿瘤生长抑制。这两种化合物的抗肿瘤活性与其抑制EGFr磷酸酪氨酸含量的能力有关。注射后4小时，这两种化合物的磷酸化状态降低了约80%（图6b）。然而，到8小时时，用可逆化合物PD174265治疗的小鼠磷酸化已恢复到对照组的75%，24小时后恢复到100%。相比之下，注射PD 168393的动物EGFr的磷酸酪氨酸含量在注射后24小时仍降低了50%。尽管在所有检查的时间点，PD 168393的血药浓度均低于PD174265，但PD 168893的治疗优势得以保持（数据未显示）[1]。
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| 酶活实验 |
将PD 168393或PD174265（在二甲亚砜中）溶液加入到50μg EGFr TK催化结构域的20 mM Tris（pH 8.0）、150 mM NaCl、1 mM DTT、1 mM EDTA和1μg/ml蛋白酶抑制剂（抑肽酶和亮肽）中，并用75 mM碳酸氢铵（pH 7.5）稀释。90分钟后，通过加入5%（体积/体积）乙酸淬灭反应。在Finnigan MAT 900Q质谱仪上通过电喷雾电离（ESI）-MS分析蛋白质的等分试样，该质谱仪配备有以150 nl/min运行的低流量微ESI源。剩余的蛋白质被还原、烷基化，并用0.5μg胰蛋白酶消化，如所述（40）。将冻干的胰蛋白酶肽悬浮在0.1%三氟乙酸/2%CH3CN中，在配备0.3×15mm Vydac C18柱并与Finnigan LCQ四重离子阱质谱仪连接的Michrom BioResources Magic 2002 HPLC上通过液相色谱ESI MS进行分析。使用Finnigan navigator 1.0.1数据采集软件收集数据，该软件分别设置为全扫描MS、变焦扫描MS和MS/MS的自动增益控制的以下默认值：5×107、1×107和2×107。最大注射时间为200毫秒，使用三个微扫描来收集所有模式下的数据。MS/MS裂解光谱使用35%的相对碰撞能量。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
本发明公开了一类高亲和力抑制剂，该类抑制剂通过对ATP结合口袋中存在的半胱氨酸残基进行特异性共价修饰，选择性地靶向并不可逆地灭活表皮生长因子受体酪氨酸激酶。一系列采用质谱、分子建模、定点诱变和活细胞14C标记研究的实验明确表明，这些化合物以1:1的化学计量比选择性地与表皮生长因子受体的催化结构域结合，并烷基化Cys-773。虽然这些化合物在溶液中基本无反应活性，但当它们与ATP结合口袋结合时，会受到该特定氨基酸的快速亲核攻击。这些抑制剂中丙烯酰胺基团相对于Cys-773的分子取向和位置，完全支持了基于ATP结合位点同源建模分子对接实验所确定的结果。证据还表明，这些化合物与erbB2的相互作用方式类似，但对本研究中测试的其他受体酪氨酸激酶或细胞内酪氨酸激酶没有活性。最后，6-丙烯酰胺基-4-苯胺基喹唑啉与一种效力相当但可逆的类似物之间的直接比较表明，在人表皮样癌异种移植模型中，不可逆抑制剂具有远优于可逆类似物的体内抗肿瘤活性，且在治疗剂量下未观察到明显的毒性。该化合物的活性谱是新一代酪氨酸激酶抑制剂的典型代表，在增生性疾病的治疗中具有巨大的应用前景。[1]
这些化合物的不可逆性可能在靶点抑制和体内药代动力学方面带来其他潜在优势。为了达到最佳抗肿瘤活性，可能需要长期抑制激酶靶点。不可逆抑制剂在这方面具有优势，因为它能永久性地消除现有的激酶活性，这种活性只有在新受体合成后才会恢复。目前的化合物只需在血浆中维持足够短的时间，使受体短暂暴露于药物，从而不可逆地抑制其激酶活性。之后，血浆浓度可以迅速下降，而激酶活性则保持失活状态。这具有降低最低有效血浆浓度、减少多次给药需求以及无需较长血浆半衰期而不影响疗效的潜在优势。所有这些因素都有助于降低因高血浆浓度或长时间血浆浓度下可能发生的非特异性相互作用而导致的毒性。这些药代动力学因素可能对图 6 中的数据有一定影响，图 6 清楚地表明，在本实验中给出的给药方案下，PD 168393 明显优于可逆化合物 PD 174265。[1] |
| 分子式 |
C17H15BRN4O
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|---|---|
| 分子量 |
371.24
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| 精确质量 |
370.043
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| 元素分析 |
C, 55.00; H, 4.07; Br, 21.52; N, 15.09; O, 4.31
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| CAS号 |
216163-53-0
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| PubChem CID |
4709
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
4.63
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| tPSA |
66.91
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
408
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
WUPUZEMRHDROEO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H15BrN4O/c1-2-16(23)21-13-6-7-15-14(9-13)17(20-10-19-15)22-12-5-3-4-11(18)8-12/h3-10H,2H2,1H3,(H,21,23)(H,19,20,22)
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| 化学名 |
N-[4-(3-bromoanilino)quinazolin-6-yl]propanamide
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| 别名 |
PD-174265; PD174265; pd 174265; 216163-53-0; N-{4-[(3-Bromophenyl)amino]quinazolin-6-Yl}propanamide; 4-[(3-Bromophenyl)amino]-6-propionylamidoquinazoline; 4-aminoquinazoline, 2a; PD-174265; CHEMBL188762; N-(4-((3-Bromophenyl)amino)quinazolin-6-yl)propionamide; PD 174265
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~336.72 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6937 mL | 13.4684 mL | 26.9368 mL | |
| 5 mM | 0.5387 mL | 2.6937 mL | 5.3874 mL | |
| 10 mM | 0.2694 mL | 1.3468 mL | 2.6937 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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