| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
human c-Met (Ki = 4.8 nM)
c-Met (hepatocyte growth factor receptor, HGFR). PF-04217903 phenolsulfonate binds to the ATP-binding site of c-Met kinase in a competitive manner with a Ki of 4.8 nM for human c-Met. It inhibits c-Met phosphorylation and downstream signaling, including Gab-1, Erk1/2, and AKT. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PF-04217903 酚磺酸盐（0.1-10000 nM；48-72 小时）可抑制 c-Met 扩增的人 GTL-16 胃癌细胞和 H1993 非小细胞肺癌细胞的生长，IC50 值分别为 12 nM 和 30 nM[1]。
PF-04217903 酚磺酸盐（1.5-3333 nM；48 小时）可诱导 GTL-16 细胞凋亡（IC50=31 nM）[1]。 PF-04217903 酚磺酸盐的 IC50 值与抑制这些细胞系中 c-Met 磷酸化的 IC50 值相当（IC50=7-12.5 nM），这意味着它可抑制多种 c-Met 过表达肿瘤细胞系（包括 GTL-16 和 H1993）中 HGF 介导的细胞迁移和 Matrigel 侵袭。 PF-04217903 酚磺酸盐对人 NCI-H441 肺癌细胞和 HT29 结肠癌细胞具有抑制活性[1]。 PF-04217903 酚磺酸盐对 c-Met-H1094R、c-Met-R988C 和 c-Met-T1010I 的 IC50 值分别为 3.1 nM、6.4 nM 和 6.7 nM，表明其抑制活性相当。c-Met-Y1230C 的 IC50 值 >10 μM，表明 PF-04217903 酚磺酸盐不具有抑制活性[3]。 PF-04217903 酚磺酸盐对 c-Met 扩增的人 GTL-16 胃癌细胞和 H1993 非小细胞肺癌细胞的生长具有抑制活性，IC50 值分别为 12 nM 和 30 nM。该化合物能以31 nM的IC50值诱导GTL-16细胞凋亡。该化合物能抑制c-Met过表达肿瘤细胞系中HGF介导的细胞迁移和Matrigel侵袭。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
苯酚磺酸盐（PF-04217903；口服，1–30 mg/kg；每日一次，连续16天）以剂量依赖的方式抑制肿瘤生长，且该作用与肿瘤中c-Met磷酸化水平的降低相关[1]。
PF-04217903苯酚磺酸盐（5–50 mg/kg，口服；每日一次，连续3天）在所有剂量水平下均可诱导U87MG异种移植瘤细胞凋亡（cleaved caspase-3），同时以剂量依赖的方式抑制c-Met、Gab-1、Erk1/2和AKT的磷酸化。在GTL-16和U87MG模型中，PF-04217903苯酚磺酸盐均能显著且剂量依赖性地降低人IL-8水平，并且在GTL-16模型中，它还能降低人VEGFA水平。在U87MG异种移植瘤中，PF-04217903酚磺酸盐显著提高磷酸化PDGFRβ水平[1]。 在异种移植瘤模型中，每日口服1-30 mg/kg的PF-04217903酚磺酸盐，连续16天，可呈剂量依赖性地抑制肿瘤生长，并与肿瘤中c-Met磷酸化水平的降低相关。每日一次，连续3天，以5-50 mg/kg的剂量给药，该化合物可诱导U87MG异种移植瘤细胞凋亡（cleaved caspase-3），并呈剂量依赖性地抑制c-Met、Gab-1、Erk1/2和AKT的磷酸化。 |
| 酶活实验 |
生化激酶活性测定[1]
c-Met 的催化活性采用连续耦合分光光度法进行定量，该方法通过分析 NADH 的消耗速率来确定 c-Met 随时间推移产生的 ADP。NADH 在 340 nm 处具有可测量的吸光度，其消耗量通过在指定时间点用分光光度计测量 340 nm 处吸光度的降低来测定。为了确定 Ki 值，将 PF-04217903 以不同浓度加入到含有测定试剂的测试孔中，并在 37°C 下孵育 10 分钟。该检测通过添加 c-Met 酶启动。 细胞激酶磷酸化 ELISA 检测[1] 将细胞接种于含 10% FBS 的培养基中的 96 孔板中，24 小时后转移至含 0.04% 牛血清白蛋白 (BSA) 的无血清培养基中。在研究配体依赖性 RTK 磷酸化的实验中，加入相应的生长因子，孵育至多 20 分钟。将细胞与 PF-04217903 和/或适当的配体孵育 1 小时后，制备细胞蛋白裂解液。采用标准夹心 ELISA 法评估所选蛋白激酶的总酪氨酸磷酸化水平。 生化激酶检测[2] c-MET 酶抑制作用采用先前描述的连续偶联分光光度法测定。该检测方法监测了在磷酸烯醇式丙酮酸 (PEP) 和偶联酶丙酮酸激酶 (PK) 和乳酸脱氢酶 (LDH) 存在下，ATP 再生过程中与 NADH 氧化偶联的 ATP 消耗（在 340 nm 处测量）。检测反应体系包含 0.30 mM ATP (4Km)、0.5 mM Met2 肽 (Ac-ARDMYDKEYYSVHNK)、20 mM MgCl2、1 mM PEP、330 μM NADH、2 mM DTT、15 单位/mL LDH、15 单位/mL PK 和待测化合物（终浓度为 1% DMSO），溶于 100 mM HEPES 缓冲液（pH 7.5，37 °C）。反应通过加入 50 nM c-Met N 端 His6 标签重组人酶（氨基酸残基 974–1390）启动。动力学和晶体学研究表明，这些抑制剂与ATP竞争，剂量-反应数据通过非线性最小二乘法拟合到竞争性抑制方程。 细胞激酶磷酸化ELISA检测[2] 所有实验均在标准条件下（37 °C和5% CO2）进行。IC50值通过浓度-反应曲线拟合计算，采用基于Microsoft Excel的四参数方法。将细胞接种于96孔板中，培养基中添加10%胎牛血清（FBS），24小时后转移至无血清培养基[含0.04%牛血清白蛋白（BSA）]。在研究配体依赖性RTK磷酸化的实验中，加入相应的生长因子，作用时间不超过20分钟。将细胞与抑制剂孵育 1 小时和/或与适当配体孵育指定时间后，用含 1 mmol/L Na3VO4 的 HBSS 洗涤一次，并制备细胞蛋白裂解液。随后，采用夹心 ELISA 法检测特定蛋白激酶的磷酸化水平。该方法使用特异性捕获抗体包被 96 孔板，并使用针对磷酸化酪氨酸残基的检测抗体。抗体包被的孔板依次进行以下步骤：(a) 在 4 °C 下与蛋白裂解液孵育过夜；(b) 用含 1% Tween 20 的 PBS 洗涤 7 次；(c) 与辣根过氧化物酶标记的抗总磷酸酪氨酸 (PY-20) 抗体 (1:500) 孵育 30 分钟；(d) 再次洗涤 7 次。 (e) 在 3,3,5,5-四甲基联苯胺过氧化物酶底物（Bio-Rad）中孵育以启动比色反应，加入 0.09 N H2SO4 终止反应；(f) 使用分光光度计在 450 nm 处测量吸光度。A549 细胞系用于 c-MET 细胞激酶磷酸化 ELISA 检测。 人微粒体稳定性研究[2] 将化合物 (1 μM) 在 37 °C 下孵育 30 分钟，最终体积为 200 μL，含有混合人肝微粒体（0.8 mg/mL 蛋白）和 2 mM NADPH 的 100 mM 磷酸钾缓冲液（pH 7.4）。预孵育 10 分钟后，加入 NADPH 启动反应。取等分孵育样品，用含0.1 μM丁螺环酮（内标）的冷甲醇沉淀蛋白，离心后取上清液进行LC-MS/MS分析。所有孵育实验均重复三次，孵育结束时母体药物的剩余百分比通过LC-MS/MS峰面积比值测定。激酶活性测定采用重组人c-Met酶。将化合物与该酶、ATP和肽底物一起孵育。通过竞争性结合实验测定激酶活性抑制情况，确定人c-Met的Ki值为4.8 nM。选择性评估采用包含208种激酶的激酶组。 |
| 细胞实验 |
细胞系：GTL-16、H1993细胞
浓度：0.1、1、10、100、1000、10000 nM 孵育时间：48-72小时 结果：抑制c-Met扩增的人GTL-16胃癌细胞和H1993非小细胞肺癌细胞的增殖，IC50值分别为12 nM和30 nM。 细胞增殖实验采用c-Met扩增的细胞系，如GTL-16和H1993。将细胞用不同浓度的化合物（0.1-10000 nM）处理48-72小时，并检测细胞活力。在用1.5-3333 nM化合物处理48小时后，评估GTL-16细胞的凋亡情况。 |
| 动物实验 |
雌性裸鼠（GTL-16异种移植模型）口服1、3、10、30 mg/kg，每日一次，连续16天。皮下异种移植模型建立于无胸腺小鼠中。[1] 将肿瘤细胞皮下植入每只小鼠的右侧腹部，使其生长至指定大小。对已建立肿瘤的无胸腺小鼠，分别以0.5%甲基纤维素悬液灌胃或植入装有药物溶液的微型Alzet泵的方式给予PF-04217903。使用电子数字游标卡尺测量肿瘤体积。抑制率（%）计算公式为：100 × {1 − [(治疗组末日体积 − 治疗组第1天体积)/(对照组末日体积 − 对照组第1天体积)]}。采用单因素方差分析（ANOVA）分析肿瘤体积。研究结束时，对小鼠实施安乐死并切除肿瘤。从肿瘤样本中提取蛋白质，并使用BSA测定法（Pierce）测定蛋白质浓度。采用捕获ELISA法或免疫印迹法测定肿瘤样本中目标蛋白的水平。
在携带GTL-16或U87MG肿瘤的小鼠异种移植模型中评估体内疗效。PF-04217903酚磺酸盐以1-30 mg/kg（GTL-16）或5-50 mg/kg（U87MG）的剂量每日一次口服给药，最多持续16天。评估肿瘤生长抑制、c-Met磷酸化和细胞凋亡标志物。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
该化合物的药代动力学特性已在临床前模型中得到表征。异种移植研究中口服给药后，证实该化合物具有良好的口服生物利用度。半衰期、清除率和生物利用度等详细的药代动力学参数需要从原始文献中进一步研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒理学研究中，PF-04217903 酚磺酸盐在治疗剂量下表现出可接受的安全性。然而，现有摘要中并未详细列出全面的毒性数据。与所有激酶抑制剂一样，应考虑潜在的脱靶效应和机制性毒性。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
2-[4-[3-(6-喹啉甲基)-5-三唑并[4,5-b]吡嗪基]-1-吡唑基]乙醇属于喹啉类化合物。PF-04217903 已用于肿瘤治疗研究的临床试验。MET 酪氨酸激酶抑制剂 PF-04217903 是一种小分子酪氨酸激酶抑制剂，具有较高的口服生物利用度和潜在的抗肿瘤活性。PF-04217903 选择性地结合并抑制 c-Met，从而破坏 c-Met 信号通路，这可能导致肿瘤细胞生长、迁移和侵袭受到抑制，并诱导表达 c-Met 的肿瘤细胞死亡。受体酪氨酸激酶c-Met，又称肝细胞生长因子（HGF）受体，在多种肿瘤细胞类型中过度表达或发生突变，并在肿瘤细胞增殖、存活、侵袭、转移和血管生成中发挥重要作用。由于c-Met通路在肿瘤生长、侵袭和转移中的关键作用，因此与多种人类癌症密切相关。PF-04217903是一种新型ATP竞争性小分子c-Met激酶抑制剂。与150多种激酶相比，PF-04217903对c-Met的选择性超过1000倍，使其成为迄今为止报道的选择性最高的c-Met抑制剂之一。体外实验表明，PF-04217903能够抑制MET扩增细胞系中肿瘤细胞的增殖、存活和迁移/侵袭。在体内，在耐受剂量下，PF-04217903 对携带 MET 基因扩增或肝细胞生长因子 (HGF)/c-Met 自分泌通路的肿瘤模型表现出显著的抗肿瘤活性。PF-04217903 的抗肿瘤疗效呈剂量依赖性，并与 c-Met 磷酸化、下游信号传导以及肿瘤细胞增殖/存活的抑制密切相关。在 c-Met 表达水平相对较高的人类异种移植瘤模型中，PF-04217903 对 c-Met 活性的完全抑制仅导致体内肿瘤生长的部分抑制（38%-46%）。在表达活化RON激酶的HT29模型中，PF-04217903与RON短发夹RNA（shRNA）敲低联合应用可诱导肿瘤细胞凋亡，其抗肿瘤疗效（77%）显著优于单独使用PF-04217903（38%）或单独使用RON shRNA（56%）。此外，PF-04217903在体外和体内均表现出强效的抗血管生成特性。PF-04217903还显著诱导U87MG异种移植瘤中磷酸化PDGFRβ（血小板衍生生长因子受体）水平，提示肿瘤细胞信号通路中可能存在癌基因转换机制，这可能是一种潜在的耐药机制，可减弱肿瘤对c-Met抑制剂的反应。总之，这些结果展示了高选择性抑制c-Met的应用，并为靶向具有不同c-Met失调机制的肿瘤提供了新的思路。[1] c-MET受体酪氨酸激酶因其在人类肿瘤发生和发展中的关键作用，已成为极具吸引力的肿瘤治疗靶点。在c-MET高通量筛选过程中，研究人员发现了一种吲哚肼化合物6，随后证实其对多种其他激酶具有极高的选择性。相关吲哚肼类c-MET抑制剂10与非磷酸化c-MET激酶结构域的共晶结构揭示了一种独特的结合模式，该模式与抑制剂优异的选择性密切相关。研究人员采用基于结构的药物设计方法，将化学不稳定的吲哚肼骨架替换为化学和代谢稳定的三唑并吡嗪骨架。在药物化学中，先导化合物的优化和筛选得到了2-(4-(1-(喹啉-6-基甲基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡嗪-6-基)-1H-吡唑-1-基)乙醇（化合物2，PF-04217903），一种高效且选择性的c-MET抑制剂。化合物2在c-MET依赖性肿瘤模型中显示出有效的肿瘤生长抑制作用，并具有良好的口服药代动力学性质和可接受的安全性。临床前研究表明其安全性良好。化合物2已进入肿瘤治疗的I期临床试验。[2]
PF-04217903酚磺酸盐是一种用于研究c-Met信号通路和评估c-Met抑制剂在癌症治疗中潜在疗效的研究化合物。该化合物尚未获准用于临床。它对 c-Met 相对于其他激酶的高选择性使其成为解析 c-Met 依赖性生物过程的宝贵工具。 |
| 分子式 |
C19H16N8O
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|---|---|
| 分子量 |
372.383341789246
|
| 精确质量 |
372.145
|
| 元素分析 |
C, 54.94; H, 4.06; N, 20.50; O, 14.64; S, 5.87
|
| CAS号 |
1159490-85-3
|
| 相关CAS号 |
PF-04217903;956905-27-4;PF-04217903 mesylate;956906-93-7
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| PubChem CID |
17754438
|
| 外观&性状 |
Solid powder
|
| LogP |
1.673
|
| tPSA |
107.43
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
28
|
| 分子复杂度/Complexity |
524
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1=CC2=C(C=CC(=C2)CN3C4=NC(=CN=C4N=N3)C5=CN(N=C5)CCO)N=C1
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| InChi Key |
PDMUGYOXRHVNMO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H16N8O/c28-7-6-26-12-15(9-22-26)17-10-21-18-19(23-17)27(25-24-18)11-13-3-4-16-14(8-13)2-1-5-20-16/h1-5,8-10,12,28H,6-7,11H2
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| 化学名 |
2-[4-[3-(quinolin-6-ylmethyl)triazolo[4,5-b]pyrazin-5-yl]pyrazol-1-yl]ethanol
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| 别名 |
PF-04217903 phenolsulfonate; PF 04217903 phenolsulfonate; PF04217903 phenolsulfonate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6854 mL | 13.4271 mL | 26.8543 mL | |
| 5 mM | 0.5371 mL | 2.6854 mL | 5.3709 mL | |
| 10 mM | 0.2685 mL | 1.3427 mL | 2.6854 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00706355 | Terminated | Drug: PF-04217903 | Neoplasms | Pfizer | August 2008 | Phase 1 |
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