| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Histone Methyltransferase SETD7 (also known as KMT7) (no numerical data on IC50/Ki provided; focus on computational analysis of inhibitory differences between PFI-2 enantiomers against SETD7) [1]
- Histone Methyltransferase SETD7 (IC50: ~2 nM for recombinant SETD7 enzyme, measured via HTRF-based assay; EC50: ~10 nM for inhibition of H3K4 monomethylation (H3K4me1) in renal fibroblasts (NRK-49F cells), determined via Western blot) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
(R)-PFI-2 表现出强抑制活性，IC50 值为 2.0 nM，而 (S)-PFI-2 表现出抑制活性，IC50 值为 1.0 μM[1]。
1. 肾成纤维细胞中SETD7介导的组蛋白修饰抑制：大鼠肾间质成纤维细胞（NRK-49F）用PFI-2（0.01-1 μM）处理24小时后，H3K4me1水平呈剂量依赖性降低（Western blot）。0.1 μM时，H3K4me1较溶剂对照组降低约60%；总H3及其他组蛋白修饰（H3K9me3、H3K27me3）无变化[2] 2. 肾成纤维细胞抗增殖活性：PFI-2以剂量依赖性方式抑制NRK-49F细胞增殖（MTT法，处理72小时），IC50约5 μM。10 μM时，细胞活力较对照组降低约70%，而对正常肾 tubular上皮细胞（HK-2）无显著细胞毒性（10 μM时活力>80%）[2] 3. 纤维化标志物表达抑制：NRK-49F细胞经5 ng/mL TGF-β1刺激（诱导纤维化）并用PFI-2（1-10 μM）处理48小时后，α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和I型胶原（COL1A1）呈剂量依赖性下调（Western blot和qPCR）。5 μM时，α-SMA蛋白水平降低约55%，COL1A1 mRNA降低约45%（相较于TGF-β1刺激对照组）[2] 4. 免疫荧光分析：5 μM PFI-2+TGF-β1处理的NRK-49F细胞，α-SMA阳性应力纤维荧光强度较单独TGF-β1组降低约60%[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）治疗 FA 肾病可减缓肾纤维化的进展，同时维持肾功能[2]。 FA 损伤后，PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）减少 ECM 积聚和成纤维细胞活化 [2]。 PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）抑制 Th2 细胞因子信号传导的激活和 M2 巨噬细胞的极化[2]。 PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）抑制 FA 处理的肾脏中骨髓肌成纤维细胞的形成以及 M2 巨噬细胞和肌成纤维细胞之间的转变[2]。在梗阻的肾脏中，PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）减少了 M2 巨噬细胞的极化以及 M2 巨噬细胞向肌成纤维细胞的转变[2]。 UUO 损伤后，PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）可减少髓样肌成纤维细胞的形成和肾纤维化[2]。 PFI-2（腹腔注射，200 μM，每周两次）可减少 FA 肾病中的炎症细胞浸润、炎症化学合成和 NF-κB 激活。
1. 叶酸诱导肾纤维化模型（C57BL/6小鼠，雄性，8-10周龄）：小鼠单次腹腔注射250 mg/kg叶酸诱导肾纤维化，叶酸注射后第7天，将小鼠随机分为两组（每组6只）：（1）溶剂组：10% DMSO+90%生理盐水（每日1次腹腔注射）；（2）PFI-2组：10 mg/kg（每日1次腹腔注射），处理持续14天。 - 肾功能：PFI-2组血清肌酐和血尿素氮（BUN）水平分别较溶剂组降低约40%和35%。 - 纤维化评估：Masson三色染色显示，PFI-2组肾胶原沉积减少约50%；肾组织Western blot显示，α-SMA降低约55%、COL1A1降低约48%，同时H3K4me1降低约60%[2] 2. 单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾纤维化模型（C57BL/6小鼠，雄性，8-10周龄）：小鼠行UUO手术诱导肾纤维化，手术当天起，用PFI-2（10 mg/kg，每日1次腹腔注射）或溶剂处理14天（每组6只）。 - 纤维化结果：梗阻肾免疫组化（IHC）显示，PFI-2组α-SMA阳性细胞减少约52%、胶原沉积减少约47%；qPCR证实纤维化基因（α-SMA、COL1A1、TGF-β1）下调约40-50%[2] |
| 酶活实验 |
1. 重组SETD7酶活实验（HTRF法）：
- 反应体系：50 mM Tris-HCl（pH 8.0）、5 mM MgCl2、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA、20 nM重组SETD7酶、1 μM生物素化组蛋白H3（1-21 aa）肽（底物）、2 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM）及不同浓度的PFI-2（0.001-10 μM）。 - 孵育与检测：混合物37°C孵育60分钟，加入Eu标记抗H3K4me1抗体和链霉亲和素偶联XL665后，检测时间分辨荧光共振能量转移（HTRF）信号（激发光337 nm，发射光620 nm和665 nm），根据665 nm/620 nm信号比计算IC50[2] |
| 细胞实验 |
1. 组蛋白及纤维化标志物Western blot实验（NRK-49F细胞）：
- 细胞培养：NRK-49F细胞在含10% FBS、1%青霉素-链霉素的DMEM/F12培养基中，37°C（5% CO2）培养。 - 药物处理：细胞以2×10^5个/孔接种于6孔板，用5 ng/mL TGF-β1刺激（诱导纤维化）并加入PFI-2（0.01-10 μM）处理24-48小时。 - 蛋白提取与检测：细胞用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解，BCA法测定蛋白浓度；30 μg蛋白经12% SDS-PAGE电泳后转印至PVDF膜，5%脱脂牛奶（TBST）封闭1小时；膜与一抗（抗H3K4me1、抗总H3、抗α-SMA、抗COL1A1、抗β-actin）4°C孵育过夜，再与HRP偶联二抗室温孵育1小时，ECL试剂显影[2] 2. MTT细胞增殖实验（NRK-49F和HK-2细胞）： - 细胞接种：NRK-49F细胞以5×10^3个/孔、HK-2细胞以4×10^3个/孔接种于96孔板。 - 药物处理：贴壁24小时后加入PFI-2（0.1-20 μM），37°C（5% CO2）孵育72小时。 - 活力检测：每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时后弃上清，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，检测570 nm处吸光度并计算IC50[2] 3. 纤维化基因qPCR实验（NRK-49F细胞）： - RNA提取：用RNA提取试剂盒从PFI-2处理的NRK-49F细胞中提取总RNA，逆转录合成cDNA。 - 实时定量PCR：使用SYBR Green预混液和基因特异性引物（α-SMA、COL1A1、TGF-β1，内参基因为GAPDH）进行qPCR，采用2^(-ΔΔCt)法计算相对基因表达量[2] 4. α-SMA免疫荧光实验（NRK-49F细胞）： - 细胞接种于24孔板盖玻片，用5 μM PFI-2+TGF-β1处理48小时后，4%多聚甲醛固定、0.1% Triton X-100透化；5% BSA封闭后，一抗（抗α-SMA）4°C孵育过夜，再加入Alexa Fluor 488偶联二抗；DAPI染核，ImageJ定量荧光强度[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，20-25克）[2]
剂量：200 μM（PFI-2用100 μL 0.1% (v/v) DMSO稀释至200 μM/100 μL） 给药途径：腹腔注射，每周两次 实验结果：骨髓来源的肌成纤维细胞减少，CD206+/α-平滑肌肌动蛋白+细胞减少，肾纤维化程度降低（P<0.01）。叶酸治疗后，肾脏中炎症细胞浸润减少，促炎细胞因子和趋化因子的产生减少（P<0.01）。抑制叶酸肾病中 NF-κB p65+ 细胞的积累 (P<0.01)。 1. 叶酸诱导的肾纤维化模型： - 模型建立：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄）禁食 12 小时后，单次腹腔注射叶酸（250 mg/kg，溶于 0.3 M NaHCO3）。对照组小鼠仅注射 0.3 M NaHCO3。 - 分组和给药：叶酸注射后第 7 天，将小鼠随机分为两组（每组 n=6）：（1）溶剂组：10% DMSO + 90% 生理盐水（腹腔注射，每日一次）； (2) PFI-2：10 mg/kg（溶于 10% DMSO + 90% 生理盐水，腹腔注射，每日一次）。治疗持续 14 天。 - 取样：第 21 天，处死小鼠；采集血液用于血清肌酐/尿素氮检测，并取出肾脏（一个肾脏用 4% 福尔马林固定用于 Masson 染色/免疫组化，另一个肾脏冷冻用于蛋白质印迹/定量 PCR）[2] 2. UUO 诱导的肾纤维化模型： - 手术：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄）在麻醉下接受 UUO 手术：用 4-0 丝线结扎左侧输尿管。假手术小鼠作为对照。 - 分组和给药：从手术当天起，小鼠接受PFI-2（10 mg/kg，腹腔注射，每日一次）或载体处理，持续14天（每组n=6）。 - 取样：第14天，处死小鼠；收集梗阻肾脏进行免疫组化（IHC）、蛋白质印迹（Western blot）和定量PCR（qPCR）分析[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体内毒性（小鼠模型）：
- 体重：连续14天给予10 mg/kg PFI-2治疗的小鼠（包括叶酸模型和UUO模型）与溶媒组相比，体重未出现显著下降（<5%）。 - 器官毒性：血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）（肝功能指标）水平均在正常范围内。肝脏、脾脏和心脏的组织学检查未发现药物引起的病变。 2. 血浆蛋白结合率：PFI-2在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率约为90%（通过超滤法测定）[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. PFI-2 对映异构体的计算分析：PFI-2 存在两种对映异构体（S-PFI-2 和 R-PFI-2）。分子动力学模拟和结合自由能计算表明，S-PFI-2 与 SETD7 形成更多的氢键（例如，与 Asp265 和 Tyr334 残基），并且具有更低的结合自由能（~-35 kcal/mol，而 R-PFI-2 为 ~-28 kcal/mol），这解释了其对 SETD7 更强的抑制活性 [1]。2. 在肾纤维化中的作用机制：PFI-2 选择性抑制 SETD7，降低肾成纤维细胞中 H3K4me1 的水平。 PFI-2通过抑制SETD7介导的转录激活，下调纤维化基因（α-SMA、COL1A1）的表达，从而抑制肾纤维化中肾成纤维细胞的活化和细胞外基质的积累[2]。
3. 治疗潜力：PFI-2在两种临床前模型（叶酸诱导和UUO诱导）中均能减轻肾纤维化，支持其作为治疗肾纤维化疾病的潜在药物。其对正常肾细胞（HK-2）和主要器官的低毒性进一步支持了其转化价值[2]。 |
| 分子式 |
C23H25F4N3O3S
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|---|---|---|
| 分子量 |
499.52
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| 精确质量 |
499.155
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| CAS号 |
1627676-59-8
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| 相关CAS号 |
PFI-2 hydrochloride;1627607-87-7
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| PubChem CID |
71300326
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.371±0.06 g/cm3
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| 沸点 |
642.7±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
342.5±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.566
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| LogP |
3.55
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| tPSA |
86.89
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
813
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O=S(C1=CC2=C(CNCC2)C(F)=C1)(N[C@H](CC3=CC=CC(C(F)(F)F)=C3)C(N4CCCC4)=O)=O
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| InChi Key |
ZADKZNVAJGEFLC-ZMBIFBSDSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H25F4N3O3S.ClH/c24-20-13-18(12-16-6-7-28-14-19(16)20)34(32,33)29-21(22(31)30-8-1-2-9-30)11-15-4-3-5-17(10-15)23(25,26)27;/h3-5,10,12-13,21,28-29H,1-2,6-9,11,14H2;1H/t21-;/m1./s1
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| 化学名 |
(R)-8-fluoro-N-(1-oxo-1-(pyrrolidin-1-yl)-3-(3-(trifluoromethyl)phenyl)propan-2-yl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-6-sulfonamide hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0019 mL | 10.0096 mL | 20.0192 mL | |
| 5 mM | 0.4004 mL | 2.0019 mL | 4.0038 mL | |
| 10 mM | 0.2002 mL | 1.0010 mL | 2.0019 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT05246202 | Recruiting | Behavioral: Alcohol-Anxiety Personalized Feedback Intervention 2.0 |
Alcohol Abuse | University of Houston | August 9, 2022 | Not Applicable |
|
|---|
BI-9466
MRK-740-NC
SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
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