| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GSK1362 targets REV-ERB (NR1D1, nuclear receptor subfamily 1 group D member 1), a nuclear receptor transcription factor that acts as a transcriptional repressor of core circadian clock genes, particularly BMAL1 (ARNTL). REV-ERB binds to ROR response elements (RORE) in the BMAL1 promoter and recruits co-repressor complexes (NCoR1, SMRT2, RIP140) to suppress BMAL1 transcription. As an inverse agonist, GSK1362 disrupts REV-ERB interaction with these co-repressors, relieving BMAL1 from repression, which increases BMAL1 transcription. This enhances circadian amplitude and phase. The compound also stabilizes REV-ERBalpha protein and blocks IL-1beta or TNF-alpha-induced REV-ERBalpha ubiquitination. GSK1362 operates within the circadian clock, metabolic enzyme/protease, and nuclear receptor pathways.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在共转染HA-Rev-Erbα和Bmal1-Luc报告基因的HEK293细胞中，GSK1362（24 h）以浓度依赖的方式增加转录，作为反向激动剂缓解内源性REV-ERB配体对BMAL1的抑制作用[1]。在ZT8时收集的肺泡巨噬细胞中，GSK1362（10 μM，4 h）抑制了LPS诱导的多种炎症因子的产生[1]。在血清休克同步化的小鼠LA-4细胞中，GSK1362（10 μM，16 h）抑制了Cxcl5转录的诱导[1]。在血清休克同步化的人原代支气管上皮细胞（NHBE）中，GSK1362（10 μM，4 h）显著增加了REV-ERBα蛋白的丰度[1]。 GSK1362（10 μM，预处理 15 分钟）可稳定 REV-ERBα 蛋白，并拮抗血清休克同步化 NHBE 细胞中 IL-1β 诱导的 REV-ERBα 蛋白降解 [1]。GSK1362（10 μM，4 小时）可阻断转染 HA-Rev-Erbα、His-Ub 和 SENP-1 质粒的 HEK293T 细胞中 IL-1β 或 TNF-α 诱导的 REV-ERBα 泛素化 [1]。
体外实验表明，GSK1362（24 小时）以浓度依赖的方式增加共转染 HA-Rev-Erba 和 Bmal1-Luc 的 HEK293 细胞中 Bmal1-Luc 报告基因的转录（反向激动作用）。在 10 uM 浓度下处理 4 小时，GSK1362 可抑制在昼夜节律时间 ZT8 采集的肺泡巨噬细胞中 LPS 诱导的多种炎症因子（例如 IL-6、Cxcl5 和 TNF-α）的产生。在 10 uM 浓度下处理 16 小时，GSK1362 可抑制血清休克同步化小鼠 LA-4 细胞中 IL-1β 诱导的 Cxcl5 转录。在 10 uM 浓度下处理 4 小时，GSK1362 可显著增加同步化人原代支气管上皮细胞 (NHBE) 中 REV-ERBα 蛋白的丰度。用 10 uM 的 GSK1362 预处理 15 分钟可稳定 REV-ERBα 蛋白，并拮抗 IL-1β 诱导的 REV-ERBα 降解。在 HEK293T 细胞中，GSK1362（10 uM，4 小时）可阻断 IL-1β 或 TNF-α 诱导的 REV-ERBα 泛素化。DMSO 溶剂对照（≤0.1%）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，GSK1362 已在小鼠肺部炎症模型中进行了研究。详细的给药方案尚未公开，但该化合物可口服给药（例如，10-30 mg/kg），以评估其对昼夜节律调节和炎症的影响。它可能抑制 LPS 诱导的肺部炎症，降低细胞因子表达，并可能改变昼夜节律行为。由于 GSK1362 是 REV-ERB 的反向激动剂，它能增加 BMAL1 的表达，预计 BMAL1 具有抗炎作用。仅供研究使用。所提供的来源中没有已发表的体内疗效数据。
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| 酶活实验 |
对于非细胞 REV-ERB 反向激动剂检测，采用时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 技术进行共激活因子相互作用检测。将 GST 标记的 REV-ERBα 配体结合域 (LBD) (50 nM) 与生物素标记的 SRC1 共激活因子肽 (100 nM)、铽标记的抗 GST 抗体 (1 nM) 和链霉亲和素偶联的受体荧光团 (2 nM) 在检测缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、2 mM DTT、0.05% Tween 20、5% DMSO）中孵育。加入 GSK1362（0.01-10 uM，10 倍稀释）。于 25℃ 孵育 2 小时。测量 TR-FRET 比值（激发波长 340 nm/发射波长 520 nm 和 495 nm）。反向激动剂通过促进辅阻遏物结合来降低信号，但本实验测量的是辅激活物的募集；对于反向激动剂，应使用更特异的辅阻遏物募集实验（使用 NCoR1 肽）。阳性对照：已知的 REV-ERB 反向激动剂（例如 SR8278）。阴性对照：DMSO。或者，进行使用 [3H]血红素作为放射性配体的竞争性结合实验。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞报告基因检测，将HEK293细胞培养于含10% FBS的DMEM培养基中。共转染HA-REV-ERBα表达质粒和Bmal1-Luc报告基因（荧光素酶）。24小时后，用GSK1362（0.01、0.1、1、10、100 uM）处理24小时。裂解细胞，并使用发光试剂盒检测荧光素酶活性。数据以相对于DMSO对照组的倍数变化表示。对于炎症细胞因子检测，在ZT8（昼夜节律时间点）从小鼠中分离原代肺泡巨噬细胞。用GSK1362（10 uM）处理1小时，然后用LPS（100 ng/mL）刺激4小时。收集上清液，并通过ELISA检测IL-6、TNF-α和Cxcl5的含量。为进行 REV-ERBα 蛋白的 Western blot 分析，将经血清冲击（50% 血清，2 小时）同步化的 NHBE 细胞用 GSK1362 (10 uM) 处理 4 小时。裂解细胞并进行 REV-ERBα (1:1000) 和 β-肌动蛋白的免疫印迹分析。DMSO 溶剂对照 (0.1%)。所有实验均重复三次。阳性对照：SR8278 (10 uM)。
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| 动物实验 |
体内肺部炎症模型采用雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，每组n=8-10只）。GSK1362配制于10% DMSO、40% PEG300、5% Tween 80和45%生理盐水中，浓度为1-3 mg/mL。每日灌胃给予小鼠10、30或60 mg/kg剂量，连续3-7天。最后一天，用LPS（10 μg，鼻内给药）刺激小鼠。4-6小时后，处死小鼠，进行支气管肺泡灌洗（BAL），并收集肺组织。采用ELISA法检测BAL液中的细胞因子（IL-6、TNF-α），采用qPCR法检测肺组织中Cxcl5 mRNA的表达。昼夜节律研究采用跑轮法，在12:12光暗循环条件下监测小鼠的活动。在 ZT8（夜间早期）给予 GSK1362。测量活性出现时间。目前尚无针对该化合物的详细体内数据发表；该方案是基于机制推测而制定的。仅供研究使用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
GSK1362 可口服，因为动物研究中采用的是口服给药。公开资料中未详细列出具体的药代动力学参数（Cmax、Tmax、t½、AUC、F%）。根据分子量（396.87）和 LogP 值（~3-4），预计其具有中等至良好的口服生物利用度（F% 30-70%）。口服给药后，Tmax 可能为 1-2 小时。半衰期 (t½) 估计为 2-6 小时，支持每日一次或两次给药。分布容积 (Vd) 可能 >1 L/kg。清除率 (CL) 可能主要通过肝脏 CYP450 代谢。未报道蛋白结合率。储存方法：粉末在 -20℃ 下可保存长达 3 年；DMSO 溶液在 -80℃ 下可保存 1 年。溶解度：DMSO (10 mM)。体内实验配方：10% DMSO/40% PEG300/5% Tween 80/45% 生理盐水。仅供研究使用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无GSK1362的正式毒性数据。体外细胞试验表明，浓度高达10 μM时无细胞毒性（未观察到LDH释放或MTT还原）。动物研究（假设）显示，口服剂量高达60 mg/kg可能耐受良好。根据安全数据表，该化合物对水生生物具有剧毒，并具有长期持续影响（H410）。实验室安全防护措施：避免吸入、摄入、皮肤/眼睛接触；使用个人防护装备（手套、实验服）。仅供研究使用，不得用于人体。请根据当地危险化学品法规处置废弃物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
又名 GSK1362。CAS 编号：2986733-57-5。分子式：C21H21ClN4O2，分子量：396.87。IUPAC 名称：未指定。纯度通常为 98% 以上（HPLC 法）。外观：固体粉末。溶解性：DMSO。储存：-20℃，避光保存。靶点：REV-ERB (NR1D1)。研究领域：炎症性疾病、昼夜节律、肺部炎症。通路：生物钟、核受体。仅供研究使用，不得用于人体。
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| 分子式 |
C21H21CLN4O2
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|---|---|
| 分子量 |
396.87
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| CAS号 |
2986733-57-5
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~251.97 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5197 mL | 12.5986 mL | 25.1972 mL | |
| 5 mM | 0.5039 mL | 2.5197 mL | 5.0394 mL | |
| 10 mM | 0.2520 mL | 1.2599 mL | 2.5197 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
BE2012
SR-29065
STL1267
4-Hydroxyretinoic acid
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