| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Antigenic epitopes; CD8 T-cells
Insulin β Chain Peptide (15-23) targets the immune system, specifically CD8 T-cells. It is one of the earliest antigenic epitopes to which CD8 T-cells respond. As an insulin-derived peptide recognized by islet-associated T cells, it is involved in the autoimmune response in type 1 diabetes. The peptide is used to study T-cell activation and diabetes pathogenesis. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
胰岛素β链肽(15-23)是一种高度致糖尿病的CD8 T细胞克隆，在非肥胖糖尿病(NOD)小鼠中，它特异性识别低亲和力的胰岛素肽B15-23，并且对该抗原有反应的细胞是胰岛最早浸润的细胞之一。我们旨在研究这些胰岛素反应性T细胞的选择、激活和致糖尿病能力的发育。[3]体外实验表明，胰岛素β链肽(15-23)（1 μg/mL，24小时）可刺激从G9Ca-/- NOD小鼠中纯化的CD8 T细胞。该肽可被胰岛相关T细胞识别。它可用于糖尿病研究中检测IFN-β和IL-17的产生。这些特性使其成为研究自身免疫性糖尿病和T细胞免疫学的宝贵工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
尽管胸腺表达胰岛素，但CD8 T细胞仍被有效筛选，且以CD8单阳性胸腺细胞为主。外周淋巴结T细胞具有幼稚表型（CD44lo，CD62Lhi），并能对胰岛素B15-23肽和胰岛素产生增殖反应。这些细胞在胰岛素肽刺激下产生干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α，并对胰岛素肽包被的靶细胞具有细胞毒性。体内实验表明，TCR转基因小鼠会发生胰岛炎，但不会自发性糖尿病。然而，这些小鼠在免疫接种后会发生糖尿病，并且活化的转基因T细胞能够将糖尿病转移给免疫缺陷的NOD.scid小鼠。结论：对低亲和力胰岛素B链肽段有反应的自身免疫性CD8 T细胞可逃避胸腺阴性选择，需要在体内激活才能引发糖尿病。[3]
在体内，胰岛素β链肽段(15-23)（50 µg，腹腔注射）与CpG 1826寡核苷酸联合使用可促进G9Cα-/- NOD小鼠快速发展为糖尿病。这表明该肽段可加速易感小鼠模型中自身免疫性糖尿病的发生。该肽段可用于糖尿病和免疫学研究。 |
| 酶活实验 |
体外T细胞活化试验中，胰岛素β链肽（15-23）通常包括将CD8 T细胞与该肽和抗原呈递细胞共同培养。T细胞活化通过检测增殖（³H-胸苷掺入或CFSE稀释）、细胞因子产生（通过ELISA或ELISPOT检测IFN-γ和IL-17）以及流式细胞术检测活化标志物的表达来评估。该肽的使用浓度约为1 μg/mL。
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| 细胞实验 |
增殖和细胞毒性试验：增殖。[3]
将5至8周龄G9Cα−/−.NOD小鼠的胰岛素反应性CD8 T细胞与骨髓来源的树突状细胞和B15-23肽或流感血凝素肽IYSTVASSL（对照）在RPMI完全培养基中共培养，以检测肽反应。同样，使用可溶性胰岛素或钥孔血蓝蛋白（对照）作为抗原检测蛋白质交叉呈递反应。使用阳性选择磁珠（Miltenyi Biotec）从G9Cα−/−.NOD小鼠的脾细胞中纯化CD8 T细胞，纯度>95%。培养 3 天后，用 [3H]胸苷脉冲处理细胞 14 小时，以确定增殖情况。 细胞毒性。[3] 从 5 至 8 周龄 G9Cα−/−.NOD 小鼠中纯化的 CD8 T 细胞，直接用于体外实验或用 1 μg/ml 胰岛素 B15-23 肽预刺激 24 小时后收集，并与 104 个 51Cr-铬酸钠（Amersham）标记的 P815 细胞以及 B15-23 胰岛素肽以 10:1 的效应细胞与靶细胞 (E:T) 比例共培养 16 小时。特异性裂解率的计算公式为 [(细胞毒性释放量 − 最小释放量)/(最大裂解量 − 最小释放量)] × 100%，其中最小释放量 (min) 对应于自发裂解，最大裂解量 (max) 对应于添加 Triton-X100 诱导的裂解。 胰岛素β链肽 (15-23) 的体外细胞活性测定通常使用从 NOD 小鼠或其他相关品系中纯化的 CD8 T 细胞。将细胞与肽和抗原呈递细胞共培养，并通过增殖、细胞因子产生和活化标志物表达来评估 T 细胞活化。该肽还用于糖尿病研究中 IFN-β 和 IL-17 的产生检测。 |
| 动物实验 |
在本研究中，研究人员构建了一种T细胞受体（TCR）转基因小鼠，该小鼠表达G9C8胰岛素反应性CD8 T细胞克隆的克隆TCR Vα18/Vβ6受体。将这些小鼠与TCRCα-/-小鼠杂交，使大多数T细胞表达克隆型TCR，并研究了这些细胞的表型和功能。[3]
体内免疫。[3] 将50 μg B15-23肽与不同浓度的CpG 1826寡核苷酸（Coley Pharmaceuticals）腹腔注射到G9Cα−/−.NOD小鼠体内进行免疫。9至21天后，再次注射相同剂量。对照组分别注射 50 μg B15-23 肽或不同剂量的 CpG。 糖尿病的诊断。[3] 糖尿病的初步检测方法是检测糖尿，并通过血糖测量（>13.9 mmol/l/l）进行确认。 糖尿病的过继转移。[3] 从 G9Cα−/−.NOD 小鼠中分离纯化 5–7 × 10⁶ 个 CD8 T 细胞，这些细胞可以直接从体外取出，也可以用 CpG 成熟的骨髓来源树突状细胞和胰岛素 B15-23 肽预激活。将细胞洗涤后，重悬于 200 μl 生理盐水中，然后静脉注射到 6 周龄 NOD.scid 小鼠、3 周龄 NOD 小鼠和 6 周龄 NOD 小鼠体内。从6周龄幼鼠（10⁷）或已患糖尿病的小鼠（4–10 × 10⁶）中纯化的CD4 T细胞，经静脉注射转移至3至4周龄的G9Cα−/−.NOD小鼠。 胰岛素反应性TCR转基因小鼠的构建。[3] 通过从G9C8克隆T细胞（23）中分离TCR基因组DNA，构建了胰岛素特异性TCR转基因小鼠。此前研究表明，这些T细胞对胰岛素B链的15-23位氨基酸具有特异性反应性。纯化TCRα（Vα18S1 Jα18 Cα）和β（Vβ6S1 Dβ1.1 Jβ2.3 Cβ1）链DNA，并将其克隆到pTαcass和pTβcass载体中。将克隆构建体直接注射到NOD小鼠卵子中，生成独立的TCRα和TCRβ创始品系，然后将这些品系进行杂交，得到αβ TCR转基因小鼠（G9NOD）。分别生成了三个独立的TCRα创始品系（品系17、22和24）和三个独立的TCRβ创始品系（品系1、2和3），并将α品系17、22和24分别与β品系2和3进行杂交。各品系在选择和功能表型方面的结果相似（数据未显示），因此，选择TCRα品系22和TCRβ品系2用于所有后续研究。[3] 为了生成具有特定TCR库的αβ TCR转基因小鼠，将αβ TCR转基因小鼠与NOD.Cα−/−小鼠杂交，生成G9Cα−/−.NOD小鼠。 NOD.Cα−/−小鼠是通过将TCR.Cα−/−小鼠（B6/129背景）与NOD/Caj小鼠回交20代以上而获得的，该实验室由RS Sherwin（耶鲁大学）教授领导。G9RAG−/−.NOD小鼠是通过将αβ TCR转基因小鼠与NOD.RAG2−/−小鼠杂交而获得的，而NOD.RAG2−/−小鼠则是通过将RAG2−/−小鼠与NOD/Caj小鼠回交12代以上而获得的。为了获得G9Cα−/−.RIP-B7.1 NOD小鼠，首先将RIP-B7.1小鼠与NOD.Cα−/−小鼠回交10代，然后进行同系杂交以获得NOD.Cα−/−RIP-B7.1小鼠，最后再与G9Cα−/−.NOD小鼠杂交以获得G9Cα−/−.RIP-B7.1 NOD小鼠。 NOD.scid小鼠饲养于屏障房内的微隔离器或扫描容器中。 已在G9Cα-/- NOD小鼠中进行了胰岛素β链肽(15-23)的体内动物实验。该肽（50 µg，腹腔注射）与CpG 1826寡核苷酸联合给药。实验终点包括糖尿病的发生（血糖监测）、胰岛炎评分和T细胞反应。该肽在该模型中促进了糖尿病的快速发展。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
胰岛素β链肽(15-23)的药代动力学特性具有肽类药物的典型特征。该化合物的分子量为1009.18 g/mol，分子式为C₄₄H₇₂N₁₂O₁₃S。作为一种肽类药物，其口服生物利用度预计有限，通常采用注射给药。储存条件：-20℃，避光、干燥、密封保存。纯度≥95.68%。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
胰岛素β链肽(15-23)的毒理学特征尚未得到充分研究。作为一种用于研究的肽类药物，其治疗开发需要进行全面的毒理学评估，包括急性毒性、遗传毒性和重复给药研究。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施。
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| 参考文献 |
[1]. Amrani A, et al. Progression of autoimmune diabetes driven by avidity maturation of a T-cell population. Nature. 2000;406(6797):739-742.
[2]. Takaki T, et al. Requirement for both H-2Db and H-2Kd for the induction of diabetes by the promiscuous CD8+ T cell clonotype AI4. J Immunol. 2004;173(4):2530-2541. |
| 其他信息 |
由于未知原因，靶组织中单核细胞的长期炎症可导致自身免疫性疾病（例如1型糖尿病）的发生。本研究表明，在非肥胖糖尿病（NOD）小鼠中，胰岛炎症发展为显性糖尿病是由携带CD8抗原的胰岛β细胞特异性T淋巴细胞优势群体的“亲和力成熟”驱动的。该T淋巴细胞群体在主要组织相容性复合体（MHC）I类分子H-2Kd的背景下识别两种相关肽（NRP和NRP-A7）。随着糖尿病前期NOD小鼠年龄的增长，其胰岛相关CD8+ T淋巴细胞中NRP-A7反应性细胞的数量增加，并且这些细胞对NRP-A7/H-2Kd四聚体的结合特异性、亲和力和半衰期均有所提高。用可溶性NRP-A7肽重复治疗糖尿病前期NOD小鼠，可选择性地清除表达对肽-MHC结合具有最高亲和力且解离速率最低的T细胞受体的克隆，从而抑制NRP-A7反应性CD8+ T细胞群的亲和力成熟。这抑制了局部产生针对β细胞的细胞毒性T细胞，并阻止了严重胰岛炎发展为糖尿病。我们得出结论，致病性T细胞群的亲和力成熟可能是自身免疫性疾病中良性炎症发展为显性疾病的关键事件。[1]NOD小鼠是人类自身免疫性1型糖尿病的模型。CD8+ T细胞对于破坏产生胰岛素的胰腺β细胞至关重要，而这正是该疾病的特征。 AI4 是一种致病性 CD8+ T 细胞克隆，分离自 5 周龄雌性 NOD 小鼠的胰岛，可在缺乏 CD4+ T 细胞辅助的情况下诱发明显的糖尿病。近期利用 MHC 同源 NOD 小鼠的研究表明，AI4 TCR 表现出显著的分子异质性，因为克隆选择可受多种 MHC 分子（包括一些 II 类变体）的影响。本研究旨在初步确定类似的分子异质性是否也反映在成熟 AI4 CTL 的效应功能中。我们利用脾细胞和骨髓疾病转移模型以及体外胰岛杀伤实验发现，AI4 对 β 细胞的有效识别和破坏需要 β 细胞同时表达 H-2D(b) 和 H-2Kd I 类 MHC 分子。我们使用重组肽库证实了 AI4 TCR 与 H-2D(b) 和 H-2Kd 的相互作用能力。这种方法还使我们能够鉴定出AI4以H-2D(b)限制性方式识别的模拟表位肽。利用ELISPOT和模拟表位/H-2D(b)四聚体分析，我们首次证实AI4代表了糖尿病前期NOD小鼠胰岛浸润中易于检测的T细胞群。我们鉴定的AI4样T细胞配体将有助于进一步表征和调控这种致病性且具有广泛抗原性的T细胞群。[2]
总之，我们已证实，对天然胰岛素肽（自身免疫性糖尿病的主要自身抗原）有反应的CD8 T细胞在胸腺中被选择，并在外周激活后变得高度致病，最终导致糖尿病。这些T细胞最初处于“幼稚”状态，但这种状态很容易被刺激所克服，包括直接激活或激活胰腺淋巴结或胰岛中的抗原呈递细胞。CD4 T细胞可能发挥重要作用，目前正在研究中。进一步的实验旨在鉴定促进NOD小鼠体内幼稚和“幼稚”G9细胞“转化”为具有强效β细胞破坏作用的效应细胞的内源性刺激因素。我们的研究不仅为研究胰岛素特异性CD8 T细胞在自身免疫性糖尿病中的免疫致病作用提供了一个重要的模型，而且也为更好地设计基于胰岛素的免疫疗法提供了有用的参考。[3]胰岛素β链肽(15-23)（CAS号：247044-67-3，分子式C₄₄H₇₂N₁₂O₁₃S，分子量1009.18）是CD8 T细胞最早响应的抗原表位之一，也称为INS。用于糖尿病和免疫学研究。目前尚未发现任何临床试验或监管批准。纯度≥95.68%。 |
| 分子式 |
C44N12O13SH72
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|---|---|
| 分子量 |
1009.18
|
| 精确质量 |
1008.5062
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| CAS号 |
247044-67-3
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| PubChem CID |
91808033
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| 序列 |
Leu-Tyr-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly; L-leucyl-L-tyrosyl-L-leucyl-L-valyl-L-cysteinyl-glycyl-L-alpha-glutamyl-L-arginyl-glycine; H-Leu-Tyr-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly-OH
|
| 短序列 |
LYLVCGERG; H-LYLVCGERG-OH
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to off-white solid at room temperature
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| LogP |
-2.8
|
| tPSA |
419Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
15
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
16
|
| 可旋转键数目(RBC) |
32
|
| 重原子数目 |
70
|
| 分子复杂度/Complexity |
1810
|
| 定义原子立体中心数目 |
7
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| SMILES |
[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)(C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)O)CC1C=CC(O)=CC=1
|
| InChi Key |
CPSZWYPVFBXING-PVKJLKLCSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C44H72N12O13S/c1-22(2)16-27(45)37(63)53-31(18-25-9-11-26(57)12-10-25)41(67)54-30(17-23(3)4)42(68)56-36(24(5)6)43(69)55-32(21-70)39(65)49-19-33(58)51-29(13-14-34(59)60)40(66)52-28(8-7-15-48-44(46)47)38(64)50-20-35(61)62/h9-12,22-24,27-32,36,57,70H,7-8,13-21,45H2,1-6H3,(H,49,65)(H,50,64)(H,51,58)(H,52,66)(H,53,63)(H,54,67)(H,55,69)(H,56,68)(H,59,60)(H,61,62)(H4,46,47,48)/t27-,28-,29-,30-,31-,32-,36-/m0/s1
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| 化学名 |
(4S)-4-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]acetyl]amino]-5-[[(2S)-1-(carboxymethylamino)-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid
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| 别名 |
Insulin beta Chain Peptide (15-23); 247044-67-3; Insulin ; A Chain Peptide (15-23); Insulin ?? Chain Peptide (15-23);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9909 mL | 4.9545 mL | 9.9090 mL | |
| 5 mM | 0.1982 mL | 0.9909 mL | 1.9818 mL | |
| 10 mM | 0.0991 mL | 0.4955 mL | 0.9909 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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