Sphingosine N-acyltransferase[2]

药物化合物包括碳、氢和其他元素的稳定重同位素，主要作为影响药物开发过程中测量的示踪剂。药物的药代动力学和功能范围可能导致人们对突变的担忧[1]。在猴肾细胞中，伏马菌素 B1 会改变基因表达并导致信号传输问题 [2]。在 LLC-PK1 肾细胞中，伏马菌素 B1 促进鞘脂促进的自由基消灭和鞘氨醇积聚，从而导致鞘星形胶质细胞型 DNA 损伤 [2]。

吸收、分布和排泄
镰刀菌素B1 (FB1) 是镰刀菌（Fusarium moniliforme Sheldon）次级代谢产物中的主要化合物，与某些人类和动物疾病相关。大鼠腹腔注射FB1（7.5 mg/kg）后，FB1被迅速吸收，并在注射后20分钟内达到血浆峰浓度。此后，FB1迅速从血浆中清除，呈现单指数消除过程，符合单室模型，半衰期为18分钟。收集24小时和48小时尿液样本表明，仅有16%的给药剂量以未代谢的形式经尿液排出，且全部在给药后24小时内排出。与此相反，灌胃给予相同剂量的FB1后，尿液中仅回收了0.4%的FB1。
伏马菌素B1 (FB1) 是镰刀菌（Fusarium moniliforme Sheldon）产生的一种有毒且致癌的次级代谢产物，本研究采用静脉注射或灌胃的方式对非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）进行给药。对两只雌性非洲绿猴进行静脉注射后，FB1迅速从血浆中清除，消除期的平均半衰期为40分钟。给药后5天内对尿液和粪便进行分析，结果显示FB1及其水解类似物的平均回收率为47%。另对两只雌性非洲绿猴进行了单次灌胃给予¹⁴C标记的FB1。在随后的3天内，粪便中放射性物质的排泄量平均占给药剂量的61%，尿液中排泄量为1.2%。骨骼肌（1%）、肝脏（0.4%）、脑（0.2%）、肾脏、心脏、血浆、红细胞和胆汁（均为0.1%）中均回收了少量残留放射性物质，而肠道内容物则占放射性剂量的12%。总共回收了76%的给药放射性物质。对粪便、肠道内容物和尿液的分析表明，这些样本中超过90%的放射性物质来源于伏马菌素B1及其水解产物。
已开发出一种测定非人灵长类动物（长尾猴）粪便中伏马菌素B1 (FB1)的方法。将动物注射¹⁴C标记的FB1后，用0.1 M乙二胺四乙酸反复萃取粪便中的放射性化合物。萃取液经反相（C18）固相萃取柱净化后，采用邻苯二甲醛衍生化和反相高效液相色谱法测定FB1。粪便提取物中FB1的分析方法重现性好（相对标准偏差(RSD)为2.6%），准确度高（加标空白提取物的回收率为93±2.9% RSD）。采用高效液相色谱和薄层色谱法进一步确认粪便中FB1的存在，结果表明提取的放射性物质主要为FB1及其一种新的代谢物，该代谢物的色谱性质与该真菌毒素相似。通过质谱和核磁共振波谱分析，鉴定出一种新的代谢物是部分水解的伏马菌素B1 (FB1) 的两种结构异构体的平衡混合物，这两种异构体是由该真菌毒素的一个酯基水解形成的。
真菌毒素伏马菌素B1 (FB1) 可引起动物多种健康问题，流行病学证据表明它与人类食管癌有关。我们利用离体灌注牛乳房模型研究了FB1向牛乳中的残留情况。将2 mg FB1注入3个乳房的灌注血中，并在150分钟内测定牛奶和灌注血清中的FB1水平。结果表明，FB1能够穿过乳腺屏障进入牛奶，但浓度极低，对消费者构成的风险可以忽略不计。

毒性概述
鉴定：伏马菌素B1是最常见的伏马菌素，由镰刀菌（Fusarium moniliforme）和其他镰刀菌属真菌产生。纯物质为白色吸湿性粉末，可溶于水、乙腈-水和甲醇。该物质在食品加工温度和光照下稳定。伏马菌素B1是与玉米相关的最常见的真菌代谢产物。当气候条件有利于玉米籽粒腐烂时，玉米中会显著积累伏马菌素B1。人类暴露：目前尚无与该化合物相关的急性毒性记录。现有相关性研究表明，膳食暴露与食管癌之间存在关联。其他研究对于伏马菌素B1的潜在致癌性尚无定论。动物/植物研究：伏马菌素B1对所有测试的动物物种均具有肝毒性，包括小鼠、大鼠、马科动物、猪、兔和非人灵长类动物。
除叙利亚仓鼠外，胚胎毒性或致畸性仅在母体毒性发生时或之后出现。伏马菌素对猪、大鼠、绵羊、小鼠和兔具有肾毒性。在大鼠和兔中，肾毒性剂量低于肝毒性剂量。已知伏马菌素可引起马脑白质软化症和猪肺水肿综合征。它对某一品系的雄性大鼠具有肝致癌性，对另一品系的雄性大鼠具有肾致癌性。伏马菌素B1是鞘脂从头合成代谢的特异性抑制剂。该化合物抑制细胞生长，导致游离鞘氨醇碱积累，并改变动物、植物和某些酵母（如酿酒酵母）的脂质代谢。该化合物不会诱导细菌基因突变或原代大鼠肝细胞发生非计划DNA合成，但在低浓度下会以剂量依赖的方式增加染色体畸变。该化合物具有植物毒性，会损伤细胞膜并降低叶绿素合成。根据对猪、蛋鸡和长尾猴的研究，该化合物口服吸收率低，会迅速从血浆或循环系统中清除，并随粪便排出；胆汁排泄很重要；肠肝循环在某些动物中也很重要。少量化合物会随尿液排出，部分化合物会滞留在肝脏和肾脏中。[
伏马菌素的结构与鞘脂的长链碱基骨架相似，因此它可以通过抑制神经酰胺合成酶来抑制鞘氨醇和更复杂的鞘脂的生物合成。这会导致鞘氨醇、鞘氨醇以及可能还有鞘氨醇-1-磷酸在细胞和组织中积累，进而导致细胞凋亡。霉菌毒素通常能够通过人有机阴离子转运蛋白（hOATs）和人有机阳离子转运蛋白（hOCTs）进入肝脏和肾脏。它们还能抑制这些转运蛋白对阴离子和阳离子的摄取，从而干扰内源性代谢物、药物和外源性物质（包括霉菌毒素自身）的分泌。这会导致细胞内毒性化合物的积累增加，从而引起肾毒性和肝毒性。(A704, L1937, A2947, A3014)

[1]. Impact of Deuterium Substitution on the Pharmacokinetics of Pharmaceuticals. Ann Pharmacother. 2019 Feb;53(2):211-220.

[2]. The toxicity of fumonisin B1, B2, and B3, individually and in combination, in chicken embryos. Poult Sci. 2001 Apr;80(4):401-7.

[3]. Effect of fumonisin B₁ on the cell cycle of normal human liver cells. Mol Med Rep. 2013 Jun;7(6):1970-6.

根据世界卫生组织国际癌症研究机构 (IARC) 和美国国家毒理学计划 (NTP) 的说法，伏马菌素 B1 可致癌。
2-[2-({19-氨基-6-[(3,4-二羧基丁酰基)氧基]-11,16,18-三羟基-5,9-二甲基二十烷-7-基}氧基)-2-氧代乙基]丁二酸是一种伏马菌素。
已有数据表明，在藤仓镰孢菌 (Fusarium fujikuroi) 和雷帕霉素链霉菌 (Streptomyces rapamycinicus) 中均检测到了伏马菌素 B1。
伏马菌素 B1 是由串珠镰孢菌 (Fusarium moniliforme) 产生的一种真菌毒素。它是谷物（尤其是玉米）的污染物。流行病学研究表明，伏马菌素B1与南非和中国的人类食管癌高发病率以及动物模型中的肝癌发生有关。
伏马菌素B1来源于串珠镰刀菌（Fusarium moniliforme）。伏马菌素B1是神经酰胺合成酶的抑制剂。
伏马菌素B1属于单萜类化合物。这类化合物由两个异戊二烯单元组成。
另见：伏马菌素B1（注释已移至）。

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作用机制
伏马菌素是鞘氨醇和更复杂的鞘脂生物合成的抑制剂。在真核细胞中，伏马菌素对鞘脂生物合成的抑制是由于其抑制了神经酰胺合成酶的活性。植物和动物细胞暴露于伏马菌素和/或链格孢毒素（AAL毒素）后数小时内，游离鞘氨醇浓度显著升高。部分鞘氨醇代谢为其他生物活性中间体，部分则从细胞中释放。在动物体内，游离鞘氨醇在组织中积累，并迅速出现在血液和尿液中。游离鞘氨醇碱对大多数细胞具有毒性，而复杂的鞘脂对细胞正常生长至关重要。伏马菌素B1可刺激Swiss 3T3细胞中鞘氨醇依赖的DNA合成，但在其他细胞类型中则具有线粒体抑制作用。在培养细胞中，生物活性长链鞘氨醇碱的积累和复杂鞘脂的消耗显然是导致伏马菌素抑制细胞生长、增加细胞死亡以及（在Swiss 3T3细胞中）促有丝分裂作用的因素。鞘脂代谢紊乱虽然直接影响细胞，但也可能间接影响某些组织。例如，伏马菌素B1在体外会损害内皮细胞的屏障功能。对内皮细胞的不良影响可能间接导致伏马菌素引起的神经毒性和肺水肿。据推测，伏马菌素诱导的靶组织鞘脂组成变化可能直接或间接地导致所有与串珠镰刀菌相关的疾病。
伏马菌素在体外是鞘氨醇（鞘氨醇）N-酰基转移酶（神经酰胺合成酶）的抑制剂，并且对该酶的两种底物（鞘氨醇和脂肪酰辅酶A）均表现出竞争性抑制作用。从伏马菌素B1中去除三羧酸基团可使其效力降低至少10倍；伏马菌素A1（氨基乙酰化）基本无活性。对多种细胞类型（肝细胞、神经元、肾细胞、成纤维细胞、巨噬细胞和植物细胞）的研究表明，伏马菌素B1不仅能阻断复杂鞘脂的生物合成，还会导致鞘氨醇的积累。部分鞘氨醇代谢为1-磷酸酯，并进一步降解为十六醛和磷酸乙醇胺，后者可掺入磷脂酰乙醇胺中。鞘氨醇也会从细胞中释放出来，由于其存在于血液和尿液中，因此可作为暴露的生物标志物。这些生物活性化合物的积累以及复杂鞘脂的消耗可能是伏马菌素毒性乃至致癌性的原因。
由镰刀菌（Fusarium moniliforme）产生的伏马菌素B1属于一类新型鞘氨醇类似物真菌毒素，广泛存在于食物链中。流行病学研究表明，伏马菌素B1与中国和南非的人类食管癌相关。伏马菌素B1还会导致猪急性肺水肿和马脑白质软化症。这种疾病被认为是由于伏马菌素B1抑制细胞内神经酰胺的合成所致。为了进一步研究其发病机制，本研究考察了FB1对大鼠C6胶质瘤细胞在24小时孵育后的细胞活力（3～54 μM）、蛋白质合成（2.5～20 μM）、DNA合成（2.5～50 μM）以及细胞周期（3～18 μM）的影响。细胞活力检测结果显示，FB1浓度为3 μM和54 μM时，分别导致C6细胞死亡率达到10.2%和47.4%。若细胞预先用维生素E（25 μM）孵育24小时，则FB1诱导的细胞毒性可得到有效抑制。此外，FB1还表现出表观遗传学特性，因为它能诱导DNA高甲基化（9～18 μM）。 FB1对蛋白质合成的抑制作用显著，IC50值为6 μM，表明C6胶质瘤细胞对FB1非常敏感；然而，在FB1浓度高达20 μM时，DNA合成仅受到轻微抑制。流式细胞术分析显示，与对照组相比，9 μM FB1处理组S期细胞比例显著降低（p = 0.01），从18.7±2.5%降至8.1±1.1%。与对照组相比，9 μM FB1处理组G2/μM期细胞比例显著增加（p < 0.05），从45.7±0.4%增至54.8±1.1%，而G0/G1期细胞比例未见变化。这些结果表明，细胞毒性浓度的FB1可诱导大鼠C6神经胶质瘤细胞发生G2/μM期细胞周期阻滞，这可能与基因毒性事件有关。
伏马菌素的分子作用机制尚不清楚；然而，这些化合物与鞘氨醇具有显著的结构相似性，鞘氨醇是鞘磷脂、脑苷脂、硫脂、神经节苷脂和其他鞘脂的长链（鞘氨醇类）骨架。鞘脂被认为参与细胞生长、分化和肿瘤转化的调控，其机制可能包括参与细胞间通讯和细胞-基质相互作用，以及可能通过与细胞受体和信号系统的相互作用。用伏马菌素B1和B2孵育大鼠肝细胞可抑制(14)C丝氨酸掺入细胞鞘脂的鞘氨醇部分，IC50值为0.1 μM。相反，伏马菌素B1增加了生物合成中间体鞘氨醇的含量，这表明伏马菌素抑制(14)C-鞘氨醇转化为N-酰基-(14)C-鞘氨醇，而这一步骤被认为先于鞘氨醇4,5-反式双键的引入。与此机制相符，伏马菌素B1抑制大鼠肝微粒体中鞘氨醇N-酰基转移酶（神经酰胺合成酶）的活性，在浓度约为0.1 μM时抑制率达50%，并降低完整肝细胞中(3)H-鞘氨醇向(3)H-神经酰胺的转化。伏马菌素B1（1 μM）几乎完全抑制肝细胞中(14)C-鞘氨醇的生成。

13C34H59NO15

755.58

721.388

1217458-62-2

Fumonisin B1;116355-83-0

3431

Powder

2 °C

-0.5

289

8

16

31

50

1070

0

O([13C]([13CH2][13C@H]([13C](=O)O)[13CH2][13C](=O)O)=O)[13C@@H]([13CH2][13C@@H]([13CH3])[13CH2][13C@H]([13CH2][13CH2][13CH2][13CH2][13C@@H]([13CH2][13C@H]([13C@H]([13CH3])N)O)O)O)[13C@@H]([13C@@H]([13CH3])[13CH2][13CH2][13CH2][13CH3])O[13C]([13CH2][13C@H]([13C](=O)O)[13CH2][13C](=O)O)=O

UVBUBMSSQKOIBE-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C34H59NO15/c1-5-6-9-20(3)32(50-31(44)17-23(34(47)48)15-29(41)42)27(49-30(43)16-22(33(45)46)14-28(39)40)13-19(2)12-24(36)10-7-8-11-25(37)18-26(38)21(4)35/h19-27,32,36-38H,5-18,35H2,1-4H3,(H,39,40)(H,41,42)(H,45,46)(H,47,48)

2-[2-[19-amino-6-(3,4-dicarboxybutanoyloxy)-11,16,18-trihydroxy-5,9-dimethylicosan-7-yl]oxy-2-oxoethyl]butanedioic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。