β-D-Glucopyranosyl abscisate (ABA-GE; (S)-cis,trans-Abscisic acid glucosyl ester)

别名: ABA-GE; (S)-cis,trans-Abscisic acid glucosyl ester; β-D-Glucopyranosyl abscisate (S)-顺式、反式脱落酸葡萄糖基酯
目录号: V64509 纯度: ≥98%
β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸 (ABA-GE) 是一种可水解的脱落酸 (ABA) 缀合物,在液泡和内质网中积累。
β-D-Glucopyranosyl abscisate (ABA-GE; (S)-cis,trans-Abscisic acid glucosyl ester) CAS号: 21414-42-6
产品类别: Terpenoids
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸(ABA-GE)是一种可水解的脱落酸(ABA)结合物,主要在液泡和内质网中积累。在脱水和盐胁迫等非生物胁迫条件下,β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸可发生解聚,从而快速生成游离的ABA。β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸有助于维持ABA的稳态。
beta-D-吡喃葡萄糖基脱落酸(ABA-GE;CAS 21414-42-6)是植物激素脱落酸(ABA)的可水解结合物。它是ABA的葡萄糖酯,作为ABA在植物细胞中的非活性储存形式,主要积累在液泡和内质网中。ABA-GE有助于维持ABA的稳态,并允许在脱水、盐胁迫和低温胁迫等非生物胁迫条件下快速释放游离ABA。其分子式为C21H30O9,分子量为426.46。它是一种天然存在于植物中的化合物,包括拟南芥、番茄等。
生物活性&实验参考方法
靶点
The biological target of ABA-GE is not the ABA receptors themselves. ABA-GE is an inactive conjugate that is stored in cellular compartments. Its biological function is achieved after enzymatic hydrolysis to release the active hormone, free abscisic acid (ABA). The hydrolysis is catalyzed by beta-glucosidase enzymes (e.g., AtBG1, AtBG2 in Arabidopsis, and similar enzymes in other plants). Free ABA then binds to its receptors, the PYR/PYL/RCAR family of proteins, which are soluble START-domain proteins. ABA binding to these receptors inhibits the activity of type 2C protein phosphatases (PP2Cs), relieving their repression of SnRK2 kinases. This leads to phosphorylation and activation of downstream transcription factors (e.g., ABI5, AREB/ABF), resulting in stress-responsive gene expression, stomatal closure, and other adaptive responses. Thus, ABA-GE indirectly targets the ABA signaling pathway upon deconjugation.
体外研究 (In Vitro)
为应对脱水和盐胁迫等非生物胁迫,内质网和液泡中的β-葡萄糖苷酶会将β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸(ABA-GE)去结合,以促进游离ABA的快速生成。由于β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸是胞质溶胶输出的主要ABA代谢产物,因此它也有助于维持ABA的稳态。在拟南芥中,β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸通过质子反向转运和ATP结合盒等机制进行液泡运输[1]。
体外实验表明,β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸(ABA-GE)在大多数植物生物测定中不具有生物活性,除非它水解成游离的ABA。在种子萌发测定中,ABA-GE与游离ABA相比仅表现出微弱的ABA样活性。游离ABA在浓度低至0.1-1 uM时即可有效抑制种子萌发,而ABA-GE需要高10-100倍的浓度才能达到相同的效果,这表明其活性是由于极少的自发水解或种子中存在β-葡萄糖苷酶活性所致。在用RD29A-LUC报告基因转染的拟南芥原生质体进行的ABA响应基因表达测定中,ABA-GE的活性远低于ABA,证实该缀合物本身不被ABA受体识别。在无细胞测定中,ABA-GE稳定,不会直接抑制PP2C活性或激活SnRK2s。该化合物用作纯化β-葡萄糖苷酶的底物,以研究ABA脱结合动力学。
体内研究 (In Vivo)
在体内,ABA-GE 在植物的 ABA 稳态和胁迫响应中发挥着至关重要的作用。在拟南芥中,正常情况下 ABA-GE 会积累在液泡和内质网中。当植物暴露于非生物胁迫(干旱、盐胁迫、低温)时,ABA-GE 会被 β-葡萄糖苷酶(例如 AtBG1、AtBG2)迅速水解,释放出游离的 ABA。这种快速的去结合作用使植物能够在几分钟内提高 ABA 水平而无需从头合成,从而实现快速的适应性响应。胁迫引起的细胞 pH 值变化也可能促进水解。在某些植物物种中,ABA-GE 可以通过木质部和韧皮部运输,作为一种长距离信号分子。外源施用 ABA-GE(例如叶面喷施或根部灌溉)可以诱导植物的胁迫耐受性,但这种作用依赖于结合物水解为游离 ABA。在过表达β-葡萄糖苷酶基因的转基因植物中,ABA-GE水平降低,游离ABA水平升高,从而增强了植物的抗逆性,但有时也会导致生长受阻。相反,β-葡萄糖苷酶突变体则会积累ABA-GE,并表现出应激反应受损。ABA-GE在哺乳动物系统中不活跃,因为哺乳动物缺乏ABA受体。
酶活实验
一种用于评估β-葡萄糖苷酶水解ABA-GE的非细胞(无细胞)方案采用重组AtBG1酶。AtBG1(拟南芥β-葡萄糖苷酶1)在大肠杆菌中表达,并通过亲和层析纯化。根据酶的最适pH值,测定缓冲液为50 mM乙酸钠(pH 5.0)或50 mM HEPES(pH 7.0)。在脱糖基化测定中,50 uL反应混合物包含50 ug纯化的AtBG1、10-500 uM ABA-GE和测定缓冲液,总体积为100 uL。反应在30℃下孵育15-60分钟。反应通过加入100 uL 0.1%三氟乙酸(TFA)乙腈溶液终止。将混合物离心,取上清液,采用反相高效液相色谱法(HPLC)在260 nm波长下进行紫外检测(或采用液相色谱-质谱联用(LC-MS))。使用C18色谱柱(例如,250 × 4.6 mm),以1 mL/min的流速,用含0.1%三氟乙酸(TFA)的水和含0.1%三氟乙酸的乙腈梯度进行洗脱。ABA-GE在约8-10分钟洗脱,游离ABA在12-14分钟洗脱。通过比较峰面积与纯ABA标准曲线,定量释放的ABA量。计算酶活性(单位:每分钟每毫克蛋白质释放的ABA的纳摩尔数)。为测试抑制剂的作用,向反应体系中加入1 mM葡萄糖酸内酯或其他β-葡萄糖苷酶抑制剂。通过测量不同底物浓度(10-500 uM)下的初始速率来确定 ABA-GE 的米氏常数(Km)和 Vmax。
细胞实验
评估ABA-GE在植物中生物活性的典型体外细胞实验方案是拟南芥种子萌发试验。拟南芥(野生型,Col-0)种子先用70%乙醇进行表面消毒(1分钟),再用20%漂白剂消毒(10分钟),然后用无菌蒸馏水冲洗5次。种子在4℃黑暗条件下进行2-3天的低温层积处理以打破休眠。在发芽试验中,将30-50粒种子置于含有20 mL 1/2 Murashige and Skoog (MS)培养基(0.5×MS盐,1%蔗糖,0.8%琼脂,pH 5.7)的9 cm培养皿中,培养基中添加不同浓度的ABA-GE(0.1、0.5、1、5、10、25、50 uM)或游离ABA作为阳性对照(0.1、0.5、1 uM)。对照组培养皿中加入等体积的溶剂(例如,0.1% DMSO或乙醇)。将种子置于生长箱中,在22℃下持续光照(或16小时光照/8小时黑暗)培养。连续3-7天,每天记录发芽情况(定义为胚根伸出1 mm)。计算各浓度下的发芽率。除非种子具有能将ABA-GE转化为ABA的β-葡萄糖苷酶活性,否则浓度高达10 uM的ABA-GE预计对种子萌发几乎没有影响。在某些种子批次中,内源性β-葡萄糖苷酶可能导致部分水解,从而在高浓度(25-50 uM)下产生中度抑制作用。相比之下,游离ABA在0.5-1 uM浓度下即可完全抑制种子萌发。该检测方法用于鉴定ABA代谢或β-葡萄糖苷酶的突变体。
动物实验
由于ABA-GE是一种植物激素,不适用于动物实验,因此不适用其体内动物实验方案。本文描述了一种利用拟南芥评估ABA-GE在植物抗旱性中作用的体内实验方案,用于植物胁迫研究。拟南芥(野生型,Col-0)植株种植于装有蛭石和盆栽混合土(1:1)的花盆中,并在受控条件下(22℃,16小时光照/8小时黑暗,60%相对湿度)培养4周。在胁迫处理前一天,将土壤浇透,然后停止浇水10-14天(干旱胁迫)。在胁迫期间,对照组植株正常浇水。为了测试ABA-GE的应用效果,将浓度为10-50 μM的ABA-GE溶液(溶于0.01% Tween-20或0.1% DMSO)以10 mL/盆的体积喷洒在植物上(足以覆盖叶片),分别在干旱胁迫前24小时或胁迫开始时进行。对照组植物仅喷洒溶剂。在干旱胁迫期间,每日记录叶片萎蔫百分比,并采用重量法测定土壤含水量。在胁迫结束时(此时对照组植物出现严重萎蔫),对植物进行重新浇水,并在3天后评估存活率。收获叶片,通过LC-MS/MS测定游离ABA水平,并通过qRT-PCR检测胁迫响应基因(例如RD29A、RD22、ABF3)的表达。如果植物能够将ABA-GE水解为活性ABA,则预期ABA-GE处理能够提高植物的耐旱性。然而,其效果可能不如直接进行 ABA 治疗那么明显。
药代性质 (ADME/PK)
ABA-GE的药代动力学(PK)数据仅适用于植物。在植物中,ABA-GE由UDP-葡萄糖基转移酶(UGTs)催化ABA合成,主要包括UGT71B6、UGT71C5及其相关酶。ABA-GE积累于液泡和内质网中,并以非活性形式储存。ABA-GE在植物组织中的半衰期因β-葡萄糖苷酶的活性而异。在胁迫条件下,ABA-GE可迅速水解,游离ABA水平在数分钟内升高。该化合物也可通过木质部和韧皮部运输,从而实现长距离信号传导。在溶液中,ABA-GE在中性pH条件下稳定,但在酸性条件下可水解。由于ABA-GE并非人类治疗药物,因此目前尚无哺乳动物的ADME数据。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
ABA-GE是一种天然存在的植物代谢物,在食物中常见的浓度下对哺乳动物无毒。许多植物,包括许多水果和蔬菜,都含有ABA-GE这种天然成分。处理ABA-GE时应遵循标准的实验室安全预防措施,包括佩戴手套、实验服和护目镜。该化合物应储存在-20℃的环境中,避光防潮。它仅供研究使用,未经监管部门批准,不得用于人类治疗、诊断或农业用途。截至2026年,ABA-GE尚未被批准作为药物或杀虫剂使用,尽管ABA本身在一些国家已注册为植物生长调节剂。
参考文献

[1]. Vacuolar transport of abscisic acid glucosyl ester is mediated by ATP-binding cassette and proton-antiport mechanisms in Arabidopsis. Plant Physiol. 2013;163(3):1446‐1458.

其他信息
(+)-脱落酸β-D-吡喃葡萄糖酯是由β-D-吡喃葡萄糖衍生的(+)-脱落酸D-吡喃葡萄糖酯。其功能与(+)-脱落酸和β-D-吡喃葡萄糖相关。据报道,(+)-脱落酸β-D-吡喃葡萄糖酯存在于中华沙拉西亚(Salacia chinensis)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)以及其他具有相关数据的生物体中。
β-D-吡喃葡萄糖基脱落酸(ABA-GE)是植物激素脱落酸(ABA)的无活性葡萄糖酯结合物。它是植物细胞中ABA的主要储存形式,定位于液泡和内质网。β-葡萄糖苷酶(例如AtBG1、AtBG2)可使其脱结合,从而在干旱、高盐和低温等非生物胁迫下迅速释放游离ABA,实现快速适应性反应。ABA-GE也可通过木质部和韧皮部运输,作为长距离信号分子发挥作用。其分子式为C21H30O9,分子量为426.46。该化合物是研究ABA稳态、胁迫信号传导和植物生理学的常用工具。目前尚未获准用于人类或动物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C21H30O9
分子量
426.4575
精确质量
426.188
CAS号
21414-42-6
PubChem CID
46173811
外观&性状
White to off-white solid
LogP
-0.2
tPSA
154
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
9
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
30
分子复杂度/Complexity
766
定义原子立体中心数目
6
SMILES
CC1=CC(=O)CC([C@]1(/C=C/C(=C\C(=O)O[C@H]2[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O)O)/C)O)(C)C
InChi Key
HLVPIMVSSMJFPS-VTEUUMMASA-N
InChi Code
InChI=1S/C21H30O9/c1-11(5-6-21(28)12(2)8-13(23)9-20(21,3)4)7-15(24)30-19-18(27)17(26)16(25)14(10-22)29-19/h5-8,14,16-19,22,25-28H,9-10H2,1-4H3/b6-5+,11-7-/t14-,16-,17+,18-,19+,21-/m1/s1
化学名
[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] (2Z,4E)-5-[(1S)-1-hydroxy-2,6,6-trimethyl-4-oxocyclohex-2-en-1-yl]-3-methylpenta-2,4-dienoate
别名
ABA-GE; (S)-cis,trans-Abscisic acid glucosyl ester; β-D-Glucopyranosyl abscisate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 50 mg/mL (117.24 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3449 mL 11.7244 mL 23.4489 mL
5 mM 0.4690 mL 2.3449 mL 4.6898 mL
10 mM 0.2345 mL 1.1724 mL 2.3449 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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