| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
mitochondria-targeted superoxide dismutase mimetic
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Mito-tempo（MT）是一种线粒体靶向的超氧化物歧化酶模拟物，通过抑制过氧亚硝酸盐的形成来保护对乙酰氨基酚（APAP）肝毒性的早期阶段。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在这两个时间点，Mito-TEMPO (MT) 均显着抑制 ALT 活性的上升并减少坏死区域，表明 Mito-TEMPO 的保护作用在 APAP 后持续至少 24 小时。在 APAP 肝毒性的后期，Mito-Tempo 可引起继发性细胞凋亡。通过阻断 RIP3，Mito-Tempo 会导致二次细胞凋亡，以响应过多的 APAP[1]。
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| 酶活实验 |
半胱氨酸蛋白酶活性测定和蛋白质印迹
如所述测量肝脏半胱天冬酶活性（Lawson等人，1999）。简言之，将冷冻肝组织在含有5mM EDTA、2mM DTT和0.1%CHAPS的25mM HEPES缓冲液中匀浆，然后离心得到匀浆。将荧光底物（Ac-DEVD-AFC）加入到匀浆中，并在存在或不存在泛胱天蛋白酶抑制剂（z-VAD-fmk）的情况下测量荧光。结果表示为每单位时间每毫克蛋白质浓度的RFU。使用兔抗胱天蛋白酶3抗体和兔抗β-肌动蛋白抗体以及抗RIP3抗体，如所述（Bajt等，2000）进行蛋白质印迹。使用山羊抗兔HRP缀合的抗体对蛋白质进行可视化。
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| 细胞实验 |
组织学[1]
将石蜡包埋的肝组织样本切成5μm切片，用苏木精和伊红（H&E）染色，以评估凋亡与坏死（Gujral等人，2002）。如前所述（Knight等人，2002），使用兔多克隆抗硝基酪氨酸抗体和Dako LSAB过氧化物酶试剂盒进行硝基酪氨酸染色。使用切割的胱天蛋白酶-3（Asp175）抗体进行活性胱天蛋白酶3染色。按照制造商的说明，使用原位细胞死亡检测试剂盒AP对细胞死亡进行末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）染色。
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| 动物实验 |
动物
8-12周龄的雄性C57BL/6J小鼠饲养于环境控制室，光照/黑暗周期为12小时。RIP3缺陷型小鼠（C57BL/6N背景）和C57BL/6N野生型小鼠在实验前适应环境，可自由摄取食物和水。 实验设计 小鼠禁食过夜（16-18小时）后，腹腔注射300 mg/kg的对乙酰氨基酚（APAP），该药物溶于温生理盐水中。在评估RIP3缺陷的影响的实验中，部分小鼠注射200 mg/kg的对乙酰氨基酚（APAP）。在注射对乙酰氨基酚（APAP）后1.5或3小时，腹腔注射20 mg/kg的Mito-Tempo，该药物溶于生理盐水中。部分小鼠在服用对乙酰氨基酚（APAP）2小时后，腹腔注射10 mg/kg Z-VD fmk（EP1013，溶于Tris缓冲盐溶液）或溶剂对照。为模拟APAP过量患者的临床治疗，部分小鼠在APAP过量后1.5或3小时腹腔注射解毒剂NAC（500 mg/kg）。部分小鼠在APAP给药后0-24小时内，于异氟烷麻醉下放血处死。另一些小鼠腹腔注射100 μg/kg马流产沙门氏菌内毒素（ET）和700 mg/kg半乳糖胺（Gal），持续6小时。用肝素化注射器抽取血液，离心后获得血浆。使用Pointe Scientific公司（密歇根州）的ALT检测试剂盒测定血浆ALT活性。将肝组织切成小块，用 10% 磷酸盐缓冲福尔马林固定用于组织学检查，或用液氮速冻后储存于 -80°C。 体内吗啉代寡核苷酸治疗 用于 RIP3 的反义序列为 5'-TAGGCCATAACTTGACAGAAGACAT-3'。所有对照吗啉代寡核苷酸治疗均使用来自 Gene Tools 的标准体内对照寡核苷酸序列。吗啉代寡核苷酸按制造商提供的方式使用，并以腹腔注射的方式（12.5 mg/kg 体重）每 24 小时一次，连续 2 天。在第 3 天进行对乙酰氨基酚 (APAP) 治疗。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
此前有研究报道，线粒体靶向超氧化物歧化酶模拟物Mito-tempo (MT)的延迟治疗可通过抑制过氧亚硝酸盐的生成，保护小鼠免受对乙酰氨基酚(APAP)早期肝毒性的侵害。然而，这种保护作用是否能持续到毒性的后期尚不清楚。为了研究这种后期保护作用，我们用300 mg/kg APAP处理C57Bl/6J小鼠，并在1.5小时或3小时后分别给予20 mg/kg MT。结果发现，两种MT治疗均能保护小鼠免受APAP晚期肝毒性的侵害（12小时和24小时）。令人惊讶的是，MT治疗组小鼠的肝细胞凋亡显著增加，而坏死表型几乎仅见于单独使用APAP治疗的小鼠。此外，MT治疗组小鼠肝脏中caspase-3的活性和裂解也显著增加。免疫组化染色显示，活性 caspase-3 阳性染色的肝细胞仅位于小叶中心区。在对乙酰氨基酚 (APAP) 给药后 2 小时，使用泛 caspase 抑制剂 ZVD-fmk (10 mg/kg) 治疗可中和 caspase 激活，并进一步保护肝脏免受 APAP 肝毒性损伤。目前治疗 APAP 中毒的标准疗法 N-乙酰半胱氨酸 (NAC) 可起到保护作用，但不会诱导细胞凋亡表型。机制上，MT 治疗抑制了 APAP 诱导的 RIP3 激酶表达，而 RIP3 缺陷小鼠的肝细胞中也出现了与 MT 治疗类似的 caspase 激活和凋亡形态。这些数据表明，虽然坏死是 APAP 肝毒性后细胞死亡的主要原因，但抗氧化剂 MT 治疗可能在某些细胞中将细胞死亡模式转变为继发性凋亡。线粒体氧化应激和RIP3激酶表达的调节在这一转变过程中起着关键作用。[1]线粒体氧化损伤会导致多种退行性疾病。因此，选择性抑制线粒体氧化损伤是一种很有前景的治疗策略。一种方法是研发能够选择性地在患者体内线粒体中积累的抗氧化剂。这类线粒体靶向抗氧化剂是通过将亲脂性三苯基膦阳离子与抗氧化剂部分（例如泛醇或α-生育酚）偶联而开发的。这些化合物能够轻易穿过所有生物膜，包括血脑屏障，并进入肌肉细胞，从而到达受线粒体氧化损伤影响最大的组织。此外，由于它们带正电荷，在膜电位的驱动下，它们在线粒体内积累数百倍，从而增强了线粒体免受氧化损伤的保护作用。这些化合物在口服给药后能够保护线粒体免受损伤，因此可能成为线粒体保护疗法的基础。本文回顾了这类线粒体靶向抗氧化剂的背景和迄今为止的研究进展。[2]
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| 分子式 |
C29H37CLN2O3P
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|---|---|
| 分子量 |
528.04
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| 精确质量 |
528.23
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| CAS号 |
1569257-94-8
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| 相关CAS号 |
Mito-TEMPO;1334850-99-5
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| PubChem CID |
73504624
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| tPSA |
34.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
36
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| 分子复杂度/Complexity |
612
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C([P+](C1C=CC=CC=1)(C1C=CC=CC=1)C1C=CC=CC=1)C(NC1CC(C)(C)N([O])C(C)(C)C1)=O.[Cl-].O |^1:28|
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| InChi Key |
AIAJCDXYZBOVGT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H34N2O2P.ClH.H2O/c1-28(2)20-23(21-29(3,4)31(28)33)30-27(32)22-34(24-14-8-5-9-15-24,25-16-10-6-11-17-25)26-18-12-7-13-19-26;;/h5-19,23H,20-22H2,1-4H3;1H;1H2
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8938 mL | 9.4690 mL | 18.9380 mL | |
| 5 mM | 0.3788 mL | 1.8938 mL | 3.7876 mL | |
| 10 mM | 0.1894 mL | 0.9469 mL | 1.8938 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Sirtuin modulator 9
Tebufenpyrad-d3
D-Histidine hydrochloride hydrate
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