| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
CYP2C8 (IC50 = 1.4 μM); CYP2B6 (IC50 = 2.0 μM); CYP3A (IC50 = 2.3 μM); CYP2C19 (IC50 = 2.5 μM); CYP2D6 (IC50 = 2.5 μM); CYP2E1 (IC50 = 2.7 μM); CYP2C9 (IC50 = 3.3 μM); CYP2J2 (IC50 = 3.3 μM); CYP2A6 (IC50 = 3.8 μM (IC50); CYP1A2 (IC50 = 4.0 μM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
DL-乙酰紫草素的 IC50 值分别为 5.2 μM 和 3.0 μM,抑制 CYP3A 介导的睾酮(睾酮)和硝苯地平的代谢,表明它以不依赖于底物的方式抑制 CYP3A 活性 [1]。 DL-乙酰紫草素没有观察到时间依赖性抑制作用[1]。
乙酰紫草素是一种从紫草根中分离出来的具有抗癌和抗炎活性的生物活性化合物。最近发现乙酰紫草素对CYP2J2活性有抑制作用。基于这一结果,本研究扩展到使用底物鸡尾酒孵育试验评估乙酰紫草素对人肝微粒体(HLMs)中九种不同细胞色素P450(P450)亚型的抑制作用。乙酰紫草素对所有P450均有很强的抑制作用,IC50值为1.4-4.0μm。乙酰紫草素与HLMs和NADPH预孵育不会改变抑制效力,表明乙酰紫草素不是一种基于机制的抑制剂。SKF-525A是一种广泛使用的非特异性P450抑制剂,对CYP1A2、2A6、2E1和2J2没有抑制活性,但对CYP2B6、CYP2C19和2D6有抑制作用,IC50值分别为2.5、3.6和0.5μm。我们的研究结果表明,乙酰紫草素可能是一种新型的P450抑制剂,可以取代SKF-525A[1]。 |
| 酶活实验 |
可逆抑制研究[1]
所有孵育均进行三次,数据以平均值表示。使用合并的HLM评估了Acetylshikonin/乙酰紫草素、紫草素和SKF-525A对CYP2J2介导的阿司咪唑O-脱甲基酶活性的抑制作用。简而言之,孵育反应混合物在0.1 m m磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中含有0.25 mg/ml HLMs、阿司咪唑(1μm)和抑制剂(0.5-50μm),并在37°C下预孵育5分钟。通过加入NADPH生成系统(含有1.3 m m NADP+、3.3 m m G6P、3.3μm MgCl2和500单位/ml G6PDH)引发反应。培养混合物的最终体积为100μl。在15分钟的孵育期后,通过加入含有15ng/ml特非那定的冰冷乙腈作为内标(IS)来停止反应。离心后,将等分试样(1μl)注入液相色谱-串联质谱系统(LC-MS/MS),如前所述(Lee,Wu,&Liu,2014)。 为了评估乙酰紫草素、紫草素和SKF-525A对其他九种P450亚型(即CYP1A2、2A6、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、2E1和3A)的抑制活性,使用了之前开发的底物鸡尾酒法(Joo&Liu,2013;Kim等人,2005)。表1列出了每种代谢物的底物浓度、选定的反应监测(SRM)转变和确定的碰撞能量。在抑制剂存在或不存在的情况下,将HLMs(0.25mg/ml)温育15分钟后,终止反应并离心混合物。如前所述(Joo&Liu,2013;Kim等人,2005),通过LC-MS/MS分析上清液的等分试样,并进行了一些修改。如前所述,还评估了乙酰紫草素对CYP3A介导的睾酮和硝苯地平代谢的抑制作用(Lee,Shon,&Liu,2016)。 时间依赖性抑制研究[1] 使用IC50偏移法测量时间依赖性抑制(TDI)。在NADPH生成系统的存在下,将HLM(0.25 mg/ml)与五种不同浓度(0.5-50μm)的抑制剂(乙酰紫草素或麻风酸)预孵育30分钟。使用已知的非特异性和时间依赖性P450抑制剂(Song等人,2014)作为阳性对照。通过加入P450底物引发反应,进一步孵育样品15分钟,然后通过加入100l含有IS的冰冷乙腈。离心后,用LC-MS/MS分析上清液的等分试样。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
乙酰紫草素是一种乙酸酯和羟基-1,4-萘醌。
据报道,乙酰紫草素存在于紫草属植物(Arnebia decumbens)、紫草属植物(Arnebia euchroma)以及其他有相关数据的生物体中。 然而,乙酰紫草素对所有测试的P450酶均表现出强烈的抑制活性,IC50值均小于5.0 μM。这些结果表明,该化合物对所有十种P450酶的抑制活性相似,IC50值在1.4–4.0 μM范围内(表2),且其抑制作用强于已知的非特异性P450抑制剂——紫草酸(2.0 μM ≤ IC50 ≤ 11.4 μM)以及常用的SKF-525A。乙酰紫草素还能抑制CYP3A介导的睾酮和硝苯地平代谢,其IC50值分别为5.2 μM和3.0 μM,表明其以底物非依赖的方式抑制CYP3A活性。这些实验表明,在人肝微粒体(HLM)中,乙酰紫草素对这十种P450同工酶的非特异性抑制作用比SKF-525A和紫草酸更强。与乙酰紫草素类似,其结构类似物紫草素也对十种P450同工酶表现出强烈的抑制作用(IC50 < 5.2 μM,表2)。接下来,本研究探讨了NADPH的存在是否会导致IC50值的变化(表2)。在NADPH生成系统存在的情况下,乙酰紫草素对十种P450同工酶的抑制活性(0.7 μM ≤ IC50 ≤ 1.8 μM)与未处理的人肝微粒体(HLM)中的抑制活性(0.9 μM ≤ IC50 ≤ 3.3 μM)相似,表明乙酰紫草素并非时间依赖性抑制剂。乙酰紫草素(5 μM)对所有测试的P450同工酶的抑制率均超过60%(图1),而SKF-525A对其任何靶向同工酶(CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9和CYP2E1)的抑制率均未超过10%。在之前的研究中,乙酰紫草素以非竞争性方式抑制CYP2J2介导的阿司咪唑O-去甲基酶活性(Park et al., 2017)。因此,推测乙酰紫草素也能以非竞争性方式抑制其他九种P450酶。 总之,本研究评估了乙酰紫草素对P450同工酶的抑制潜力。结果表明,乙酰紫草素以NADPH非依赖性方式强烈抑制十种P450同工酶的活性。这些结果提示,在利用人肝微粒体(HLM)进行反应表型分析的研究中,乙酰紫草素可以替代SKF-525A或紫草酸,作为一种新型的非特异性P450抑制剂。[1] |
| 分子式 |
C18H18O6
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|---|---|
| 分子量 |
330.331925868988
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| 精确质量 |
330.11
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| CAS号 |
54984-93-9
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| 相关CAS号 |
Acetylshikonin;24502-78-1
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| PubChem CID |
32464
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
2.691
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| tPSA |
100.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
599
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C(C)=O)C(C/C=C(\C)/C)C1=CC(C2C(=CC=C(C=2C1=O)O)O)=O
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| InChi Key |
WNFXUXZJJKTDOZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H18O6/c1-9(2)4-7-15(24-10(3)19)11-8-14(22)16-12(20)5-6-13(21)17(16)18(11)23/h4-6,8,15,20-21H,7H2,1-3H3
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| 化学名 |
[1-(5,8-dihydroxy-1,4-dioxonaphthalen-2-yl)-4-methylpent-3-enyl] acetate
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| 别名 |
Acetylshikonin; 54984-93-9; DL-Acetylshikonin; 24502-78-1; [1-(5,8-dihydroxy-1,4-dioxonaphthalen-2-yl)-4-methylpent-3-enyl] acetate; Shikonin, acetyl; CHEBI:81069; 1-(5,8-dihydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-2-yl)-4-methylpent-3-en-1-yl acetate;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0273 mL | 15.1364 mL | 30.2728 mL | |
| 5 mM | 0.6055 mL | 3.0273 mL | 6.0546 mL | |
| 10 mM | 0.3027 mL | 1.5136 mL | 3.0273 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。