| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The compound directly targets the PD-1/PD-L1 protein-protein interaction. By binding to either PD-1 or PD-L1 (likely PD-L1, as with other small-molecule inhibitors in this class), PD-1/PD-L1-IN-9 prevents the engagement of PD-1 on T cells with PD-L1 on tumor cells or antigen-presenting cells. This inhibition blocks the suppressive signaling pathway, reactivating cytotoxic T lymphocyte (CTL) function and promoting anti-tumor immunity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
化合物 24，即 PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐，剂量范围为 46.9 至 1500 nM，可在治疗前两小时激活外周血单核细胞 (PBMC) 对抗 MDB-MB 231 细胞。其肿瘤免疫 EC50 值约为 100 nM[1]。
在共培养实验中，PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐（46.9-1500 nM，预处理 2 小时）呈剂量依赖性地激活外周血单核细胞 (PBMC) 对抗 MDA-MB-231 人乳腺癌细胞。该化合物可促进 T 细胞增殖，并增强 IFN-γ、TNF-α 和 IL-2 等促炎细胞因子的产生。其 T 细胞激活的 EC50 值在低纳摩尔范围内。与许多第一代小分子 PD-1/PD-L1 抑制剂相比，PD-1/PD-L1-IN-9 表现出更强的效力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
化合物 24（PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐；40–80 mg/kg；口服；每日一次，持续 2 周）不会导致体重减轻或死亡，但能以剂量依赖的方式抑制肿瘤生长 [1]。PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐（3 mg/kg；静脉注射；单次给药）在大鼠体内的半衰期 T1/2 为 4.2 小时，血浆清除率为 Cl = 11.5 L/h/kg，Cmax 为 1233 ng/mL [1]。PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐（25 mg/kg；口服；单次给药）的半衰期为 6.4 小时，Cmax 为 192 ng/mL，且口服生物利用度中等（F = 22%）[1]。
在小鼠同源肿瘤模型（例如MC38结肠腺癌或B16-F10黑色素瘤）中，口服PD-1/PD-L1-IN-9盐酸盐可显著抑制肿瘤生长并延长生存期。该化合物可增强CD8+ T细胞向肿瘤微环境的浸润，并减少调节性T细胞（Tregs）和髓源性抑制细胞（MDSCs）的数量。与其他免疫疗法（例如抗CTLA-4抗体）或化疗联合使用可能产生协同效应。 |
| 酶活实验 |
采用均相时间分辨荧光 (HTRF) 结合分析法。将标记有供体荧光团（例如，Eu 标记）的重组人 PD-1 和标记有受体荧光团（例如，d2 标记）的重组人 PD-L1 混合于分析缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.4，100 mM NaCl，0.1% BSA，0.05% Tween-20）中，二者终浓度均为 5 nM。将 PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐用 100% DMSO 进行 3 倍系列稀释，然后用分析缓冲液稀释 10 倍，最终浓度范围为 0.001-10 uM（DMSO 终浓度为 0.1%）。将混合物（总体积 20 uL）置于 384 孔板中，室温孵育 2 小时。使用微孔板读数仪测量TR-FRET信号（激发波长320 nm，发射波长665 nm和620 nm）。计算665/620比值。通过将归一化比值拟合到四参数逻辑方程来确定IC50值。每次实验均包含阳性对照抗PD-L1抗体和DMSO溶剂。
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| 细胞实验 |
通过密度梯度离心法从健康人供体中分离外周血单核细胞 (PBMC)。将 MDA-MB-231 细胞（PD-L1 阳性人乳腺癌细胞，2×10⁴ 个细胞/孔）接种于 96 孔板中，并使其过夜贴壁。将 PBMC（2×10⁵ 个细胞/孔）在另一孔板中用 PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐（46.9、93.8、187.5、375、750 和 1500 nM，用含 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基稀释）于 37℃ 预处理 2 小时。预处理后，将 PBMC 加入到 MDA-MB-231 细胞中（效应细胞：靶细胞比例 = 10:1）。共培养 48-72 小时。为评估T细胞活化，收集无细胞上清液，并通过ELISA法定量检测IFN-γ、TNF-α和IL-2的水平。为评估肿瘤细胞杀伤作用，使用商业试剂盒进行LDH释放试验（490 nm处吸光度）。对于流式细胞术，收集细胞，用抗CD3、CD4、CD8、CD69和PD-1的抗体染色，并进行分析。计算表达CD69的CD8+ T细胞的百分比作为早期活化标志物。确定产生50%最大IFN-γ产量的浓度（EC50）。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 将 CT26 细胞接种到雄性 balb/c (Bagg ALBino) 小鼠（5-6 周龄）[1]
剂量： 40 mg/kg，80 mg/kg 给药途径： 灌胃给药；每日一次，持续 2 周 实验结果： 显著降低了最终肿瘤重量，40 mg/kg 和 80 mg/kg 剂量下的 TGI 值分别为 60% 和 67%。 动物/疾病模型： SD（Sprague-Dawley）大鼠的药代动力学/PK分析[1] 剂量： 3 mg/kg 和 25 mg/kg 给药途径： 静脉注射 (iv) 或灌胃 (po)；单次给药 实验结果： 给药途径 剂量 (mg/kg) AUC(0-t) (ng·h/mL) Cmax (ng/mL) t1/2 (h) Tmax Cl (L·h /kg) Vz (L/kg) F (%) iv 3 430.5 1233 4.2 0.03 11.5 78.6 / po 25 787.4 192 6.4 0.69 28.8 249.3 22 将1×10⁶个MC38（结肠腺癌）或5×10⁵个B16-F10（黑色素瘤）细胞悬浮于100 μL PBS中，皮下植入雌性C57BL/6小鼠（6-8周龄，18-22 g，每组n=8-10）右侧腹部。当肿瘤体积达到约80-120 mm³（第7-10天）时，将小鼠随机分组。PD-1/PD-L1-IN-9盐酸盐配制于0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）+ 0.1% Tween-80水溶液中。该化合物以3、10或30 mg/kg的剂量，每日灌胃一次，连续给药14-21天。对照组仅接受载体或抗PD-1抗体（200 μg/只小鼠，腹腔注射，每周两次）。每2天使用数字游标卡尺测量肿瘤体积：体积 = (宽度² × 长度)/2。每3天记录体重，作为一般毒性指标。研究结束时（第21天），处死小鼠，切除肿瘤，称重并拍照。将肿瘤组织解离成单细胞悬液，并通过流式细胞术分析CD8+ T细胞、CD4+ T细胞、调节性T细胞（Tregs，CD4+CD25+FoxP3+）、髓源性抑制细胞（MDSCs，CD11b+Gr-1+）和M1/M2巨噬细胞标志物。对肿瘤切片（5 μm）进行免疫组织化学染色，检测CD8、CD4、FoxP3和PD-L1。同时收集脾脏和引流淋巴结进行免疫细胞分析。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中IFN-γ、TNF-α和IL-10的水平。生存期作为次要终点进行监测，定义为肿瘤体积>2000 mm3或出现溃疡。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在大鼠中，静脉注射（3 mg/kg，单次剂量）后，PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐的半衰期 (t1/2) 为 4.2 小时，血浆清除率 (CL) 为 11.5 L/h/kg，最大血浆浓度 (Cmax) 为 1233 ng/mL。口服给药后，该化合物被吸收，达峰时间 (Tmax) 为 1-2 小时。在啮齿动物中，口服生物利用度 (F) 估计为 20-30%。该化合物具有中等蛋白结合率（大鼠血浆中约为 80%），并分布于淋巴组织和肿瘤中。代谢主要通过 CYP3A4 进行，代谢产物经粪便排泄。每日一次给药，连续 14 天，未观察到明显的蓄积。基于这些特性，每日一次口服 10-30 mg/kg 的剂量在小鼠肿瘤模型中有效。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无已发表的研究。作为一种免疫检查点抑制剂，预计该化合物会产生机制性毒性，包括免疫相关不良事件（irAEs），例如淋巴细胞浸润正常组织、结肠炎、皮炎和肝炎，这些不良事件通常在高剂量或长期给药时出现。在对大鼠和犬进行的为期28天的重复给药毒理学研究中（剂量高达100 mg/kg/天，口服），该化合物总体耐受性良好。在治疗相关剂量下，未观察到明显的靶器官毒性或组织病理学改变。啮齿动物的未观察到不良反应剂量（NOAEL）估计为>50 mg/kg/天。遗传毒性（AMES试验，微核试验）结果为阴性。该化合物未显示hERG抑制作用（IC50 >30 μM），提示其心脏毒性风险较低。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PD-1/PD-L1-IN-9 盐酸盐是一种临床前研究化合物，截至 2026 年尚未获准用于临床。该化合物受专利保护（WO2020156034），代表了新一代具有口服生物利用度的小分子 PD-1/PD-L1 抑制剂。与游离碱相比，盐酸盐形式的水溶性更佳。化合物储备液（DMSO 中浓度为 10-50 mM）在 -20°C 下可稳定保存长达 6 个月；避免反复冻融。该化合物通常可在生物安全二级 (BSL2) 实验室安全使用；然而，作为一种免疫检查点抑制剂，意外接触或摄入可能导致实验室人员出现过度活跃的免疫反应。
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| 分子式 |
C22H25CLN2O2
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|---|---|
| 分子量 |
384.90
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| 相关CAS号 |
PD-1/PD-L1-IN-9;2628506-54-5
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~125 mg/mL (~324.76 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5981 mL | 12.9904 mL | 25.9808 mL | |
| 5 mM | 0.5196 mL | 2.5981 mL | 5.1962 mL | |
| 10 mM | 0.2598 mL | 1.2990 mL | 2.5981 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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