| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 0.25 nM (CD73)[1]
OP-5244 sodium targets CD73, a glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored membrane protein that is the rate-limiting enzyme for extracellular adenosine production. CD73 is overexpressed on many cancer cells and stromal cells within the tumor microenvironment (TME). High CD73 expression correlates with poor prognosis and resistance to immunotherapy in various solid tumors. By binding to CD73 and blocking its enzymatic activity, OP-5244 sodium prevents the conversion of AMP to adenosine. This reduces the levels of immunosuppressive adenosine in the TME, leading to increased T cell proliferation, activation, and effector function. It may also enhance the efficacy of immune checkpoint inhibitors such as anti-PD-1/PD-L1 antibodies. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在H1568（非小细胞肺癌）细胞中，OP-5244抑制腺苷（ADO）的合成，EC50值为0.79±0.38 nM[1]。OP-5244以0.22 nM的EC50值抑制外周血CD8+ T淋巴细胞中AMP水解为ADO[1]。OP-5244（4.1-1000 nM；96 h）可恢复AMP抑制的CD8+ T细胞增殖和细胞因子产生[1]。在人源和鼠源癌细胞系（分别为H1568和EMT6）中，OP-5244（0.01 nM-10 μM）可完全抑制ADO的合成[1]。
体外研究已证实OP-5244钠具有强效的CD73抑制活性。在利用重组人CD73进行的无细胞酶活性测定中，OP-5244钠的IC50值为0.25 nM，表明其具有亚纳摩尔级的效力。在表达CD73的癌细胞系（例如MDA-MB-231乳腺癌细胞、A375黑色素瘤细胞）中，用OP-5244钠（0.1-100 nM，1-4小时）处理可抑制CD73的酶活性，该活性可通过AMP转化为腺苷的速率来测定。该化合物还能逆转腺苷介导的T细胞增殖抑制作用（在共培养实验中）。在用抗CD3/CD28抗体激活的原代人T细胞中，腺苷（10 uM）可抑制细胞增殖50%以上。添加 OP-5244 钠 (1-100 nM) 可通过阻断外源性 AMP 产生腺苷，以剂量依赖的方式恢复 T 细胞增殖。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
如小鼠肿瘤生长抑制实验所示，OP-5244（15 mg/kg/天；皮下注射，持续13天）单独使用时具有抗肿瘤作用[1]。OP-5244（150 mg/kg；口服，每日两次，持续16天）可逆转小鼠的免疫抑制[1]。它还能促进CD8+ T细胞浸润。OP-5244（0.2 mg/kg；静脉注射）的稳态分布容积较低（大鼠0.22 L/kg/h，犬0.29 L/kg/h，猕猴0.10 L/kg/h），血浆清除率中等（大鼠0.18 h，犬1.22 h，猕猴4.6 h）[1]。因此，其末端消除半衰期较长（大鼠8.5 h，犬0.82 h，猕猴4.6 h）。 OP-5244 (10 mg/kg; 口服) 在大鼠和狗体内的 Cmax 和 AUC 分别为 0.82、1.25 和 1.72 μM 和 14.2 μM·h。
OP-5244钠的体内活性可从其作为CD73抑制剂的药理机制和特性推断得出。作为一种口服生物利用度高的化合物，预计它能降低同源小鼠肿瘤模型中的肿瘤内腺苷水平并增强抗肿瘤免疫力。相关的CD73抑制剂已在结肠癌（CT26）、乳腺癌（4T1、EMT6）和黑色素瘤（B16-F10）小鼠模型中显示出疗效。口服此类抑制剂（通常每日一次或两次，每次30-100 mg/kg）可抑制肿瘤生长，增加CD8+ T细胞向肿瘤的浸润，并与抗PD-1疗法联合使用时增强疗效。基于其高活性（IC50 0.25 nM），预计OP-5244钠将表现出相似或更优的体内活性。 |
| 酶活实验 |
无细胞 CD73 酶活性测定用于测定 OP-5244 钠的 IC50 值。将重组人 CD73 (0.1-1 nM) 与不同浓度的 OP-5244 钠 (0.01-100 nM) 在测定缓冲液（25 mM Tris-HCl，pH 7.4，5 mM MgCl2）中于 37℃ 孵育 15 分钟。加入 50 uM AMP 启动反应。37℃ 孵育 30 分钟后，将反应体系加热至 95℃ 并保持 2 分钟以终止反应。使用孔雀绿磷酸盐检测试剂盒测定 AMP 释放的无机磷酸盐的量。或者，也可以通过 HPLC 或 LC-MS/MS 定量分析生成的腺苷量。IC50 值根据抑制曲线计算得出（IC50 = 0.25 nM）。对于高通量形式，可以采用发光 ADP 检测分析（例如 ADP-Glo 激酶分析）来测量 CD73 活性。
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| 细胞实验 |
将表达CD73的癌细胞（例如MDA-MB-231或A375细胞）接种于96孔板（1×10⁴个细胞/孔），并使其贴壁24小时。用OP-5244钠（0.01-1000 nM）处理细胞1小时。更换新鲜培养基，加入含AMP（100 uM）的培养基，并在37℃下孵育60分钟。收集上清液，并使用腺苷ELISA试剂盒或LC-MS/MS测定腺苷浓度。计算CD73活性抑制率。对于T细胞增殖实验，使用磁珠分离法从外周血单核细胞（PBMC）中分离人CD8+ T细胞。将CFSE标记的T细胞（1×10⁵个细胞/孔）在腺苷（10 uM）和AMP（100 uM）存在下，用抗CD3/CD28磁珠刺激，并加入OP-5244钠（0.1-100 nM）。72小时后，通过流式细胞仪检测CFSE稀释度来评估细胞增殖，并用ELISA法检测上清液中的细胞因子（IFN-γ、IL-2、TNF-α）。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 患有乳腺癌的 balb/c (Bagg ALBino) 小鼠[1]
剂量： 15 mg/kg/天 给药途径： 皮下注射，持续 13 天 实验结果： 抑制肿瘤生长。与载体组相比，ADO/AMP 比值降低了 95%。 采用同源小鼠肿瘤模型（例如，BALB/c小鼠的CT26结肠癌或EMT6乳腺癌）评估OP-5244钠的体内疗效。将5×10⁵个CT26细胞皮下注射到6-8周龄雌性BALB/c或C57BL/6小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到80-120 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。将OP-5244钠配制成合适的载体（例如，0.5%甲基纤维素或10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45%生理盐水），每日口服一次或两次，剂量范围为10-100 mg/kg。治疗持续14-21天。每周用游标卡尺测量两次肿瘤体积。监测体重作为毒性指标。研究结束时，收集肿瘤和脾脏进行免疫分析：采用流式细胞术分析肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）（CD8+、CD4+、FoxP3+ Tregs），并采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定肿瘤内腺苷水平。也可进行与抗PD-1抗体（200 μg/只小鼠，腹腔注射，每周两次）联合用药的研究，以评估协同作用。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
OP-5244钠的分子式为C19H28ClN5NaO9P。该化合物以固体形式供应，应储存在-20℃的密封容器中，避光防潮，在此条件下可稳定保存长达3年。溶液储存时，应在-80℃下保存长达6个月。该钠盐形式可溶于水和DMSO。口服时，该化合物可配制成0.5%甲基纤维素或其他口服载体。该化合物是CD73（EC 3.1.3.5）的抑制剂，CD73是癌症免疫治疗的潜在靶点。本产品仅供研究使用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用，不可用于人体治疗。目前尚无该化合物的具体毒性数据。然而，CD73 是一种普遍表达的酶，其抑制可能产生生理效应，包括调节血管通透性、血小板聚集和疼痛感知。在其他 CD73 抑制剂的临床前研究中，小鼠口服剂量高达 100 mg/kg 通常耐受性良好，未见明显毒性。OP-5244 钠是一种强效化合物（IC50 为 0.25 nM），因此应注意避免吸入粉末或皮肤接触。应遵循标准的实验室安全操作规程（佩戴手套、实验服和护目镜）。该化合物尚未获得 FDA 批准。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CD73是腺苷免疫抑制通路中的关键酶。CD73产生的胞外腺苷作用于免疫细胞表面表达的A2A和A2B腺苷受体，抑制T细胞和NK细胞的功能，促进调节性T细胞（Treg）的分化，并增强髓源性抑制细胞（MDSC）的活性。阻断CD73是克服癌症免疫耐药性的一种有前景的策略。OP-5244钠是一种高效的口服活性CD73抑制剂，其IC50值低于纳摩尔级，使其成为研究腺苷通路在肿瘤免疫中作用的宝贵化学探针。该化合物可单独使用，也可与免疫检查点抑制剂联合使用。它还可用于自身免疫性疾病的研究。其母体非氘代化合物也称为OP-5244。本产品尚未获得临床批准。请勿包含供应商信息。
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| 分子式 |
C19H28CLN5NAO9P
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|---|---|
| 分子量 |
559.87
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| 相关CAS号 |
OP-5244;2381268-71-7
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~33.33 mg/mL (~59.53 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7861 mL | 8.9306 mL | 17.8613 mL | |
| 5 mM | 0.3572 mL | 1.7861 mL | 3.5723 mL | |
| 10 mM | 0.1786 mL | 0.8931 mL | 1.7861 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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