| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Gluookinase (GCK). GKA50 quarterhydrate is a potent glucokinase activator that binds to the allosteric site of the glucokinase enzyme. Glucokinase catalyzes the first step of glycolysis, converting glucose to glucose-6-phosphate, and serves as the glucose sensor in pancreatic beta-cells, regulating insulin secretion in a glucose-dependent manner. Activation of glucokinase by GKA50 lowers the glucose threshold for insulin secretion, increases the maximum rate of glucose phosphorylation, and enhances glucose-stimulated insulin secretion (GSIS). By mimicking the effects of elevated glucose, GKA50 enhances beta-cell metabolism, leading to increased ATP/ADP ratio, closure of ATP-sensitive K+ channels, depolarization, Ca2+ influx, and insulin exocytosis.
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| 体外研究 (In Vitro) |
GKA50（0.01-100 μM；24 小时）可促进 INS-1 细胞增殖，其 EC50 值介于 1 和 2 μM 之间[2]。在 INS-1 细胞中，GKA50（1.2 μM + 40 μM 葡萄糖；2-4 天）处理可降低长期高糖诱导的细胞凋亡[2]。GKA50 的 EC50 值为 0.022 μM，可启动人葡萄糖激酶的酶活性。GKA50 的 EC50 值为 0.065 μM，可增加胰岛瘤细胞系 INS-1 的胰岛素分泌。GKA50 通过调节葡萄糖激酶和凋亡蛋白 BAD，减轻慢性高糖诱导的细胞凋亡[2]。
体外实验表明，GKA50 四分之一水合物是一种强效的葡萄糖激酶激活剂，在 5 mM 葡萄糖浓度下 EC50 值为 33 nM。该化合物以浓度依赖的方式刺激小鼠胰岛和 MIN6 胰岛瘤细胞释放胰岛素。GKA50 作为一种葡萄糖样激活剂，促进 β 细胞代谢，增强葡萄糖利用和 ATP 生成。该化合物还能以剂量依赖的方式增加细胞内 Ca2+ 水平，这与其作为 Ca2+ 依赖性胰岛素分泌调节剂的作用相符。在啮齿动物和人胰岛制备物中，GKA50 在低于阈值的葡萄糖浓度下增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌 (GSIS)，有效降低胰岛素释放的葡萄糖设定点。在没有葡萄糖的情况下，它不会诱导胰岛素分泌。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在口服葡萄糖耐量试验中，GKA50（1-30 mg/kg；po）显著降低了血糖水平[1]。
GKA50四分之一水合物已在多种体内模型中进行了研究，以评估其降血糖功效。在糖尿病啮齿动物模型（例如db/db小鼠、高脂饮食喂养的小鼠、链脲佐菌素处理的大鼠）中，急性或慢性给予GKA50均可降低空腹和餐后血糖水平。口服GKA50（3-30 mg/kg）可增强体内葡萄糖刺激的胰岛素分泌，从而改善口服葡萄糖耐量试验（OGTT）中的葡萄糖耐量。在灌注胰腺标本中，GKA50可增强葡萄糖刺激的第一时相胰岛素分泌。与其他葡萄糖激酶激活剂的研究结果一致，长期使用GKA50可能还有助于维持β细胞功能和数量。然而，低血糖是葡萄糖激酶激活的潜在风险，限制了其治疗应用的发展。 |
| 酶活实验 |
体外酶活性测定中，将重组人葡萄糖激酶 (GCK) 与不同浓度的 GKA50 四水合物 (0.1-1000 nM)、5 mM 葡萄糖、2.5 mM MgCl2、1 mM DTT 在测定缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.1）、5 mM 葡萄糖、2.5 mM ATP 以及包含葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G6PDH) 和 NADP+ 的偶联酶系统一起孵育。反应在 37℃ 下进行 30-60 分钟，并通过 340 nm 处的吸光度监测 NADPH 的生成。或者，也可以使用比色法试剂盒在 96 孔板中测定葡萄糖激酶活性。EC50 值通过使用四参数逻辑模型拟合剂量反应曲线来确定。与无水形式相比，四水合物形式不影响结合动力学。
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| 细胞实验 |
细胞增殖测定[2]
细胞类型： INS-1 细胞（用 3 μM 葡萄糖饥饿过夜） 测试浓度： 0.01-100 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 以剂量依赖的方式刺激细胞增殖，EC50 值范围为 1 至 2 μM。 细胞功能检测中，将MIN6小鼠胰岛瘤细胞或分离的小鼠原代胰岛接种于96孔板中，培养基为含10% FBS和11 mM葡萄糖的RPMI-1640培养基。胰岛素分泌研究中，将细胞或胰岛在低葡萄糖（2.8 mM）KRB缓冲液中预孵育2小时。预孵育后，将细胞置于含2.8 mM或5-20 mM葡萄糖的KRB缓冲液中，加入GKA50四水合物（0.1-1000 nM），于37℃孵育1小时。收集上清液，并用ELISA或HTRF法测定胰岛素浓度。对于细胞内Ca2+测量，将预先用Fluo-4 AM（2-5 uM，孵育30-40分钟）加载的MIN6细胞用GKA50处理，并使用荧光酶标仪（激发波长494 nm，发射波长516 nm）监测Ca2+流。对于葡萄糖利用研究，将细胞与3H-2-脱氧葡萄糖孵育，并通过液体闪烁计数法定量摄取量。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 高脂喂养的肥胖雌性 Zucker (fa/fa) 大鼠[1]
剂量： 1、3、10、30 mg/kg 给药途径： 口服 实验结果： 血糖显著降低。 在急性体内疗效研究中，雄性C57BL/6J小鼠（8-10周龄）或db/db糖尿病小鼠禁食过夜（14-16小时）。GKA50四分之一水合物配制于0.5%甲基纤维素或10% DMSO/0.5%羟丙基甲基纤维素（HPMC）中，并以1-30 mg/kg的剂量通过灌胃法给药。在口服葡萄糖耐量试验（OGTT）中，小鼠在口服葡萄糖负荷（1-2 g/kg葡萄糖溶液）前30分钟接受化合物或赋形剂。使用血糖仪测量小鼠在口服葡萄糖后-30、0、15、30、60、90和120分钟的尾静脉血糖水平。为了评估胰岛素分泌，将血液样本收集到肝素化毛细管中，分离血浆进行胰岛素ELISA检测。在慢性研究（7-28天）中，小鼠每日给药一次或两次，并在整个研究期间监测体重、食物摄入量、糖化血红蛋白（HbA1c）和血糖水平。在治疗期结束时，通过口服葡萄糖耐量试验（OGTT）评估药效学。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无GKA50四分之一水合物的具体药代动力学数据。作为一种小分子葡萄糖激酶激活剂，根据其口服给药后的体内疗效，预计GKA50具有良好的口服生物利用度。四分之一水合物（每个分子含0.25个水分子）与无水形式相比，其溶解度和溶出速率并无显著变化。对于此类典型的葡萄糖激酶激活剂，其在啮齿动物体内的血浆半衰期为2-6小时，血药浓度峰值（Cmax）出现在给药后1-2小时，口服生物利用度为30-70%。该化合物可能通过细胞色素P450酶（CYP3A4、CYP2C9）进行肝脏代谢。血浆蛋白结合率可能为中等至高（>80%）。该四分之一水合物是一种药学上可接受的结晶水合物形式，这种固态形式在药物研发中常用于改善药物的稳定性和操作性能。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无GKA50四水合物的具体毒性数据。作为一种葡萄糖激酶激活剂，其主要剂量限制性毒性风险是由于胰岛素分泌增强（与血糖水平无关）而导致的低血糖。在动物研究中，高剂量（例如>30 mg/kg）的GKA50可能导致血糖水平降至正常范围以下（低血糖），进而引起嗜睡、癫痫发作或死亡等症状。尚未有关于该化合物遗传毒性或器官毒性的报道。在其他葡萄糖激酶激活剂的慢性毒性研究中，部分病例观察到肝脂肪变性（脂肪肝），这归因于肝脏葡萄糖利用率和脂质合成增加。四水合物形式未发现其他毒性。应遵循研究用化学品的标准操作规程。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GKA50 是一种典型的葡萄糖激酶激活剂，其化学类别与临床候选药物 AZD1656 类似。其名称中的“四分之一水合物”表示其化学计量比为 0.25 的水合物，每个母体化合物分子 (C26H28N2O6·0.25H2O) 含有 0.25 个水分子。这种含水量与结晶固体形式相符，与无水形式相比，结晶固体形式可能具有更优的药理性质（例如，溶解度、稳定性）。葡萄糖激酶 (GK) 是葡萄糖稳态的关键酶，GK 激活剂已被广泛研究用于治疗 2 型糖尿病 (T2DM)。GKA50 四分之一水合物是一种研究工具，用于研究葡萄糖激酶在葡萄糖感知和胰岛素分泌中的作用。尽管已有几种葡萄糖激酶激活剂进入临床试验，但目前尚无任何一种获得 FDA 批准；其研发受到低血糖风险和长期安全性问题（例如，肝脂肪变性）的限制。本产品仅供研究使用。
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| 分子式 |
C26H28N2O6.1/4H2O
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|---|---|
| 分子量 |
469.01
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| 相关CAS号 |
GKA50;851884-87-2
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~46 mg/mL (~98.08 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1322 mL | 10.6608 mL | 21.3215 mL | |
| 5 mM | 0.4264 mL | 2.1322 mL | 4.2643 mL | |
| 10 mM | 0.2132 mL | 1.0661 mL | 2.1322 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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