| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 1mg | ||
| 5mg | ||
| 10mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
EGF binds with high affinity to the epidermal growth factor receptor (EGFR, also known as ErbB1/HER1), a transmembrane receptor tyrosine kinase. Upon ligand binding, EGFR undergoes dimerization, autophosphorylation at specific tyrosine residues, and activation of downstream signaling cascades including the MAPK/ERK pathway, PI3K/Akt pathway, and PLCgamma/PKC pathway, leading to cell proliferation, survival, migration, and differentiation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在伤口愈合应用中，表皮生长因子 (EGF) 被广泛应用[1]。在成纤维细胞系 BALB/c3T3 中，表皮生长因子 (EGF) 可促进细胞分裂。除了诱导 EGF 受体表达和增殖细胞核抗原 (PCNA) 的表达外，水凝胶释放的表皮生长因子 (EGF) 还保持了其生物活性，并展现出改善糖尿病伤口愈合的治疗潜力。
体外实验表明，EGF是一种强效促有丝分裂剂，可刺激成纤维细胞（BALB/c3T3细胞系）、上皮细胞和内皮细胞的增殖。从水凝胶中释放的EGF能够保持其生物活性，诱导EGF受体和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，并促进细胞迁移。它启动多种细胞事件，从早期事件（例如，数分钟内刺激氨基酸或离子转运）到后期事件（例如，细胞启动DNA合成）。EGF还能刺激分离的大鼠肝细胞中丙酮酸激酶的磷酸化和糖异生作用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，EGF可加速伤口愈合，促进上皮化和肉芽组织形成，并增强动物模型中糖尿病伤口的愈合。它能刺激表皮细胞增殖，并应用于伤口愈合治疗。EGF还能促进血管生成和血管形成。在糖尿病模型中，研究表明从水凝胶中释放的EGF在促进糖尿病伤口愈合方面具有增强的治疗潜力。此外，EGF还参与胚胎发育过程中多种组织和器官的形成。
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| 酶活实验 |
对于受体结合实验，将纯化的 EGFR（0.5-1 ug/孔）固定在 96 孔板上。用 1% BSA 的 PBS 溶液在室温下封闭 1 小时。加入 125I 标记的 EGF（10-100 pM），同时加入或不加入未标记的 EGF 或 EGF 磷酸盐（1 pM-1 uM），溶于结合缓冲液（50 mM HEPES，0.1% BSA，pH 7.4）中。4℃ 孵育 2 小时。用冷的 PBS 洗涤 3 次，加入闪烁液，用 γ 计数器测量结合的放射性。对于非放射性实验，使用 FITC 标记的 EGF 并测量荧光偏振。通过非线性回归计算结合亲和力 (Kd) 和竞争性 IC50 值。
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| 细胞实验 |
将BALB/c3T3成纤维细胞或人角质形成细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。进行增殖实验时，将细胞置于含0.5%胎牛血清的培养基中饥饿12-24小时。用浓度为0.1-100 ng/mL的EGF磷酸盐处理细胞24-48小时。通过MTT法、细胞计数或3H-胸苷掺入法评估细胞增殖。进行信号通路研究时，用浓度为10-100 ng/mL的EGF处理细胞0-60分钟。制备细胞裂解液，并使用针对磷酸化EGFR（Tyr1068）、磷酸化ERK1/2（Thr202/Tyr204）、磷酸化Akt（Ser473）及其下游靶点的特异性抗体进行Western blot分析。对于划痕愈合实验，在汇合的单层细胞上划出划痕，用PBS缓冲液洗涤，加入含EGF（10-50 ng/mL）的培养基，并在0、6、12和24小时通过显微镜观察伤口愈合情况。对于细胞迁移实验，使用孔径为8 um的Transwell小室。在下室中加入EGF（0.1-100 ng/mL）作为趋化因子。
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| 动物实验 |
对于伤口愈合研究，可使用糖尿病大鼠模型（例如，链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠）或db/db小鼠。在背部制造全层切除伤口（直径6-8毫米）。每日一次局部涂抹EGF磷酸盐水凝胶或溶液，持续7-14天。通过数码摄影和面积测量法监测伤口愈合情况。处死动物后，切除伤口组织，用福尔马林固定，石蜡包埋，切片，并用苏木精-伊红染色，进行组织学评估，以观察再上皮化和肉芽组织形成情况。进行增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki-67和CD31（血管生成）的免疫组织化学染色。对于非糖尿病伤口模型，可使用正常大鼠或小鼠。将伤口愈合率量化为原始伤口面积的百分比。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
表皮生长因子（EGF）是一种由53个氨基酸组成的肽，分子量约为6.2 kDa。全身给药（静脉或皮下）后，EGF在啮齿动物体内的血浆半衰期很短，仅为10-30分钟，这是由于其通过受体介导的内吞作用以及在肝肾中被蛋白水解酶快速清除所致。磷酸盐形式可以提高制剂稳定性，且不会显著改变其药代动力学。局部应用可最大限度地减少全身吸收，大部分EGF仍保留在伤口部位。在人体中，局部滴眼给药后，泪液中EGF浓度迅速升高，并在4小时后恢复至基线水平，而血清EGF水平未见明显变化。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
表皮生长因子（EGF）在用于局部伤口愈合的治疗剂量下通常耐受性良好。动物研究和人体临床试验中，局部应用EGF均未观察到明显的全身毒性。重组人表皮生长因子（rhEGF）滴眼液已在健康受试者中进行I期临床试验，结果显示其安全性和耐受性良好，未发生严重不良事件。理论上，全身应用高剂量EGF可能促进细胞增殖，包括潜在的肿瘤生长，但这对于局部伤口愈合应用而言并非问题。应遵循处理蛋白质的标准实验室预防措施（避免吸入、皮肤接触）。
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| 参考文献 |
[1]. Wong WR, et al. Applications, and efficient large-scale production, of recombinant human epidermal growth factor. Biotechnol Genet Eng Rev. 2001;18:51-71.
[2]. Lao G, et al. Controlled release of epidermal growth factor from hydrogels accelerates wound healing in diabetic rats. J Am Podiatr Med Assoc. 2012 Mar-Apr;102(2):89-98. |
| 其他信息 |
磷酸表皮生长因子（EGF）是一种采用重组DNA技术生产的重组人表皮生长因子（rhEGF）肽。它可用于多种研究应用，包括伤口愈合、组织工程、细胞培养（作为干细胞、类器官和上皮细胞培养的补充剂）以及细胞增殖和侵袭研究。磷酸盐配方可增强其在水溶液中的稳定性。仅供研究使用；未经监管部门批准，不得用于临床治疗。
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| 分子量 |
6-12KDa
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|---|---|
| 相关CAS号 |
Epidermal growth factor (EGF);62253-63-8
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :≥ 3.33 mg/mL
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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