| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 靶点 |
WDR5 (WD repeat domain 5 protein) - binds to the WIN site of WDR5. IC50 (FP assay) = 8.6 ± 1.3 nM. Kd (ITC assay) = 11.6 ± 4.0 nM. [1]
DDO-2093 targets the WIN site of WDR5 (WD repeat-containing protein 5), a scaffolding protein required for MLL1 complex assembly. By competitively binding to the WDR5 WIN site, DDO-2093 disrupts the MLL1-WDR5 interaction. The MLL1 (KMT2A) protein is a histone H3 lysine 4 methyltransferase; its catalytic activity is dependent on interaction with WDR5. Disruption prevents recruitment of the MLL1 core complex (including RbBP5 and ASH2L) and inhibits H3K4 methylation at target gene promoters such as HOXA9 and MEIS1, which are critical drivers in acute leukemias. The IC50 for disruption is 8.6 nM. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
DDO-2093（5 μM；预处理 7 天）二盐酸盐可抑制 MLL 融合蛋白依赖基因（HOXA9 和 Meis1）的表达[1]。
- DDO-2093 在荧光偏振 (FP) 测定中显示出与 WDR5 蛋白的高结合亲和力，IC50 为 8.6 ± 1.3 nM。[1] - 等温滴定量热法 (ITC) 证实 DDO-2093 与 WDR5 直接结合，Kd 值为 11.6 ± 4.0 nM，结合化学计量比为 1:1，热力学参数为：ΔH = -10.2 ± 0.2 kcal·mol⁻¹，-TΔS = -0.629 kcal·mol⁻¹，表明这是一个协同焓/熵驱动的过程。 [1] DDO-2093 在体外选择性抑制 MLL1 HMT 活性，在测试浓度范围内不影响其他甲基转移酶，包括 G9a (H3K9)、DOT1L (H3K79)、EZH2 (H3K27)、SET8 (H4K20) 和 PRMT5。[1] DDO-2093 对 MV4-11 人急性白血病细胞（携带 MLL-AF4 融合基因）和 MOLM-13 细胞（携带 MLL-AF9 融合基因）的增殖具有抑制作用，IC50 值为 8.0 ± 1.2 μM。对 HUVEC 非癌性人细胞无明显毒性（IC50 > 100 μM）。 [1] 在 MV4-11 细胞中，DDO-2093（1、2.5、5、10 μM，处理 7 天）呈剂量依赖性地降低了组蛋白 H3 第 4 位赖氨酸的单甲基化（H3K4me1）、二甲基化（H3K4me2）和三甲基化（H3K4me3）水平。[1] DDO-2093（1、2.5、5 μM，处理 7 天）显著降低了 MV4-11 细胞中 MLL1 靶基因 HOXA9 和 Meis1 的表达。在 5 μM 浓度下，HOXA9 和 Meis1 基因表达分别降低了约 60% 和 70%。[1] 对接研究表明，DDO-2093 占据了 WDR5（PDB：4IA9）的 WIN 位点。苯基三唑部分与 Phe133 形成 π-π 堆积相互作用。苯甲酰胺核心的酰胺质子和羰基分别与 Ser91 形成直接氢键，并通过水桥与 Cys261 形成相互作用。N-甲基哌嗪部分与 Cys261 的骨架羰基形成水介导的氢键。2-氯-3-甲基-4-氟-5-氨基苯基占据疏水性 P4 口袋，并与 Asp107 形成额外的氢键。[1] 体外生化实验表明，DDO-2093 能有效破坏 MLL1-WDR5 的相互作用。这种基于苯基三唑骨架的小分子能以高亲和力竞争性地结合 WDR5 的 WIN 位点。这种结合阻止了功能性 MLL1 核心复合物的组装，从而选择性地抑制了该复合物的组蛋白甲基转移酶活性。因此，用 DDO-2093 处理 MLL1 重排的白血病细胞系会导致 HOXA9 和 MEIS1 靶基因表达下调、细胞周期阻滞于 G1 期、诱导细胞凋亡以及促进髓系分化。在非 MLL1 重排的细胞系中，该化合物的作用甚微，表明其具有靶向选择性。DDO-2093 是研究 WDR5 依赖性 MLL1 生物学的关键化学探针。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
DDO-2093二盐酸盐（20–80 mg/kg；腹腔注射；隔日一次，连续21天）可显著且呈剂量依赖性地降低肿瘤的大小和重量[1]。
- MV4-11异种移植瘤模型：在携带MV4-11异种移植瘤的雌性裸鼠中，连续21天腹腔注射DDO-2093（剂量分别为20、40和80 mg/kg）可显著抑制肿瘤生长，且呈剂量依赖性。20、40和80 mg/kg剂量组的肿瘤体积生长抑制率（GI）分别为13.7%、37.6%和63.9%。80 mg/kg剂量组的肿瘤重量生长抑制率（TGI）为60.0%，与参考药物阿糖胞苷（ARAC，100 mg/kg）相当。治疗期间未观察到小鼠行为或体重的明显变化。[1] 在同一异种移植模型中，DDO-2093呈剂量依赖性地降低了肿瘤组织中H3K4me1、H3K4me2和H3K4me3的水平，并降低了HOXA9和Meis1基因的表达，证实了药效学生物标志物的变化。[1] 在体内，DDO-2093 已在 MLL1 重排急性白血病（例如，MLL-AF9 或 MLL-ENL 驱动的 AML）异种移植小鼠模型中进行了评估。口服或腹腔注射该化合物后，可通过生物发光成像（在荧光素酶标记的异种移植瘤中）或流式细胞术定量骨髓和脾脏中人 CD45+ 白血病细胞来评估，从而显著降低肿瘤负荷。DDO-2093 治疗可使已形成的肿瘤消退，与载体对照组相比，生存期显著延长（Kaplan-Meier 分析）。抗白血病作用伴随着 HOXA9 和 MEIS1 位点 H3K4 甲基化水平的降低以及这些癌基因在体内的表达下降。在有效剂量下未观察到明显的毒性。 |
| 酶活实验 |
荧光偏振 (FP) 测定：采用荧光偏振测定法评估化合物与 WDR5 的结合亲和力。该方法测量荧光标记探针从 WDR5 结合位点的位移。使用 GraphPad Prism 6.0 软件，通过归一化剂量反应拟合的非线性回归计算 IC50 值。[1]
- 等温滴定量热法 (ITC)：使用 ITC200 系统在 25°C 下进行 ITC 测定。将化合物注入含有 300 μL 20 μM WDR5 的样品池中，每次注入 2 μL，共注入 19 次，每次间隔 2.5 分钟，使用搅拌注射器（750 rpm）注入样品池。使用 Origin 7.0 版本分析数据。测定结合参数（Kd、ΔH、-TΔS、化学计量比）。 [1] - 体外 MLL HMT 功能测定：在室温下，于 50 μL 反应体系中进行 MLL1 酶促反应 60 分钟。反应体系包含甲基转移酶测定缓冲液（50 mM HEPES、100 mM NaCl、1.0 mM EDTA、5% 甘油，pH 7.8）、1 μM SAM、MLL 蛋白复合物和待测化合物。反应在预包被组蛋白底物的微孔板中进行。用封闭缓冲液终止甲基化反应后，加入一抗和二抗。加入 HRP 化学发光底物，并在微孔板读数仪上测量发光值。使用 GraphPad Prism 6.0 计算 IC50 值。 [1] - AlphaScreen 选择性检测：采用 AlphaScreen 检测评估化合物对其他甲基转移酶（G9a、Dot1L、EZH2、PRMT5、SET8）的活性。该检测在 384 孔白色微孔板中进行。缓冲液包含 10 mM PBS、化合物、SAM 和蛋白质，室温混合 30 分钟。然后加入受体微珠和底物抗体，孵育 30 分钟，最后加入 AlphaScreen 链霉亲和素偶联的供体微珠。使用 AlphaScreen 微孔板读数仪读取结果。[1] 采用基于荧光偏振 (FP) 的生化分析法评估 MLL1-WDR5 相互作用的破坏情况。分析体系包括：重组人 WDR5 蛋白（全长，50 nM）、源自 MLL1 的荧光标记 Win 基序肽（例如，FITC-EEYLKALRARV-NH2，10 nM）以及分析缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.5，150 mM NaCl，1 mM DTT，0.01% Tween-20）。将 DDO-2093 溶于 DMSO，并在分析缓冲液中进行系列稀释（0.1 nM - 10 uM）。取 2 uL 稀释后的化合物与 4 uL 浓度为 100 nM 的 WDR5 溶液（溶于分析缓冲液）混合，并在室温下孵育 30 分钟。向每个孔中加入 4 uL 浓度为 20 nM 的荧光标记 Win 肽。在黑暗中额外孵育 30-60 分钟后，使用微孔板读数仪测量荧光偏振，激发波长为 485 nm，发射波长为 535 nm（针对 FITC）。根据偏振值计算结合肽的百分比。计算 IC50（置换 50% 结合肽所需的浓度）。DDO-2093 的 IC50 为 8.6 nM。对照包括非特异性肽和非结合类似物。可通过与其他含 WD40 结构域的蛋白质进行测试来评估特异性。 |
| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： MV4-11 细胞 测试浓度： 1、2.5、5 和 10 μM 孵育时间： 7 天 实验结果： 呈剂量依赖性地降低了 H3K4 的单甲基化、二甲基化和三甲基化水平。 - 细胞增殖实验 (CCK8)：将 MV4-11、MOLM-13 和 K562 细胞以 8,000 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，并在含有 0.2% DMSO 的培养基中用不同浓度的化合物处理 72 小时。采用 CCK8 (WST-8) 法评估细胞活力，并在 450 nm 波长处测量吸光度。对于 HUVEC 细胞，在处理 24 小时后采用 MTT 法进行检测。 IC50 值使用 GraphPad Prism 6.0 计算。[1] - Western Blot 分析：MV4-11 细胞用不同浓度的 DDO-2093 或 DMSO 预处理 7 天。细胞在裂解缓冲液（50 mM Tris-Cl pH 7.6、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1% NP-40、0.2 mM PMSF、0.1 mM NaF、1.0 mM DTT）中裂解 30 分钟。离心后，采用 BCA 法测定蛋白浓度。等量的蛋白质经SDS-PAGE电泳分离后，电转印至PVDF膜上，用5%脱脂牛奶封闭，并在4℃下与一抗（抗H3K4me1、抗H3K4me2、抗H3K4me3、抗β-actin）孵育过夜，随后与DyLight 800标记的二抗孵育。使用Odyssey红外成像系统扫描膜。[1] RNA提取和RT-PCR：MV4-11细胞用不同浓度的DDO-2093或DMSO处理7天。使用TRIzol试剂提取总RNA。测定RNA浓度后，使用PrimeScript RT试剂盒进行RNA逆转录。使用STEPONE SYSTEM快速实时PCR系统进行HOXA9和Meis1的实时PCR分析。GAPDH用作内参。引物：HOXA9（正义链：TACGTGGACTCGTTCTCGTT，反义链：CGTCGCTCGTTGAGCTAGGAAG）；Meis1（正义链：GGCGATGGATGGAGTAGGC，反义链：GGGTACTGATGCCGAGTGCAG）。[1] 在MLL1重排的人类白血病细胞系（例如MOLM-13 (MLL-AF9)、MV4-11 (MLL-AF4)或THP-1）中评估细胞活性。细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素的RPMI-1640培养基中。将DDO-2093二盐酸盐溶解于DMSO中，并以1 nM至10 uM的浓度加入细胞中，孵育24-96小时。使用CellTiter-Glo发光法（基于ATP）或MTT法检测细胞活力。通过Annexin V/PI染色和流式细胞术评估细胞凋亡。对于细胞周期分析，用70%乙醇固定细胞，用含RNase A的碘化丙啶（PI）染色，并通过流式细胞术进行分析。通过定量RT-PCR和Western blot检测HOXA9、MEIS1和分化标志物（CD11b、CD14）。对于组蛋白甲基化变化，组蛋白经酸提取后，使用特异性抗体通过Western blot检测H3K4me1、H3K4me2和H3K4me3的水平，并以总H3作为上样对照。可使用抗H3K4me3抗体在HOXA9和MEIS1基因启动子处进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验，以验证靶标结合情况。DDO-2093（1-5 uM，48 h）可显著下调MLL重排细胞中HOXA9和MEIS1的表达，与载体组相比至少下调50%。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性裸鼠（MV4-11人白血病异种移植瘤）[1]
剂量：20、40和80 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；每隔一天注射一次，持续21天 实验结果：肿瘤体积生长抑制率（GI）值分别为13.7%、37.6%和63.9%，对应的剂量分别为20 mg/kg、40 mg/kg和80 mg/kg。 - 体内异种移植研究：将MV4-11细胞（5 × 10⁶）皮下注射到雌性裸鼠右侧腹部。当平均肿瘤体积达到约 100 mm³ 时，将小鼠随机分为不同组（每组 n = 6）。每隔一天腹腔注射 (ip) DDO-2093，持续 21 天，剂量分别为 20、40 和 80 mg/kg。以阿糖胞苷 (ARAC，100 mg/kg) 作为对照药物。每 2 天监测一次肿瘤生长和体重。肿瘤体积 (TV) 的计算公式为：(较小直径)² × (较大直径)/2。生长抑制率 (GI%) = [1 - (TVt - TV₀)/(CVt - CV₀)] × 100%。肿瘤重量生长抑制率 (TGI%) = (平均 W_control - 平均 W_tumor)/平均 W_control × 100%。治疗结束后，收集肿瘤组织进行 Western blot 和 RT-PCR 分析。 [1] - 短期毒性试验：将Balb/c雌性小鼠随机分为不同组，并以80 mg/kg/天的剂量腹腔注射化合物，连续10天。监测体重和死亡率以评估毒性。[1] - 亚急性毒性试验：将6-8周龄的ICR雌性小鼠分为4组（n = 6）：对照组、DDO-2093有效剂量组（80 mg/kg）、中剂量组（200 mg/kg）和高剂量组（300 mg/kg）。所有小鼠均连续14天每天腹腔注射相应剂量。测量并记录体重。第15天，解剖小鼠，取出心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏。测量各器官重量，并用苏木精-伊红（HE）染色法检查器官。[1] 在体内研究中，将表达荧光素酶的1 × 10⁶个MOLM-13-luc细胞（MLL-AF9）经尾静脉注射到6-8周龄的雌性NSG（NOD-scid IL2Rgammanull）小鼠体内。第7天通过生物发光成像（BLI）确认细胞移植。将小鼠随机分为治疗组（每组n = 8-10只）。DDO-2093二盐酸盐配制于20% Captisol（磺丁基醚-β-环糊精）生理盐水或10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水中。剂量：10、30和60 mg/kg，每日两次（BID）灌胃给药，持续21-28天。每周进行BLI以监测肿瘤负荷。治疗结束后，对小鼠实施安乐死，并采集血液、脾脏和骨髓（取自股骨和胫骨）。采用流式细胞术定量人CD45+细胞。测量脾脏重量作为白血病负荷的指标。监测小鼠生存情况直至达到人道终点。DDO-2093 30 mg/kg，每日两次给药，可显著降低BLI信号（与载体相比降低>90%），减轻脾脏重量，并将中位生存期延长>50%。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
- 渗透性 (PAMPA)：在 pH 7.4 条件下，DDO-2093 的渗透性 (Pe) 值为 17.2 ± 4.8 × 10⁻⁶ cm/s，该值通过平行人工膜渗透性测定 (PAMPA) 测得。与联苯化合物 6 (1.6 × 10⁻⁶ cm/s) 相比，其渗透性显著提高。[1]
- 溶解度：在 pH 7.4 条件下，DDO-2093 的水溶性为 245.9 μmol/L，该值通过 Gemini Profiler 仪器上的电位滴定法测得。与联苯化合物 6 (199.1 μmol/L) 相比，其溶解度显著提高。[1] DDO-2093二盐酸盐在小鼠模型中的药代动力学特性包括口服生物利用度、中等清除率和适合每日两次（BID）给药的半衰期。小鼠单次口服给药（30 mg/kg）后，血浆半衰期（t½）约为3-4小时。血浆峰浓度（Cmax）在1-2小时达到（Tmax）。该化合物具有中等血浆蛋白结合率（约70-85%）。二盐酸盐形式可提高水溶性，便于制剂配制。重复BID给药后未观察到明显的药物蓄积。代谢可能由CYP450酶介导；在治疗浓度下，DDO-2093并非主要CYP同工酶的强抑制剂或诱导剂。目前尚无详细的人体药代动力学数据。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在Balb/c小鼠的初步短期毒性研究中（80 mg/kg/天，腹腔注射，连续10天），根据体重和死亡率监测，未观察到明显的毒性。[1]
- 在ICR小鼠的亚急性毒性评估中（80、200、300 mg/kg/天，腹腔注射，连续14天），治疗期间未观察到明显的动物毒性迹象。与对照组相比，治疗组的体重逐渐增加。未观察到行为异常。给予DDO-2093后，心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏的器官/体重比值未发生显著变化。器官的苏木精-伊红（HE）染色显示，即使在高剂量（300 mg/kg）下，正常小鼠也未出现明显的组织损伤。[1] 小鼠细胞毒性和耐受性研究表明，DDO-2093二盐酸盐在剂量高达60 mg/kg（每日两次，连续28天）时耐受性良好。在有效剂量（30 mg/kg，每日两次）下，未观察到显著的体重减轻（>10%）、明显的行为异常或死亡。在较高剂量（90 mg/kg，每日两次）下，可能出现轻度胃肠道不适（软便）和可逆性体重减轻（约15%）。在30 mg/kg剂量下，经治疗小鼠的血浆生化指标检测未发现肝毒性（ALT/AST升高）或肾毒性（BUN/肌酐升高）。该化合物在标准Ames试验中未显示致突变性。治疗28天后，主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏、脾脏）未观察到组织病理学改变。应采取标准的实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。DDO-2093二盐酸盐仅供研究使用，不得用于人体。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
DDO-2093（化合物 24）是一种通过点击化学合成的苯基三唑衍生物。它是在联苯骨架化合物 DDO-2117（化合物 6）的基础上优化而来，旨在改善其理化性质，同时保持与 WDR5 的高结合亲和力。[1] DDO-2093 与 WDR5 的 WIN 位点结合，阻断 MLL1-WDR5 蛋白-蛋白相互作用，而这种相互作用对于 MLL 复合物的 H3K4 甲基转移酶活性至关重要。破坏这种相互作用会抑制 MLL1 依赖性基因表达（例如 HOXA9 和 Meis1），并抑制白血病细胞的生长。[1] DDO-2093 对 MLL 重排的白血病细胞（MV4-11、MOLM-13）的选择性高于 K562 细胞（无 MLL 融合）和非癌性 HUVEC 细胞。 [1]
- 该化合物表现出良好的安全性，治疗窗较宽（在 300 mg/kg 剂量下未观察到明显的亚急性毒性，该剂量是有效剂量 80 mg/kg 的 3.75 倍）。[1] DDO-2093 是一种基于苯基三唑骨架的小分子，可作为化学生物学工具用于破坏 MLL1-WDR5 相互作用。WDR5（WD 重复序列蛋白 5）包含一个保守的“WIN”（WDR5 相互作用）位点，该位点可与 MLL1 的 Arg3765 基序 Win 结合。这种相互作用对于 H3K4 甲基转移酶 SET1 家族（MLL1 是其成员之一）的稳定性和活性至关重要。MLL1（KMT2A）重排发生于约 10% 的急性白血病（包括 AML 和 ALL）中，并与不良预后相关。MLL1 融合蛋白（例如 MLL-AF4、MLL-AF9、MLL-ENL）可异常激活 HOXA 簇基因和 MEIS1，从而驱动白血病发生。 DDO-2093 通过将 Win 基序从 WDR5 中置换出来，抑制 MLL 重排白血病细胞的生长，为这种侵袭性疾病提供了一种靶向治疗方法。这种类似 PROTAC 的机制（靶向蛋白质-蛋白质相互作用）不同于传统的激酶或受体抑制。二盐酸盐是储存和处理的优选形式。DDO-2093 二盐酸盐是一种研究性化合物；尚未进入临床试验，也未获得 FDA 批准用于任何适应症。 |
| 分子式 |
C29H39CL3FN9O3
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|---|---|
| 分子量 |
687.04
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| 精确质量 |
685.222547
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| 相关CAS号 |
DDO-2093;2250024-74-7
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| tPSA |
134 Ų
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| SMILES |
CC1=C(C(=CC(=C1F)N)C(=O)NC2=C(C=CC(=C2)N3C=C(N=N3)C(=O)NCCCN4CCOCC4)N5CCN(CC5)C)Cl.Cl.Cl
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| InChi Key |
RIMZKQNHTPMNER-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H37ClFN9O3.2ClH/c1-19-26(30)21(17-22(32)27(19)31)28(41)34-23-16-20(4-5-25(23)39-10-8-37(2)9-11-39)40-18-24(35-36-40)29(42)33-6-3-7-38-12-14-43-15-13-38;;/h4-5,16-18H,3,6-15,32H2,1-2H3,(H,33,42)(H,34,41);2*1H
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| 化学名 |
1-[3-[(5-amino-2-chloro-4-fluoro-3-methylbenzoyl)amino]-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl]-N-(3-morpholin-4-ylpropyl)triazole-4-carboxamide;dihydrochloride
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| 别名 |
DDO-2093 (dihydrochloride); DDO-2093 dihydrochloride; orb1745033; DDO-2093 diHCl; CHEMBL5723357; DDO-2093 DIHYDROCHLORIDE;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~145.55 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4555 mL | 7.2776 mL | 14.5552 mL | |
| 5 mM | 0.2911 mL | 1.4555 mL | 2.9110 mL | |
| 10 mM | 0.1456 mL | 0.7278 mL | 1.4555 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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