| 规格 | 价格 | |
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| 5mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Receptor-interacting serine/threonine protein kinase 1 (RIP1, also known as RIPK1). RIP1 is a key regulator of cell death and inflammation, mediating both apoptosis and necroptosis. RIP1 kinase activity is involved in the activation of NF-kappaB and MAPK pathways, contributing to inflammatory responses. In pancreatic cancer, RIP1 kinase drives macrophage-mediated adaptive immune tolerance, allowing tumors to evade immune detection. GSK547 is a selective RIP1 inhibitor that blocks its kinase activity without affecting other RIP family members.
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK547 是一种强效且选择性的受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 1 (RIP1) 抑制剂，能够抑制胰腺癌中巨噬细胞介导的适应性免疫耐受。体外实验表明，GSK547 能高效抑制 RIP1 激酶活性（IC50 值在低纳摩尔范围内），并且对其他激酶具有选择性。GSK547 处理巨噬细胞可阻断 RIP1 依赖性炎症细胞因子的产生，并改变巨噬细胞的极化状态。(Rac)-GSK547 是其外消旋体，可用作研究工具或实验对照。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，GSK547 已在胰腺导管腺癌 (PDA) 的 KPC (LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre) 小鼠模型中显示出疗效。在该模型中，GSK547 治疗可抑制巨噬细胞介导的适应性免疫耐受，并促进免疫原性巨噬细胞分化，从而激活适应性免疫并保护肿瘤。在胰腺癌中，RIP1 抑制可减少肿瘤生长并增强抗肿瘤免疫。GSK547 也被用于多发性硬化症的 EAE (实验性自身免疫性脑脊髓炎) 小鼠模型中，在该模型中，RIP1 抑制可减轻神经炎症和疾病严重程度。(Rac)-GSK547 在这些研究中用作对照化合物。
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| 酶活实验 |
采用纯化的重组人RIP1激酶结构域，在384孔板中进行RIP1激酶活性测定。将该酶与ATP（1-10 uM）和荧光标记的肽底物或生物素标记的底物在测定缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.4，10 mM MgCl2，1 mM DTT，0.01% Triton X-100）中于室温孵育30-60分钟。加入不同浓度的GSK547（0.01 nM至10 uM）以确定IC₅0值。终止反应后，通过荧光偏振、时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）或AlphaScreen检测磷酸化情况。使用四参数逻辑回归，根据剂量反应曲线计算IC₅0值。(Rac)-GSK547用作对照。
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| 细胞实验 |
在细胞 RIP1 活性检测中，将巨噬细胞（例如骨髓来源巨噬细胞，BMDM，或 THP-1 等细胞系）接种于 96 孔板中。用 TNFα（10-50 ng/mL）预处理细胞以激活 RIP1 依赖性信号通路，然后用不同浓度的 GSK547 或其 (Rac) 形式（作为对照）（0.1 nM 至 10 uM）处理 1-4 小时。通过 Western blot 分析细胞裂解液中 RIP1 底物（例如 MLKL）的磷酸化水平或 NF-κB 激活标志物（p-IκB、p-p65）的表达。采用 ELISA 法检测细胞因子（TNFα、IL-6、IL-1β）的产生。坏死性凋亡检测中，通过碘化丙啶摄取或 LDH 释放来评估细胞活力。 （Rac）-GSK547 用作阴性对照。
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| 动物实验 |
为了评估GSK547在胰腺癌中的体内疗效，我们使用了KPC（LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre）基因工程小鼠模型。KPC小鼠可自发形成胰腺肿瘤，该肿瘤可模拟人类胰腺导管腺癌（PDA）。GSK547以10-100 mg/kg的剂量，每日一次或两次口服给药，持续2-4周。通过触诊、超声成像或在实验终点测量肿瘤重量来监测肿瘤生长情况。采用流式细胞术分析肿瘤浸润免疫细胞（巨噬细胞极化标志物M1：CD86、iNOS；M2：CD206、Arg1）。对于实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型，我们用MOG35-55肽和百日咳毒素免疫C57BL/6小鼠以诱导EAE。从疾病发作开始，每日口服一次GSK547（25-100 mg/kg）。每日评估临床评分（瘫痪严重程度），并采集脊髓组织进行脱髓鞘和免疫细胞浸润的组织病理学分析。(Rac)-GSK547用作对照化合物。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
(Rac)-GSK547 是 GSK547 的外消旋体，可用作研究工具或实验对照。GSK547 在 DMSO 中的溶解度≥125 mg/mL (315.35 mM)。对于体内研究，GSK547 可配制成多种溶剂，例如 10% DMSO 生理盐水、PEG400/生理盐水或 DMSO/PEG300/Tween-80/生理盐水混合物。GSK547 的 LogP 值为 1.9，tPSA 值为 85，表明其具有良好的类药性。该化合物在氮气保护下于 -20℃ 保存稳定；在溶剂中，可在 -80℃ 保存 6 个月，或在 -20℃ 保存 1 个月（氮气保护）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前研究中，GSK547 在小鼠体内治疗剂量（10-100 mg/kg）下耐受性良好，未观察到明显的体重减轻或毒性反应。动物研究表明，RIP1 抑制剂类药物具有良好的安全性。由于 RIP1 激酶参与炎症信号传导，其抑制作用可能影响正常的免疫功能，但短期研究未发现明显的免疫抑制或感染易感性增加。GSK547 的完整毒理学数据尚未公开。(Rac)-GSK547 仅供研究使用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GSK547是由葛兰素史克（GSK）公司开发的一种强效且选择性的RIP1激酶抑制剂，用于癌症免疫治疗。GSK547的发现和特性分析于2018年发表在《癌细胞》（Cancer Cell）杂志上，研究表明RIP1激酶驱动胰腺癌中巨噬细胞介导的适应性免疫耐受，而使用GSK547抑制RIP1可促进抗肿瘤免疫并抑制肿瘤生长。GSK547已成为研究肿瘤学和自身免疫性疾病中RIP1依赖性细胞死亡、炎症和免疫调节的重要研究工具。本产品仅供研究使用，尚未获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准用于人体治疗。
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| 分子式 |
C20H18F2N6O
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| 分子量 |
396.39
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| 相关CAS号 |
GSK547;2226735-55-1
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :≥ 125 mg/mL (~315.35 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5228 mL | 12.6138 mL | 25.2277 mL | |
| 5 mM | 0.5046 mL | 2.5228 mL | 5.0455 mL | |
| 10 mM | 0.2523 mL | 1.2614 mL | 2.5228 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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