| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
OX1 (EC50 = 8.29 nM); OX2 (EC50 = 187 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
在所有类似物中，EC50为64 nM的两种肽OXA（15-33）和EC50=8.29 nM的OXA（17-33）显示出最高的效力。与之前的报道相反，19个食欲素A（15-33）对我们手中的OX1受体显示出适度的选择性（约15倍）。OXA（17-33）对OX1的选择性略高（约23倍），这是迄今为止具有OX1选择性的最短类似物。尽管这种差异的原因尚不清楚，但有人提出食欲素激动剂的区分取决于表达系统。
OXA (17–33)进行进一步的SAR研究，因为它具有良好的效力和OX1偏好。首先进行丙氨酸扫描，以确定侧链对总活性的贡献（表2）。前六个N端氨基酸（17-22）的替换部分保留了OX1受体的激动剂活性，但[Al20]（EC50>3μM）除外，其与乙酰帽的类似物在高达10μM时没有OX1活性。[Al18]置换对活性的影响最小（EC50 79 nM）。24-28位的丙氨酸置换导致活性显著下降，而最后5个氨基酸（C末端）的变化导致活性完全丧失，证实了C末端区域的修饰是不可容忍的。OX2受体也存在类似的趋势。对OX1受体的偏好通常通过17-22位的取代来维持，但通过24-26位的取代而消除。N-末端的酰化对这一系列肽的激动剂活性影响很小（见支持信息）。 通过对OXA (17–33)进行d-氨基酸扫描，研究了侧链手性对活性的影响（表3）。同样，肽C末端侧（28-33）的变化导致活性完全丧失。剩余位置的变化（17-27）表明，[d-Glu18]、[d-Leu19]和[d-Leu20]类似物保留了一些活性，而所有其他类似物的激动剂效力都明显降低。有趣的是，在19-27位取代d-氨基酸似乎逆转了结合偏好，有利于OX2。例如，[d-Leu20]食欲素（17-33）类似物在OX2的活性没有变化，在OX1的活性下降了64倍；[d-His26]OXA（17–33）在OX2的活性降低了9倍，在OX1的活性下降了近700倍。这些结果表明，链取向对该区域食欲素受体结合的影响更为明显。[Tyr17]和[Glu18]对OX1保持轻微的选择性，尽管这两种类似物的激动剂活性都显著降低。 使用OXA（17-33）的脯氨酸扫描研究了更剧烈的变化对肽二级结构的影响。鉴于在之前的扫描中，C末端的修饰导致活性完全丧失，因此只对N末端的前半部分（17-22）进行了研究。17-19位脯氨酸取代产生的类似物保留了一些原始活性，[Pro18]OXA（17-33）受变化的影响最小（表4）。在20-22个位置观察到类似物的活性下降更为显著。OX1的选择性在本系列中略有保留或消除[1]。 |
| 细胞实验 |
OX1和OX2的钙动员试验[1]
通过在CHO-RD-HGA16细胞中过表达人OX1和OX2受体，创建了两个单独的稳定细胞系，这是一个稳定过表达混杂Gq蛋白Gα16的CHO细胞系。在试验前一天，将细胞以25000个细胞/孔的速度接种到96孔黑壁试验板上，加入10%胎牛血清、100单位青霉素和链霉素以及100μg/mL normocinTM。在37°C、5%CO2下孵育过夜后，取出生长培养基，用100μL预热（37°C）的测定缓冲液（1X HBSS、20 mM HEPES、2.5 mM丙磺舒，pH 7.4）轻轻洗涤细胞。细胞在37°C、5%CO2和200μL钙敏感荧光染料（½制造商推荐浓度的一半，在不含丙磺舒的钙5测定试剂盒的测定缓冲液中稀释）中孵育45分钟。在孵育期间，在测定缓冲液/0.25%BSA/1%溶剂中以10倍终浓度制备测试化合物的8点浓度曲线，并等分到96孔聚丙烯板中。45分钟后，向孔中加入25μL预处理液（测定缓冲液/2.5%BSA/10%溶剂），在37°C下孵育15分钟。在FlexStation II平板读数器中监测钙介导的荧光变化。每1.52秒测量一次荧光强度，持续19秒，以建立基线荧光，然后加入25μL的FlexStation II测试化合物，并进一步读取读数，共60秒（激发波长为485 nm，检测波长为525 nm）。绘制了峰动力学还原相对荧光单位（RFU）与化合物浓度的关系图。将数据拟合到三参数逻辑斯谛曲线以生成EC50值。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Orexin receptors are involved in a variety of physiological processes, including energy homeostasis, sleep-wake cycles, metabolism, and reward mechanisms. Developing efficient and selective ligands is an important step in elucidating the mechanisms of these key processes. This study aimed to further explore the structure-activity relationship of these peptides and identify truncated forms of orexin peptides active against OX1 receptors. Truncation studies showed that OXA(17-33) is the shortest known active peptide to date, with a 23-fold higher selectivity for OX1 receptors than for OX2 receptors. Alanine, D-amino acid, and proline scans highlighted the importance of Tyr17, Leu20, Asn25, and His26 for the agonist properties of OXA(17-33). C-terminal conformation may also be a key factor determining the agonist activity and selectivity of orexin peptides against OX1 receptors. [1]
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| 分子式 |
C81H126F3N23O24
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|---|---|
| 分子量 |
1863.00
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| 相关CAS号 |
OXA(17-33);343268-91-7
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| 序列 |
Tyr-Glu-Leu-Leu-His-Gly-Ala-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Leu-NH2
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5368 mL | 2.6838 mL | 5.3677 mL | |
| 5 mM | 0.1074 mL | 0.5368 mL | 1.0735 mL | |
| 10 mM | 0.0537 mL | 0.2684 mL | 0.5368 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Orexin A-13C18,15N3 (human, rat, mouse) TFA
OX2-2303
Orexin receptor antagonist 7
Alixorexton enantiomer
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