| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
OX1 (EC50 = 8.29 nM); OX2 (EC50 = 187 nM)
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在所有类似物中，EC50为64 nM的两种肽OXA（15-33）和EC50=8.29 nM的OXA（17-33）显示出最高的效力。与之前的报道相反，19个食欲素A（15-33）对我们手中的OX1受体显示出适度的选择性（约15倍）。OXA（17-33）对OX1的选择性略高（约23倍），这是迄今为止具有OX1选择性的最短类似物。尽管这种差异的原因尚不清楚，但有人提出食欲素激动剂的区分取决于表达系统。
OXA (17–33)进行进一步的SAR研究，因为它具有良好的效力和OX1偏好。首先进行丙氨酸扫描，以确定侧链对总活性的贡献（表2）。前六个N端氨基酸（17-22）的替换部分保留了OX1受体的激动剂活性，但[Al20]（EC50>3μM）除外，其与乙酰帽的类似物在高达10μM时没有OX1活性。[Al18]置换对活性的影响最小（EC50 79 nM）。24-28位的丙氨酸置换导致活性显著下降，而最后5个氨基酸（C末端）的变化导致活性完全丧失，证实了C末端区域的修饰是不可容忍的。OX2受体也存在类似的趋势。对OX1受体的偏好通常通过17-22位的取代来维持，但通过24-26位的取代而消除。N-末端的酰化对这一系列肽的激动剂活性影响很小（见支持信息）。 通过对OXA (17–33)进行d-氨基酸扫描，研究了侧链手性对活性的影响（表3）。同样，肽C末端侧（28-33）的变化导致活性完全丧失。剩余位置的变化（17-27）表明，[d-Glu18]、[d-Leu19]和[d-Leu20]类似物保留了一些活性，而所有其他类似物的激动剂效力都明显降低。有趣的是，在19-27位取代d-氨基酸似乎逆转了结合偏好，有利于OX2。例如，[d-Leu20]食欲素（17-33）类似物在OX2的活性没有变化，在OX1的活性下降了64倍；[d-His26]OXA（17–33）在OX2的活性降低了9倍，在OX1的活性下降了近700倍。这些结果表明，链取向对该区域食欲素受体结合的影响更为明显。[Tyr17]和[Glu18]对OX1保持轻微的选择性，尽管这两种类似物的激动剂活性都显著降低。 使用OXA（17-33）的脯氨酸扫描研究了更剧烈的变化对肽二级结构的影响。鉴于在之前的扫描中，C末端的修饰导致活性完全丧失，因此只对N末端的前半部分（17-22）进行了研究。17-19位脯氨酸取代产生的类似物保留了一些原始活性，[Pro18]OXA（17-33）受变化的影响最小（表4）。在20-22个位置观察到类似物的活性下降更为显著。OX1的选择性在本系列中略有保留或消除[1]。 |
| 细胞实验 |
OX1和OX2的钙动员试验[1]
通过在CHO-RD-HGA16细胞中过表达人OX1和OX2受体，创建了两个单独的稳定细胞系，这是一个稳定过表达混杂Gq蛋白Gα16的CHO细胞系。在试验前一天，将细胞以25000个细胞/孔的速度接种到96孔黑壁试验板上，加入10%胎牛血清、100单位青霉素和链霉素以及100μg/mL normocinTM。在37°C、5%CO2下孵育过夜后，取出生长培养基，用100μL预热（37°C）的测定缓冲液（1X HBSS、20 mM HEPES、2.5 mM丙磺舒，pH 7.4）轻轻洗涤细胞。细胞在37°C、5%CO2和200μL钙敏感荧光染料（½制造商推荐浓度的一半，在不含丙磺舒的钙5测定试剂盒的测定缓冲液中稀释）中孵育45分钟。在孵育期间，在测定缓冲液/0.25%BSA/1%溶剂中以10倍终浓度制备测试化合物的8点浓度曲线，并等分到96孔聚丙烯板中。45分钟后，向孔中加入25μL预处理液（测定缓冲液/2.5%BSA/10%溶剂），在37°C下孵育15分钟。在FlexStation II平板读数器中监测钙介导的荧光变化。每1.52秒测量一次荧光强度，持续19秒，以建立基线荧光，然后加入25μL的FlexStation II测试化合物，并进一步读取读数，共60秒（激发波长为485 nm，检测波长为525 nm）。绘制了峰动力学还原相对荧光单位（RFU）与化合物浓度的关系图。将数据拟合到三参数逻辑斯谛曲线以生成EC50值。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
食欲素受体参与多种生理过程，包括能量稳态、睡眠-觉醒周期、代谢和奖赏机制。开发高效且选择性的配体是阐明这些关键过程机制的重要步骤。本研究旨在进一步探究这些肽的构效关系，并鉴定出对OX1受体具有活性的食欲素肽的截短形式。截短研究表明，OXA(17-33)是迄今为止已知的最短活性肽，其对OX1受体的选择性比OX2受体高23倍。丙氨酸、D-氨基酸和脯氨酸扫描结果突出了Tyr17、Leu20、Asn25和His26对OXA(17-33)激动剂特性的重要性。C端构象也可能是决定食欲素肽对OX1受体激动剂活性和选择性的关键因素。[1]
|
| 分子式 |
C81H126F3N23O24
|
|---|---|
| 分子量 |
1863.00
|
| 相关CAS号 |
OXA(17-33);343268-91-7
|
| 序列 |
Tyr-Glu-Leu-Leu-His-Gly-Ala-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Leu-NH2
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5368 mL | 2.6838 mL | 5.3677 mL | |
| 5 mM | 0.1074 mL | 0.5368 mL | 1.0735 mL | |
| 10 mM | 0.0537 mL | 0.2684 mL | 0.5368 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Orexin A-13C18,15N3 (human, rat, mouse) TFA
OX2-2303
Orexin receptor antagonist 7
Alixorexton enantiomer
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
